El documento describe varios experimentos realizados para identificar carbohidratos. Se explica que los carbohidratos incluyen azúcares, almidones y celulosas. Se clasifican los carbohidratos en monosacáridos, disacáridos, trisacáridos y polisacáridos. Se detallan pruebas como la de bencidina, anilina y reactivos de Tollens, Fehling y Benedict para identificar diferentes tipos de carbohidratos.

1. Materia:
BIOQUIMICA
Maestro:
MARTHA GABRIELA ACEVES MORALES
Trabajo:
REPORTE DE PRÁCTICA
Equipo 6
Aldo Rodrigo Pescador Aguilar
Carlos Samuel Becerra Franco
Darío Abel Baruch Martínez
Elizabeth Flores Gómez
Jorge Miguel Martínez Gonzales
Enrique Ramírez Rivera
Grupo:
6 D
Especialidad:
Laboratorio Clínico
5/4/2017

2. CETIS 62
PRACTICA No. 3
IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS
OBJETIVO: Realizar diferentes experimentos, donde se identifiquen, las
características de los carbohidratos.
Los carbohidratos comprenden los azucares, los almidones, las celulosas y
las sustancias inmediatamente relacionadas con ellos. Es difícil formular una
definición del termino “carbohidrato” que incluya todos los miembros de esta
familia de compuestos pero a partir de formulas estructurales. Deberá notarse que
un carbohidrato es un polioxiadehido una polioxicetona o una sustancia que
produce por hidrólisis cualquiera o ambas de estos tipos de compuestos. Ejemplo:
la glucosa y la arabinosa son polioxialdehídos, mientras que la fructuosa es una
polioxicetona.
NOMENCLATURA Y CLASIFICACION DE CARBOHIDRATOS
Los nombres de los carbohidratos se caracterizan por la terminación “osa”.
Los principales grupos de carbohidratos se designan como monosacáridos. Los
monosacáridos comprenden todos los carbohidratos sencillos que no se pueden
hidrolizarse en sustancias de menor estructura molecular. Los disacáridos incluyen
aquellos carbohidratos que pueden hidrolizarse en dos azucares simples. De la
misma manera, un trisacárido proporciona por hidrólisis tres moléculas de
monosacáridos y una molécula de polisacárido origina muchas moléculas de

3. monosacáridos. Todos los carbohidratos con excepción de los polisacáridos, se
disuelven en agua, poseen un sabor más o menos dulce y son llamados azúcares.
El metabolismo de los carbohidratos en el cuerpo animal es esencialmente
el de la glucosa y sustancias a fines de la misma en sus procesos metabólicos.
El azúcar característica de la sangre y líquidos titulares es la glucosa. L a
digestión de los alimentos ricos en carbohidratos, como almidón, sacarosa y
lactosa, produce los monosacáridos: glucosa, fructuosa y galactosa, que pasan al
torrente circulatorio. La galactosa y fructuosa son transformados en el hígado.
Hay pruebas en el sentido de que la mucosa del intestino pueda
desempeñar cierto papel en la conversión de glucosa a fructuosa a medida que la
primera es absorbida.
La glucosa de la sangre circulante y líquidos corporales llega a todas las
células de la economía y es utilizada para producir energía. En condiciones
normales y metabolismo de los carbohidratos suministra más de la mitad de los
requerimientos energéticos del organismo. De hecho, el cerebro depende en gran
medida del metabolismo de los carbohidratos como fuente de energía, y cesa de
funcionar rápidamente cuando disminuya muy por debajo de lo normal la
concentración de la glucosa sanguínea.
El glucógeno del hígado, músculos y otros tejidos se forman primariamente
a partir de la glucosa y actúa como fuente de energía inmediatamente disponible o
como reserva de la misma. Normalmente una buena parte de la reserva de la
grasa de los depósitos corporales se forman a partir de la glucosa; a modo
análogo partiendo de este monosacárido la glándula mamaria sintetiza lactosa y
también se forman de la glucosa los glucolípidos y mueopolisacáridos titulares.
El metabolismo de muchos aminoácidos de las proteínas progresivas por
vía de la glucosa, y algunos productores de la misma son utilizados por la
economía, por la síntesis de los aminoácidos.
Es por lo tanto evidente que la glucosa ocupe la posición el metabolismos
de los Carbohidratos, y también que este ultimo esta íntimamente relacionada con
el de lípidos y proteínas.
La concentración del azúcar de la sangre en el hombre durante el periodo
de post-absorción es de 12 a 14 horas después de la comida.
Varia normalmente de 60 a 90 mg % y puede alcanzar 130 mg % o más
después de comidas ricas en carbohidratos. Los valores para otros animales de
sangre caliente suelen ser del mismo orden.

