Este documento trata sobre la resistencia antimicrobiana y el papel del laboratorio de microbiología. Brevemente describe los mecanismos de resistencia de los microorganismos, el uso indiscriminado de antibióticos y los tratamientos prolongados. También cubre temas como la selección de antibióticos, los diferentes tipos de antibióticos y cómo actúan, así como los mecanismos de resistencia a los antibióticos beta-lactámicos. Finalmente, explica el papel del laboratorio de microbiología en la identificación de patógenos

1. LA RESISTENCIA
ANTIMICROBIANA Y EL
PAPEL DEL LABORATORIO
DE MICROBIOLOGIA
Gustavo Gini

2. RESISTENCIA DE LOS
MICROORGANISMOS
 Diferentes mecanismos
de resistencia
 Uso indiscriminado de
los antibióticos
 Uso de antibióticos de
amplio espectro
 Tratamientos inútiles
prolongados

3. SELECCIÓN DE UN
ANTIBIOTICO
 Propiedades farmacocinéticas del
antibiótico
 Toxicidad
 Enfermedad clínica
 Estado general del paciente
 Uso de combinación de antibióticos
solamente cuando:
 Ampliar empíricamente el tratamiento
polimicrobiano de una infección
 Prevenir la emergencia de organismos
resistentes durante la terapia
 Producir un efecto bactericida sinérgico

4. ANTIBIOTICOS
 Falla en su efectividad:
 Genéricos vrs. no
genéricos
 Dosis
 Tratamientos
incompletos
 No adecuados para la
cepa bacteriana
causante de la infección
 Falta de cultivos en
todas las infecciones

5. ANTIBIOTICOS
SU ACCION Y MECANISMOS DE
RESISTENCIA

6. LUGARES DE ACCION DE LOS
ANTIBIOTICOS

7. ANTIBIOTICOS Y SITIOS
DE ACCION

8. ACCION DE LOS
ANTIBIOTICOS
 Inhibición de la  Alteración de la
síntesis de la pared membrana celular:
celular:  Polimixinas
 Penicilinas
 Cefalosporinas
 Carbapenems
 Monobactámicos
 Vancomicina

9. ACCION DE
ANTIBIOTICOS
 Inhibición de la
síntesis de proteínas
 Aminoglucósidos
 Tetraciclinas  Inhibición de la
 Cloranfenicol síntesis de ácidos
 Macrólidos nucleicos
 Rifampicina
 Clindamicina
 Quinolonas
 Metronidazol

10. INHIBICION SINTESIS DE
PROTEINAS

11. Antibióticos que actúan afectando la pared y membrana celular
LOS BETA LACTÁMICOS

12. COMPOSICION
 Aquellos con estructura básica:
 Penicilinas
 Cefalosporinas
 Carbapenems
 Monobactámicos

13. CEFALOSPORINAS
De 1ª generación o Espectro de acción
espectro estrecho
Cefalexina Exclusivo para
Cefalotina Escherichia coli. Klebiella
Cefazolina spp., Proteus mirabilis y
Cefapirina bacterias Gram positivo
Cefradina equivalente a la acción
de oxacilina

14. CEFALOSPORINAS
De 2ª generación o Espectro de acción
espectro expandido
Cefaclor Bacterias Gram positivo
Cefuroxime equivalente a la acción
Cefamandole de oxacilina; actividad
Cefoxitina mejorada para Gram
negativo como
Enterobacter, Citrobacter
y otras especies de
Proteus

15. CEFALOSPORINAS
De 3ª generación o Espectro de acción
amplio espectro
Cefixima Bacterias Gram positivo
Cefotaxima equivalente a la acción
Ceftriaxona de oxacilina; actividad
Ceftazidima mejorada para bacterias
Cefpodoxima Gram negativo y
actividad que incluye
Pseudomonas

16. CEFALOSPORINAS
De 4ª generación o Espectro de acción
espectro extendido
Cefepime Bacterias Gram positivo
Cefpiroma equivalente a la acción
de oxacilina; con
actividad notablemente
mejorada para bacterias
Gram negativo

17. RESISTENCIA DE LOS
ANTIBIOTICOS BETA
LACTAMICOS
1. Prevención de la interacción entre el
antibiótico con la PBP (Penicillin
Binding Protein) blanco
2. Modificación de la unión del
antibiótico con la PBP
3. Hidrólisis del antibiótico por Beta
lactamasas

18. MECANISMOS EN LA
PARED CELULAR
 Muchos antibióticos
actúan inhibiendo la
síntesis normal del
peptidoglican
provocando su
estallido o lisis
osmótica

19. MECANISMOS EN LA
MEMBRANA CELULAR
 Alteraciones de la
membrana
 Cambio en la porinas
 Prevención de la
interacción del
antibiótico con el
blanco
 Modificación de la PBP
´s (Penicillin Binding
Proteins)

20. LAS BETA LACTAMASAS
Acción y tipos

21. BETALACTAMASAS
 Enzimas que
hidrolizan
irreversiblemente el
enlace amida del
núcleo betalactámico
de los antibióticos
betalactámicos,
transformándolos en
compuestos inactivos,
incapaces de ejercer
su acción antibiótica.

