varias practicas

1. EQUIPO 7
LABORTORIOCLINICO
PRACTICA
IDENTIFICACION DE
LIPIDOS
BIOQUIMICA

2. CETIS 62
IDENTIFICACION DE LIPIDOS
OBJETIVO: Realizar pruebas de identificación de lípidos y grasas. Así como
algunas de las principales reacciones de las grasas.
FUNDAMENTO: Se llama lípidos a un conjunto de moléculas orgánicas, la mayoría
biomoléculas, compuestas principalmente por carbono e hidrógeno y en menor
medida oxígeno, aunque también pueden contener fósforo, azufre y nitrógeno.
Tienen como característica principal ser insolubles en agua y sí en disolventes
orgánicos como el benceno. A los lípidos se les llama incorrectamente grasas,
cuando las grasas son sólo un tipo de lípidos, aunque el más conocido.
Los lípidos forman un grupo de sustancias de
estructura química muy heterogénea, siendo
la clasificación más aceptada la siguiente:
 Lípidos saponificables: Los lípidos
saponificables son los lípidos que
contienen ácidos grasos en su
molécula y producen reacciones
químicas de saponificación. A su vez
los lípidos saponificables se dividen
en:
 Lípidos simples: Son aquellos
lípidos que sólo contienen carbono, hidrógeno y oxígeno. Estos
lípidos simples se subdividen a su vez en: Acilglicéridos o grasas
(cuando los acilglicéridos son sólidos se les llama grasas y cuando
son líquidos a temperatura ambiente se llaman aceites) y Céridos o
ceras.
 Lípidos complejos: Son los lípidos que además de contener en su
molécula carbono, hidrógeno y oxígeno, también contienen otros
elementos como nitrógeno, fósforo, azufre u otra biomolécula como
un glúcido. A los lípidos complejos también se les llama lípidos de
membrana pues son las principales moléculas que forman las
membranas celulares: Fosfolípidos y Glicolípidos.
 Lípidos insaponificables: Son los lípidos que no poseen ácidos grasos en su
estructura y no producen reacciones de saponificación. Entre los lípidos
insaponificables encontramos a: Terpenos, Esteroides y Prostaglandinas.
¿Qué función desempeñan los lípidos en el organismo?
Principalmente las tres siguientes:
 Función de reserva energética: Los lípidos son la principal fuente de energía
de los animales ya que un gramo de grasa produce 9,4 kilocalorías en las
reacciones metabólicas de oxidación, mientras que las proteínas y los
glúcidos sólo producen 4,1 kilocalorías por gramo.
 Función estructural: Los lípidos forman las bicapas lipídicas de las
membranas celulares. Además, recubren y proporcionan consistencia a los

3. órganos y protegen mecánicamente estructuras o son aislantes térmicos
como el tejido adiposo.
 Función catalizadora, hormonal o de mensajeros químicos: Los lípidos
facilitan determinadas reacciones químicas y los esteroides cumplen
funciones hormonales.
¿Qué tipos de grasas intervienen en la alimentación?
Recordemos, las grasas son lípidos saponificables simples, sólidos a temperatura
ambiente o líquidos en cuyo caso se llaman aceites. Puede ser:
 Grasas saturadas: Son aquellas grasas que están formadas por ácidos
grasos saturados (tienen todos los enlaces completos por H). Aparecen por
ejemplo en el tocino, en el sebo, etcétera. Este tipo de grasas es sólido a
temperatura ambiente. Son las grasas más perjudiciales para el organismo.
 Grasas insaturadas: Son grasas formadas por ácidos grasos insaturados
(tienen uno o más enlaces sin completar con H) como el oleico o el
palmítico. Son líquidas a temperatura ambiente y comúnmente se les
conoce como aceites. Pueden ser por ejemplo el aceite de oliva o el de
girasol. Son las más beneficiosas para el cuerpo humano.
Existe una regla en la dieta para el consumo de las grasas: “Las de origen vegetal
son más beneficiosas que las de origen animal, y las poliinsaturadas son más
beneficiosas que las saturadas”. Hay unas grasas beneficiosas para el organismo
porque disminuyen el nivel del llamado “colesterol malo”. El colesterol es un lípido
presente en el plasma sanguíneo y en los tejidos de los vertebrados, su exceso se
asocia con enfermedades cardiovasculares. Es transportado por dos proteínas LDL
(Lipoproteína de baja densidad) y HDL (Lipoproteína de alta densidad). Nos
referimos a los aceites llamados “omega-3” y “omega-6”. El efecto beneficioso es
debido a que con su ingesta disminuye la concentración de LDL y aumenta la de
HDL (con las grasas saturadas se produce el efecto contrario). Las lipoproteínas de
alta densidad (HDL) pueden retirar el colesterol de las arterias y transportarlo al
hígado para su excreción. Las lipoproteínas de baja densidad (LDL) transportan el
colesterol a las arterias, si su nivel es más alto que el de HDL el colesterol tenderá
a fijarse en las arterias, de ahí que se les conozca como “colesterol bueno” al HDL
y “colesterol malo” al LDL.

