Este documento describe un procedimiento de laboratorio para determinar la concentración mínima inhibitoria (MIC) de diferentes antibióticos contra Salmonella typhimurium. Se colocan muestras de antibióticos en cajas Petri con agar inoculado con la bacteria, y también en tubos Eppendorf con varias concentraciones de antibiótico. Los resultados muestran que la gentamicina, tetraciclina y cloranfenicol inhiben el crecimiento bacteriano, mientras que la penicilina no es efectiva. La determinación de la MIC proporciona información sobre la

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CIENCIAS DEL MAR
FICHA DE LA PRÁCTICA PARA LABORATORIO
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CÓDIGO
MATERIA
Microbiología FMAR03749
NOMBRE David Quiñonez
PARALELO
1
TEMA DE LA PRÁCTICA
Concentración mínima inhibitoria (MIC)
OBJETIVOS GENERALES:
-Analizar el comportamiento de ciertos antibióticos ante el crecimiento de bacterias específicas (Salmonella
typhimurium).
-Realizar un control de la bacteria patógena.
INTRODUCCIÓN:
MIC
La determinación de la Concentración Mínima Inhibidora (CMI) es la medida de la sensibilidad de una
bacteria a un antibiótico. Es la mínima cantidad de antimicrobiano que es capaz de impedir el crecimiento de
un microorganismo en unas condiciones normalizadas. Es el método habitual utilizado en los laboratorios de
Microbiología Clínica. Para llevarlo a cabo es necesario utilizar cepas control (de referencia) con el fin de que
los resultados sean reproducibles y comparables. Este método nos ofrece información sobre la sensibilidad
de las bacterias S (sensible), I (intermedia) y R (resistente). (Anduaga, 2008)
Sensible, si existe una buena probabilidad de éxito terapéutico en el caso de un tratamiento a la dosis
habitual.
Resistente, si la probabilidad de éxito terapéutico es nula o muy reducida. No es de esperar ningún efecto
terapéutico sea cual fuere el tipo de tratamiento.
Intermedia, cuando el éxito terapéutico es imprevisible. Se puede conseguir efecto terapéutico en ciertas
condiciones (fuertes concentraciones locales o aumento de la posología).
ANTIBIÓTICOS
Los antibióticos son un amplio grupo de sustancias químicas producidas por varias especies de
microorganismos (bacterias, hongos y actinomicetos), que suprimen el crecimiento de otros
microorganismos, y originan su destrucción. En los últimos tiempos, el uso del término se ha ampliado para

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incluir compuestos sintéticos como las sulfonamidas y las quinolonas, que presentan también actividad
antimicrobiana.
Los antibióticos tienen indicaciones precisas en dermatología: Infecciones primarias de la piel y tejidos
blandos, enfermedades de transmisión sexual y dermatosis sobre-infectadas. La mayoría de estas
infecciones cutáneas siguen respondiendo bien a los antibióticos clásicos; sin embargo es necesario conocer
y emplear los nuevos antibióticos por el incremento de las infecciones por bacterias gram-positivas, aumento
de las resistencias bacterianas, cambios en la patogenicidad de algunos microorganismos, comodidad de la
posología, mejor tolerancia y menos efectos secundarios. (Saldaña, 2006)
EQUIPOS Y MATERIALES:
-Tubos Eppendorf.
-Cajas Petri.
-Muestra de Salmonella Spp.
-Micro pipeta.
-Agua destilada.
-Mecheros.
-Agar Lb Broth.
-Asa.
-Cerillos.
-Tubos de ensayo.
PROCEDIMIENTO:
-Colocar en un tubo de ensayo 4 ml de agua destilada.
-Con el asa, realizar un raspado de la caja Petri, hacer esto para poder obtener muestras de la bacteria
cultivada Salmonella spp.
-Colocar la bacteria en el tubo de ensayo con agua destilada y homogenizar la suspensión.
-En una caja Petri con agar Lb Broth colocar 1000 uL de la suspensión bacteriana.
-Realizar una siembra por superficie.
-Realizar barrido con un cerillo.
-Con una punta de micro pipeta realizar 5 hoyos en la siembra.
-Con el asa previamente calentada, retirar el agar que se encontraba en los 5 hoyos previamente hechos.
-Utilizar los antibióticos: cloranfenicol, criprofloxacina, gentamicina, tetraciclina y penicilina, colocar 0.1 gr de
cada antibiótico en una cierta cantidad de agua destilada.
-Por cada disolución de antibiótico, colocar 10 uL en su orden previamente establecido en los 5 huecos
hechos en la caja Petri.
-Realizar el procedimiento en 4 cajas Petri.
-En 4 tubos Eppendorf colocar 1000 uL, 800 uL, 600 uL y 200 uL de antibiótico respectivamente.
-La concentración que se debe colocar para cada tubo es de 10000, 8000, 6000, 2000 ppm.
-Usar criprofloxacina como antibiótico.
-Colocar agar Lb como corresponda hasta completar 1 mL por cada tubo de Eppendorf.
-Colocar 40 uL de la bacteria en cada tubo de Eppendorf.
-Realizar controles, sean estos positivos y negativos.

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RESULTADOS: (Puede incluir información, características)
𝐶1 = Concentración madre
𝐶2 = Concentración a echar
𝑉1 = Antibiótico a echar
𝑉2 = Capacidad del tubo.
𝐶1 𝑉1 = 𝐶2 𝑉2
𝑉1 =
𝐶2 𝑉2
𝐶1
𝑉1 =
8000 𝑥 1000
10000
= 1000 uL
𝑉1 =
8000 𝑥 1000
10000
= 800 uL
𝑉1 =
8000 𝑥 1000
10000
= 600 uL
𝑉1 =
8000 𝑥 1000
10000
=200 uL
Antibiótico Caja 1 Caja 2 Caja 3 Caja 4
Gentamicina positivo positivo positivo positivo
Tetraciclina positivo positivo positivo positivo
Cloranfenicol positivo positivo positivo positivo
Criprofloxacina positivo positivo positivo positivo
Penicilina negativo negativo negativo negativo
Observaciones:
-No sobrepasar el volumen de los tubos eppendorf.
-Soloconla ciproflaxacinano se encontróningunacargabacterianaenlas cajas,mientrasque en las demás
se encontró pero en una pequeña proporción, a excepción del que contuvo penicilina que no actuó.
Conclusión:
-Losantibióticossonaquellos suprimenel crecimientode otrosmicroorganismos,yoriginansudestrucción.
-La determinación de la Concentración Mínima Inhibidora (CMI) es la medida de la sensibilidad de una
bacteria a un antibiótico.
Bibliografía
Anduaga, E. S. (2008). Microbiología General y Bucal. Lima.
Saldaña, L. S. (2006). ANTIBIÓTICOS SISTÉMICOS EN DERMATOLOGÍA. Sao Paulo.

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Anexos:
Fig1.- Cajas Petri marcadas con los diferentes antibióticos.
Fig2.- Radios de acción que tuvo cada antibiótico.