4. Somogyi y Klinghoffer han demostrado que la glucosa en la sangre del
hombre se encuentra uniformemente distribuida en el agua de eritrocitos y plasma.
Como los primeros contiene mucho menos agua que el plasma, la concentración
de volumen por unidad de volumen en la células es inferior a la del plasma.
Solo en los antropoides se observan concentraciones iguales en el agua del
plasma y los eritrocitos. Los glóbulos rojos del cerdo y la rata carecen
prácticamente de glucosa.
EL HÍGADO EN LA REGULACIÓN DEL AZÚCAR SANGUÍNEO
En el hígado el órgano primeramente encargado del la regulación de las
concentraciones del azúcar sanguíneo por ser el único capaz de formar glucosa a
partir de fuentes ajenas a los carbohidratos, como ejemplo los aminoácidos, en
cantidades suficientes para cubrir las necesidades corporales.
LOS RIÑONES COMO FUENTES DE GLUCOSA SANGUÍNEA
Aunque el hígado desempeña el papel importante en la regulación de la
glucosa sanguínea, disponemos de un buen caudal de pruebas en el sentido de
que los riñones pueden formar glucosa sanguínea a partir de cierto número de
carbohidratos intermedios y también de aminoácidos. Rusell y Wilhelmi pudieron
demostrar que rebanadas de riñón forman carbohidratos a expensas del piruvato,
succinato, alfa cetoglutarato y de los aminoácidos: ácido glutámico y alanina. Si
bien todos los datos indican que los riñones poseen sin duda cierta capacidad de
glucogénesis y también para conservar la glucosa sanguínea, es también cierto
que dicha capacidad es muy inferior a la del hígado.

5. REACCIÓN DE LA BENCIDINA
La bencidina es una sustancia que cristaliza con una molécula de agua si
se hace la cristalización por debajo de 60° C, y anhidrasis porque el sulfato de
bencidina es insoluble. Se emplea también para investigar la adición de agua
oxigenada a la leche y para identificar la sangre en líquidos biológicos, empleada
también en la preparación de colorantes, para perfumar jabones baratos y en las
cremas para el calzado. Su constante criocóspica (6.9; agua 1.8) lo hace útil, junto
con su poder disolvente, en criometría
BENCIDINA (primaria)
Prueba específica para pentosas. Una pentosa está formada por 5 átomos
de carbono, por lo tanto cuando se habla de una aldopentosa se hace referencia a
un monosacárido que contiene 5 átomos de carbono y puede contener también el
grupo cetosa, por el cual toma el nombre de cetohexosa.
MATERIAL REACTIVOS
5 tubos de ensayo
Reactivo de bencidina
1 gradilla
Carbohidratos al 1%
6 pipetas de1 ml
1 baño maría

6. TÉCNICA
1. En un tubo de ensayo colocar 0.5ml del reactivo de bencidina.
2. Añadir 1 ó 2 gotas de solución de carbohidrato
3. Calentar en agua hirviendo durante varios minutos, inmediatamente
después enfriar con agua.
4. Si se forma un color rosa o rojo la prueba es positiva.