4. SOLUBILIDAD
OBJETIVO: observar en varias grasas o aceites la solubidad con la que cuentan.
FUNDAMENTO:
Las grasas y aceites son generalmente solubles en solventes orgánicos no polares;
sin embargo, son casi inmiscibles en agua.
A temperaturas superiores a sus puntos de fusión, tanto las grasas como los ácidos
grasos son totalmente miscibles con una gran variedad de hidrocarburos, ésteres,
éteres, cetonas, entre otros.
Una característica básica de los lípidos, y de la que derivan sus principales
propiedades biológicas es la hidrofobicidad. La baja solubilidad de los lípidos se
debe a que su estructura química es fundamentalmente hidrocarbonada (alifática,
alicíclica o aromática), con gran cantidad de enlaces C-H y C-C. La naturaleza de
estos enlaces es 100% covalente y su momento dipolar es mínimo. El agua, al ser
una molécula muy polar, con gran facilidad para formar puentes de hidrógeno, no
es capaz de interaccionar con estas moléculas. En presencia de moléculas lipídicas,
el agua adopta en torno a ellas una estructura muy ordenada que maximiza las
interacciones entre las propias moléculas de agua, forzando a la molécula
hidrofóbica al interior de una estructura en forma de jaula, que también reduce la
movilidad del lípido. Todo ello supone una configuración de baja entropía, que
resulta energéticamente desfavorable. Esta disminución de entropía es mínima si
las moléculas lipídicas se agregan entre sí, e interaccionan mediante fuerzas de
corto alcance, como las fuerzas de Van der Waals. Este fenómeno recibe el nombre
de efecto hidrofóbico.
Material Imagen
5 tubos de ensaye

5. 5 pipetas de 1 ml
1 baño maría
Reactivos Imagen
Alcohol etílico
Cloroformo
Tetracloruro de carbono

6. Benceno
Distintas grasas y aceites
TÉCNICA
Coloque en cada tubo de ensayo 0.5 ml de aceite o grasa.
Añadir 1ml de las sustancias indicadas arriba (una sustancia diferente a cada tubo)
Evítese inflamación de los solventes.

7. Hágase en frío y caliente.
Para el registro de las observaciones se sugiere una tabla como la que se muestra
a continuación
RESULTADOS
CUANDO LA GRASA O ACEITE ESTA CALIENTE
Tipo de grasa Alcohol
etílico
Cloroformo Tetracloruro
de carbono
Benceno
MANTEQUILLA   NO HAY
REACTIVO

ACEITE OLIVO  X 
ACEITE
QUEMADO
 X X
CUANDO LA GRASA O ACEITE ESTA FRIO
Tipo de grasa Alcohol
etílico
Cloroformo Tetracloruro
de carbono
Benceno
MANTEQUILLA   NO HAY
REACTIVO
X
ACEITE OLIVO  X X
ACEITE
QUEMADO
 X 

8. CONCLUSION
Como pudimos observar algunos aceites y grasas son solubles en casi todos los
reactivos, pero hay unos que no lo son y eso va depender de su composición y
también de los reactivos que utilizamos ya que algunos no son tan solubles y
también otro factor es la temperatura ya que si comparamos algunos a temperatura
diferentes son más solubles que los otros.

9. OBTENCIÓN DE LÍPIDOS A PARTIR DE LA YEMA DE HUEVO
La yema de huevo es una fuente importante de lípidos, además de grasas simples
contiene esteroles y fosfolípidos estas sustancias pueden ser separadas unas de
otras por su diferencia de solubilidad y es relativamente sencillo obtener colesterol
en forma de cristales en una de las fracciones.
MATERIAL REACTIVOS
2 vasos de precipitado
1 matraz con tapón
1 embudo
1 papel filtro
Alcohol metílico
Éter
Éter - etanol (3:1)

10. TÉCNICA
Separar con mucho cuidado la yema de la clara.
Colocar 2 gramos de la yema en un vaso de precipitado
Añadir 2 ml de alcohol metílico y 2 ml de éter.