22. CLASIFICACION DE
BETALACTAMASAS

23. PAPEL DEL LABORATORIO
MICROBIOLOGICO

24. METODOS
IDENTIFICACION DEL
MICROORGANISMO
CAUSAL

25. CONSIDERACIONES
GENERALES
 Lugar en donde está causando la
infección
 Tejidos
 Orina
 Etc.
 Tipo de paciente
 Hospitalario (Cepas nosocomiales)
 Consulta externa (Cepas salvajes)
 Comunitarias
 Azar

26. MICROSCOPIA INICIAL

27. METODOS DE
IDENTIFICACION
MICROBIOLOGICA
 Con tubos
 Con sistemas
miniaturizados
 Con sistemas
automatizados

28. Con tubos

29. Sistemas miniaturizados

30. Sistemas automatizados

31. SUSCEPTIBILIDAD
ANTIMICROBIANA
METODOS Y RESISTENCIA
BACTERIANA

32. CEPAS IMPORTANTES DE
RESISTENCIA ANTIMICROBIANA
 Staphylococcus aureus
 Meticilina resistente
 Vancomicina resistente
 Streptococcus pneumoniae emergente resistente
a la penicilina
 Klebsiella pneumoniae y Acinetobacter spp.
hospitalaria multiresistente
 Salmonella typhimurium multiresistente
 Pseudomonas spp
 Enterococcus
 Vancomicina resistente
 Mycobacterium tuberculosis
 Multiresistente en pacientes con HIV

33. METODOS PARA LA
DETERMINACION DE LA
RESISTENCIA
 Bauer-Kirby
 Semiautomatizados
 Automatizados
 PCR
 Hibridización con
sondas
 Punto isoeléctrico
 Secuenciación de
ADN

34. TIPOS DE RESISTENCIA
METODO DE BAUER & KIRBY

35. DISCOS SUGERIDOS
AMC
AMC-amp/ ac. clavulánico
CTX-cefotaxima CAZ CTX
CAZ-ceftazidima
FOX-cefoxitina IPM
AMP-ampicilina AMP
FOX
F/M 300-nitrofurantoína
IPM-imipenem FM300
SXT

36. TIPOS DE RESISTENCIA
 Detección de
cepas beta
lactamasa de
espectro extendido
(BLEE)
 Cepas AmpC
 Cepas meticilino
resistentes
 Cepas
vancomicina
resistentes

37. BETA LACTAMASAS DE
ESPECTRO EXTENDIDO
(BLEE)
 Resistencia o sensibilidad intermedia
a CTX o CAZ con la deformación del
halo de inhibición de cualquiera de
las cefalosporinas de 3ª generación
en las cercanías de AMC se
considera prueba confirmatoria de
BLEE por recomendación Regional
OPS.

38. SINERGISMO BLEE
AMPC CTX

39. TECNICA DE DETECCION
DE BLEE
 Test microbiológico de sinergia en doble
disco.
 Empleado para la detección de enzimas de
espectro extendido. Basado en la propiedad
del ácido clavulánico de inhibir estas
enzimas.

41. INFORME CUANDO EXISTE
BLEE
 Informar resistente a:
todas las penicilinas,
C1G, C2G, C3G, C4G y
el AMC
independientemente de
su eventual sensibilidad
in vitro.
 Cefoxitin (FOX)
susceptible

42. BETA LACTAMASA AmpC
 La Beta lactamasa tipo AmpC es aislada en
bacterias gram negativo resistentes a antibióticos
con espectro extendido.
 Son conocidas como AmpC β-lactamasas (Clase
C o grupo 1); están codificadas en el cromosoma
de muchas bacterias gram negativo como
Citrobacter, Serratia y Enterobacter spp.
 Las AmpC β-lactamasas, en contraste con las
BLEE hidrolizan a las cefalosporinas de 3a y 4a
generación (cefamicinas y oxyimino-β-lactámicos),
pero no es inhibida por el ácido clavulánico

43. AMPCES
 Cuando se expone a Beta
lactámicos hay disrupción de
la pared celular Tener en cuenta la
 Esto bloquea el gen AmpR, sigla AMPCES
así se pierde su efecto  A cinetobacter
represor sobre AmpC
 M organella
 Esto genera
sobreproducción de ß  P roteus/Providencia
lactamasas AmpC
 C itrobacter
 Convirtiendo gérmenes
inicialmente sensibles en  E nterobacter
mutantes resistentes  S erratia
 Esto ocurre con los
siguientes microorganismos:

44. DETECCION DE AmpC
 Discos de Aztreonam
(ATM) y
piperacillina/tazobacta
m (TZP). Disco de
cefoxitina (FOX) en el
(centro) fue puesto
estratégicamente para
que los margenes de
aztreonam y
piperacillina/tazobacta
m se esperan estar en
caso no ocurra
inducción.