7. Esta prueba parece muy satisfactoria para pentosas, las hexosas comunes no
interfieren en esta prueba.
Resultados Bencidina
Carbohidratos RESULTADO
1 Xilosa Negativo
2 Galactosa Negativo
3 Dextrosa Negativo
4 Manosa Negativo
5 Maltosa Negativo
6 Arabinosa Negativo
7 Miel Negativo
8 Ribosa Negativo
9 Fructosa Negativo
PRUEBA DE ANILINA
Esta prueba sirve para diferenciar las pentosas de los ácidos urónicos y de
las hexosas que no dan la prueba.

8. Por deshidratación de las pentosas, se forman furfural, que reaccionan
primero con una molécula de anilina dando un compuesto que es una base de
Schiff, de poco color
Con otra molécula de anilina, se parte del ciclo del furano dando un
compuesto que por tener doble enlace conjugador, tiene un color rojo intenso.
Dando también la prueba positiva los polisacáridos que por hidrólisis dan
pentosas.
MATERIAL REACTIVOS
5 tubos de ensayo
Ácido acético glacial
1 gradilla
Anilina

9. 3 pipetas de 5ml
Carbohidratos al 1%
1 baño maría
TÉCNICA
1. Colocar 1 ml de carbohidrato.
2. Añadir 2 ml de ácido acético glacial y 3 gotas de anilina.
3. Calentar a hervir durante 1 minuto la coloración roja es positiva
Esta prueba la dan positiva las pentosas, puede servir para diferenciar las
pentosas de ácidos urónicos.

10. Resultados Anilina
Carbohidratos RESULTADO
1 Xilosa Negativo
2 Galactosa Negativo
3 Dextrosa Negativo
4 Manosa Negativo
5 Maltosa Negativo
6 Arabinosa Negativo
7 Miel Negativo
8 Ribosa Negativo
9 Fructosa Negativo
AZÚCARES REDUCTORES
(Tollens, Fehling, Benedict)
OXIDACIÓN
Aunque la oxidación de los aldehidos, y en algunos casos las cetonas
pueden emplearse como un método de preparación de ácidos carboxílicos, las
reacciones que se describen son principalmente como pruebas cualitativas que
permiten diferenciar los aldehídos y determinar acetonas de otras clases de
compuestos orgánicos.
La oxidación de los aldehídos a ácidos carboxílicos se efectúa muy
fácilmente en una solución alcalina. Estos reactivos alcalinos son agentes
oxidantes moderados, oxidan los aldehídos al mismo tiempo que ellos se reducen.
El reactivo Tollens se prepara por la adición de hidróxido de amonio en una
solución de nitrato de plata hasta que el precipitado de óxido de plata formado
inicialmente se disuelve nuevamente es conveniente considerar a este reactivo
como óxido de palta en lugar de

11. Ag + 2OH -H2O Ag2O +4NH3 2Ag (NH3)2OH
Una solución que contiene el ión plata amonicéo, y a menudo así es
considerado en sus reacciones como aldehído.
H O
CH3-C-C=O + Ag2O CH3-C-OH + 2Ag
La reacción conocida, la “prueba del espejo de plata” (Tollens), comprende
en realidad al aldehído, una pequeña concentración de ión plata y los iones
oxidrilo.
La solución de Fehling consiste en dos partes:
a) Una solución de sulfato cúprico.
b) Una solución de hidroxilo de sodio y tartrato de sodio y potasio (sal de
Rochelli).
Cuando se mezclan cantidades iguales de estas soluciones, se forma un
complejo soluble de tartrato cúprico de color azul obscuro, el cual proporciona una
pequeña concentración de iones cúprico. Los aldehídos reducen la solución de
Fehling y forman un precipitado rojo de óxido cuproso.
OH OH
CH3-C=O + 2Cu + 5OH CH3-C=O + Cu2 + 3H2O
La solución de Benedict es semejante a la de Fehling con la modificación
de que se utiliza citrato de sodio en lugar del tartrato de sodio y potasio. Tiene
como ventaja sobre la solución de Fehling de que no es necesario dividirla en dos
reactivos separados.
Las 3 soluciones mencionadas nos sirven para distinguir los aldehídos de
las acetonas sencillas, porque las últimas no reaccionan. Pueden además
indicarse que la reducción de las soluciones permite diferenciar un aldehído de un
alcohol. Aunque los alcoholes pueden oxidarse por agentes oxidantes fuertes no
son atacados por estos reactivos moderados.
El benzaldehído puede oxidarse hasta ácido benzoico con el reactivo de
Tollens, pero no es atacado por las soluciones de Fehling o de Benedict.

12. Los aldehídos reducen con dificultad las soluciones neutras o ácidas de las
sales de plata o de cobre. Solo en soluciones alcalinas se observa la fuerte acción
reductora de los aldehídos, aunque no se conoce con certeza el papel que en ella
juega el ión oxidrilo.
PRUEBA DE TOLLENS
MATERIAL REACTIVOS
Tubos de ensayo Reactivo de Tollens
Pipeta de 1 ml Carbohidratos en polvo
Mechero
Baño María

13. TÉCNICA
1. Colocar en un tubo de ensayo 1 ml de carbohidrato
2. Añadir 1 ml de reactivo de Tollens.
3. Agitar perfectamente.
4. Calentar a baño maría durante 5 minutos máximo. Observar la forma de
espejo que se forma en los positivos.
Resultados:
Prueba de Tollens
Carbohidratos RESULTADO
1 Xilosa Positivo
2 Galactosa Positivo
3 Dextrosa Positivo
4 Manosa Positivo

14. 5 Maltosa Positivo
6 Arabinosa Positivo
7 Miel Positivo
8 Ribosa Positivo
9 Fructosa Positivo
Observaciones:
En todos los carbohidratos se formó un espejo de plata por lo cual se han
reportado como positivas El ensayo con el reactivo de Tollens es una reacción de
oxidación, en la cual se identifica a las aldosas, ya que las cetosas no reaccionan.
En la reacción el reactivo de Tollens se oxida totalmente, y genera el espejo de
plata, ya que el ion de plata se reduce a plata elemental.
PRUEBA DE FEHLING
MATERIAL REACTIVOS
Tubos de ensayo Fehling “A” y Fehling “B”
Pipetas de 1 ml
Carbohidratos al 1%
1 mechero

15. TÉCNICA
1. Colocar en un tubo de ensayo 1 ml de carbohidratos.
2. Añadir 1 ml de Fehling “A” y 1 ml de Fehling “B”.
3. Mezclar bien y ponerlo a baño maría o en la flama del mechero durante
cierto tiempo.
4. Sí mira a marrón o rojo la prueba es positiva.
Esta prueba es una reacción de oxido-reducción, los alcoholes del azúcar se
oxidan a aldehídos y ácidos, el cobre se reduce de cúprico a cuproso por eso
cambia de color la solución y se forma el precipitado.
Prueba de Fehling
Carbohidratos RESULTADO

16. 1 Xilosa Positivo
2 Galactosa Positivo
3 Dextrosa Positivo
4az< Manosa Positivo
5 Maltosa Positivo
6 Arabinosa Positivo
7 Miel Positivo
8 Ribosa Positivo
9 Fructosa Positivo
Observaciones
El resultado de esta prueba fue positivo para todos los carbohidratos usados. En
presencia de agentes oxidantes, iones metálicos como el Cu +2, los
monosacáridos presentan varias reacciones de oxidación. Presentándose un
cambio de coloración a rojo ladrillo indicando la presencia de un azúcar reductor,
Para el ensayo con la sacarosa al ser esta la unión de los extremos nucleofilicos
de la glucosa y la fructosa no posee iones libres para formar la reacción de
reducción.
PRUEBA DE BENEDICT
MATERIAL REACTIVOS
5 tubos de ensayo Reactivo de Benedict
6 pipetas de 5 ml Carbohidratos de 1%

17. 1 gradilla
1 baño maría
TÉCNICA
1. Colocar en varios tubos de ensayo 1 ml de solución de Benedict
2. Añadir 3 gotas de cada solución de carbohidratos en cada tubo.