45. DETECCION DE AmpC

47. CORRELACION CON GENEROS Y ESPECIES DE BACTERIAS
RESISTENCIA
BACTERIANA

48. RESISTENCIA NATURAL E
INUSUAL EN
ENTEROBACTERIAS
Germen Resistencia Resistencia
natural inusual
E. coli - COL,IMP/MER
Shigella spp. y Salmonella spp. - COL, IMP/MER,
CIP,CTX (Shigella )
Klebsiella spp AMP, TIC COL, IMP/MER
P. mirabilis COL, NIT, TET IMP/MER
P. vulgaris y P. penneri COL, NIT, TET, AMP, IMP/MER
CTN, CXM
C. Koseri AMP,TIC IMP/MER, COL
Entrobacter spp. Y C. freundii AMP,AMC,CTN,FOX COL,IMP/MER
M. Morganii y Providencia spp. COL,NIT,AMP,CTN IMP/MER
Serratia spp. AMP,AMC,AMS,CTN, IMP/MER
CXM,TET,COL,NIT

49. Siempre debe existir una perfecta correlación entre la
identificación de una determinada cepa y, como mínimo, el patrón
de sensibilidad natural (Tabla 2).
Así, a modo de ejemplo:
Enterobacter, C. freundii y Serratia siempre
se observará una betalactamasa cromosómica inducible
K. pneumoniae, K. oxytoca, C. koseri, P. penneri y
P. vulgaris siempre deben ser resistentes a ampicilina;
Providencia, Proteus y Morganella presentarían una resistencia
natural a colistina y nitrofurantoína.
Serratia debe ser resistente a colistina
P. mirabilis a tetraciclinas.
Cualquier microorganismo que no muestre una resistencia
esperada debe replantearse la identificación de la cepa o el estudio
de sensibilidad.

51. ANTIBIOGRAMAS TIPICOS
DE GRAM NEGATIVO

52. PROBLEMAS DE
ANTIBIOGRAMAS POR
ERRORES TECNICOS

53. RESISTENCIA A METICILINA
RESISTENCIA
BACTERIANA

54. DETECCION DE
METICILINA RESISTENTES
 Importante sobre todo para
cepas de Staphylococcus
aureus en hospitales
 Se adquiere por adquisición
de nuevas PBP´s
 Se pueden utilizar discos
de oxacilina o meticilina
indiscriminadamente

55. INFORME DE METICILINA
RESISTENTES
 Informar resistencia a todos los antibióticos β-
lactámicos aunque hayan presentado halos de
sensibilidad en el antibiograma o no se hayan
ensayado.

56. RESISTENCIA A VANCOMICINA
RESISTENCIA
BACTERIANA

57. RESISTENCIA A LA
VANCOMICINA
 La vancomicina se utiliza en infecciones por
estafilocococos oxacilina resistentes y otras
bacterias gram positivo resistentes a los Beta
lactámicos
 Es inactiva frente a los gram negativo por ser la
molécula muy grande y no pasar a través de la
pared celular
 Otros organismos son intrínsecamente resistentes
como Leuconostoc, Pediococcus, Lactobacillus,
Erysipelotrix y especies de Enterococos
 E. faecium y feacalis pueden adquirir resistencia
por plásmidos transmisores de genes vanA y vanB

58. RESISTENCIA A LA
VANCOMICINA
Método de difusión con
discos Método cromogénico

59. CONCLUSIONES Y
RECOMENDACIONES

60. VIGILANCIA
 A través de un
programa serio de
vigilancia
 Por medio de
publicaciones
mensuales y
anuales de la
resistencia
microbiana

61. ESTUDIOS
 Faltan estudios serios
de las infecciones
hospitalarias
 Mejorar las
estadísticas
 Hacer trabajos
conjuntos
epidemiológicos
 Mantener estadísticas
confiables

62. ASPECTOS QUE NO
DEBEN OLVIDARSE
 Trabajar en equipo
 Hacer una buena
microbiología
 Tener toda la
información de los
pacientes
 Hacer siempre el
aislamiento del agente
etiológico de la
infección

63. LOS ANTIBIOGRAMAS
 Los antibiogramas
deben interpretarse
correctamente
 Hacer una
suspensión 0.5 de
MacFarland
 Medir los halos
 Observar si existe
resistencia tipo BLEE,
ampC, Vanco,
Meticilina

64. CORRELACION
 Correlacionar resultados con las
especies bacterianas aisladas
 Como K. pneumoniae, K. oxytoca,
C. koseri, P. penneri y P. vulgaris
siempre deben ser resistentes a
ampicilina
 Providencia, Proteus y Morganella
resistentes a colistina y
nitrofurantoína
 Serratia siempre resistente a
colistina y P. mirabilis a tetraciclinas.

65. CONCLUSIONES
 Búsqueda de cepas BLEE
 Utilizando discos de AMC, CAZ y
CTX
 Observar efecto sinérgico
 Búsqueda de cepas ampC
 Utilizando discos de FOX, AMC y
CAZ
 Observar ensanchamiento de halos
Reportar resistentes los
antibióticos beta lactamicos
que puedan ser inhibidos por
estas resistencias