18. 3. Agitar y colocar los tubos al mismo tiempo en agua hirviendo durante 3
minutos.
4. Enfriar la solución y hacer comparaciones.
5. Obsérvese el precipitado formado. Un cambio de color NO indica reacción
positiva, solo el precipitado.
La prueba de benedict nos ayuda al reconocimiento de azúcares reductores, es
decir, aquellos compuestos que presentan su OH anomérico libre, como por
ejemplo la glucosa, lactosa o maltosa o celobiosa, en la reacción de Benedict, se
puede reducir el Cu2+ que presenta un color azul, en un medio alcalino, el ión
cúprico (otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse por efecto del
grupo aldehído del azúcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se observa
como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso (Cu2O), que
precipita de la solución alcalina con un color rojo-naranja, a este precipitado se lo
considera como la evidencia de que existe un azúcar reductor.
Resultados:
Azucares Resultado
Xilosa Positivo
Galactosa Negativo
Dextrosa Positivo
Manosa Negativo
Maltosa Negativo
Arabinosa Negativo
Miel Negativo
Ribosa Positivo
Fructosa Positivo

19. NOTA: Deberán darse los resultados comparativos de las 3 pruebas de
azúcares reductores.
PRUEBA DEL ÁCIDO PICRICO
2, 4,6 TRINITROFENOL
Se puede obtener, pero con mal rendimiento, por acción de la mezcla
sulfónica sobre fenol.
Se obtiene mejor la acción sucesiva de los ácidos sulfúricos y nítricos.
O por nitración de coloro benceno, hidrólisis de nitrito cloro benceno
obtenido a dinitrofenol, y después nitración de este por mezcla sulfonítrica.

20. El ácido pícrico es un sólido cristalizado, amarillo pálido (p.f. 122°C), un
poco soluble en agua, con sabor amargo (picros-amarillo)
Su descomposición explosiva, desencadena por un detonador (fulminante
de mercurio) lo hace útil como explosivo (melenita), si bien tiene el inconveniente
de corroer el alma del cañón por su carácter ácido, por lo que tiene más empleo
en bombas de aviación.
El ácido pícrico es un ácido relativamente fuerte que ataca los metales
dando picratos metálicos muy inestables y explosivos, lo que requiere proteger el
acero de abuses con un barniz o vidriados.
Los picratos de amonio C6H2(NO2)3(ONH4) y de potasio, son pocos solubles
en agua.
El picrato de amonio se utiliza como explosivo. El ácido pícrico se emplea
para teñir de amarillo la lana, como reactivo de alcaloides y proteínas
(investigación de albúminas en líquidos biológicos: reactivo de Esboch).
El ácido pícrico, como otros nitrofenoles, existe en dos formas: la normal
que da cristales cuando se cristaliza la ligroína.

21. Y la ací, que da soluciones amarillas en agua y cristales amarillos de esta
solución, especialmente si es alcalina.
Así el 2,4, dinitrofenol se utiliza como indicador del pH en la escala de
Michaelis, debido a la mayor intensidad de coloración amarilla que presenta una
solución según variaciones pH del medio, se utiliza también para adelgazar, pero
su empleo es muy delicado, debido a su toxicidad.
El grupo aldehído le da característica reductora a monosacáridos.
El grupo aldehído de las aldohexosas se oxida con facilidad el carboxílico
correspondiente. Esto sucede con un pH neutro o poco alcalino, empleando
agentes oxidantes o enzimas.
El ácido monocarboxílico que se produce se conoce con el nombre de
ácido aldónico (a partir de galactosa). En presencia de este agente oxidante se
oxidan tanto el grupo aldehídico como la función alcohólica primaria.
MATERIAL REACTIVOS
6 pipetas de 5 ml Ácido pícrico saturado
1 pipeta de 1 ml
Carbonato de sodios al 10%
1 gradilla
Carbohidratos al 1%

22. 1 baño maría
5 tubos de ensayo
TÉCNICA
1. A 3 ml de solución de carbohidratos añadir 1 ml de solución saturada de
ácido pícrico.
2. Agregar 0.5 ml de solución de carbonato de sodio al 10%.
3. Calentar en agua hirviendo durante 1.5 minutos.
Un color café denota prueba positiva.
RESULTADOS Y OBSERVACIONES

23. CUESTIONARIO
1. Escribe las fórmulas de los carbohidratos utilizados en la práctica.
Carbohidrato Formula
Xilosa
C5H10O5
Galactosa
C6H12O6
Carbohidratos Resultado
Xilosa Positivo
Galactosa Negativo
Dextrosa Negativo
Manosa Negativo
Maltosa Negativo
Arabinosa Positivo
Miel Positivo
Ribosa Positivo
Fructosa Positivo

24. Dextrosa
C6H12O6
Manosa
C6H12O6
Maltosa
C12H22O11
Arabinosa
C5H10O5
Miel
Ribosa
C5H10O5
Fructosa
C6H12O6

25. 2. ¿Qué es un azúcar reductor?
Los azúcares reductores son aquellos azúcares que poseen su grupo
carbonilo (grupo funcional) intacto, y que a través del mismo pueden
reaccionar como reductores con otras moléculas.
3. ¿Qué usos tiene el reactivo de Fehling?
El reactivo de Fehling, también conocido como Licor de Fehling, es una
disolución descubierta por el químico alemán Hermann von Fehling y
que se utiliza como reactivo para la determinación de azúcares
reductores.
Sirve para demostrar la presencia de glusosa, así como para detectar
derivados de ésta tales como la sacarosa o la fructosa. El licor de
Fehling consiste en dos soluciones acuosas:
-Sulfato de cobre cristalizado, 35 g y agua destilad hasta 1.000 mL.
-Sal de Seignette o Tartrato mixto de potasio y sodio 150 g, solución de
hidróxido de sodio al 40 %, 3 g y agua hasta 1.000 mL.
Ambas se guardan separadas hasta el momento de su uso, para evitar
la precipitación del hidróxido de cobre.
El ensayo con el licor de Fehling se fundamenta en el poder reductor del
grupo carbonilo de los aldehídos. Éste se oxida a ácido y reduce la sal
de cobre en medio alcalino a óxido de cobre, formando un precipitado
de color rojo.
4. Explica por el yodo da coloración azul marino, con el almidón.
La amilosa y la amilopectina son componentes del almidón pero la
amilosa es de estructura lineal, con enlaces α (1-4), que forma hélices
en donde se juntan las moléculas de yodo formando un color azul
oscuro; mientras que la amilopectina es de estructura ramificada, con
con enlaces α (1-4) (1-6), que forma hélices mucho más cortas y las
moléculas de yodo son incapaces de juntarse presentando un color
intermedio entre anaranjado o amarillo
5. ¿Qué importancia farmacológica, tiene el identificar los carbohidratos?

26. Los carbohidratos típicos son azucares, almidones y celulosa. Los
almidones y azucares sirven de combustible para la célula (proveedores
de energía), y la celulosa es un componente estructural de las plantas.
Por lo cual es demasiado importante su identificación ya que de esta
forma podríamos evaluar la distribución o contenido de estas
biomoleculas en diversos organismos o alimentos.
CONCLUSIONES
En las pruebas de Fehling, Tollens y Benedict los carbohidratos dieron un
resultado positivo en su mayoría y que tienen esa característica de reacción.
La prueba de la bencidina suele ser muy útil para la identificación de
pentosas pero en esta ocasión la mayoría de los carbohidratos no eran
pentosas.
Estas practicas son útiles para saber con que tipo de prueba y que reacción
tendrá con cada uno de las carbohidratos por si algun dia llegaramos a
ocupar algo de esto
Algunos de los resultados se pueden ver afectado debido a la falta de
precisión en la practica ya que pudieron existir algunos errores al momento
de realizarla.
Falto un poco de organización al momento de realizar la practica ya que
fuimos el ultimo equipo en terminar la misma
BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA.
http://farmaciaulat.blogspot.mx/p/identificacion-de-biomoleculas.html
https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica-i/prueba-del-almidon
http://www.academia.edu/6891511/PRACTICA_DE_LABORATORIO_No_1_carbohidratos