11. Colocar la muestra en un matraz, taparlo y agitarlo por 1 minuto.
Dejar reposar la mezcla por 10 minutos y después filtrar (usar papel filtro).

12. Lavar el residuo con 2 ml de la solución de éter – etanol.
RESULTADOS

13. CONCLUSIÓN
A través de la práctica realizada en el laboratorio se apreció que la yema de huevo
corresponde casi al 30 % del peso total, tiene una mayor densidad de nutrientes y
lípidos como: triglicéridos, fosfolípidos esteroles.
La yema de huevo es soluble en solventes orgánicos como el éter que la
mezclarse se homogeniza y separa los lípidos
En esta práctica se observaron dos fases, una liquida en la parte inferior del
matraz y en la parte superior del embudo se formó una masa de la yema indicando
la presencia de lectina, sustancia insoluble que hace que se separen
OBSERVACION
Al tocar la yema de huevo su textura fue semisólida como una masa y su color fue
un amarillo opaco.

14. ACIDEZ
OBJETIVO: observar la diferencia de acidez en dos distintas grasas.
Presencia natural de la acidez libre en las grasas, es decir la suma de los ácidos
grasos no combinados, resultado de la hidrólisis o descomposición lipolítica de
algunos triglicéridos. (Hidrólisis enzimático, tratamiento químico, o acción
bacteriana.).
El índice de acidez se define como el número de miligramos de hidróxido de potasio
necesarios para neutralizar los ácidos libres de un gramo de grasa. Su fórmula es:
I.A= n x 28
P
Dónde: n = No. de ml de solución 0.5 N de KOH gastados en la titulación
P = peso de la muestra
MATERIAL REACTIVOS
2 matraz Erlenmeyer 250 ml KOH 0.5 N Fenolftaleína
1 soporte universal
1 bureta

15. 1 pinzas para bureta
TÉCNICA
1.- Colocar 5 g de muestra en un matraz Erlenmeyer y agregar 3 gotas de
fenolftaleína (si es necesario disuelva la muestra en un poco de etanol).
2.- Titular con solución de KOH 0.5 N hasta obtener neutralización

16. 2.- Calcular el índice de acidez.
RESULTADO
Formula
I.A= n x 28
P
Cálculos de aceite vegetal
𝐼. 𝐴 =
0.2𝑚𝑙 𝑥 28
5 𝑔
= 1.12

17. Cálculos del aceite quemado
𝐼. 𝐴 =
0.4𝑚𝑙 𝑥 28
5 𝑔
= 2.24
CONCLUSION
Como observamos el aceite quemado es más acido que el aceite normal. Ya que
su acidez va a variar por diferentes factores uno de ellos y el más importante es que
generalmente las grasas frescas o recién preparadas no contienen ácidos grasos
libres o si los contienen los tienen en muy pequeñas cantidades, al envejecer,
especialmente sino han estado protegidos de la acción del aire y la luz su acidez
crece lentamente al principio y con cierta rapidez después.

18. RANCIDEZ
MATERIAL REACTIVOS
2 tubos de ensayo HCl 5N
1 baño maría Potasa alcohólica
1 bureta Fenolftaleína
2 matraz Erlenmeyer 250 ml
1 soporte universal
1 pinzas para bureta
TÉCNICA
Colocar 5ml de aceite de olivo en buen estado en un tubo de ensayo y en el otro
5ml de aceite rancio.
A los dos tubos añadir 1 ml de alcohol y calentar.
Enfriar y colocar una gota de solución en el papel indicador de pH.

19. Los valores normales son:
Aceite rancio: pH = 6.7
Aceite de Olivo (Oleico): pH = 6.1

20. SAPONIFICACIÓN
MATERIAL REACTIVOS
3 matraces HCl 5N
1 baño maría Potasa alcohólica
1 bureta Fenolftaleína
TÉCNICA
En dos matraces respectivamente colocar 1.5 mg de grasa o aceite
Añadir 25ml de solución de potasa alcohólica
Colocar en el matraz un tapón con un tubo de vidrio que actué como refrigerante
Calentar a baño maría de 15 a 30 minutos hasta que haya sido totalmente
saponificada (apariencia de clara uniforme)

21. También utilizar un blanco el aceite problema, usar 25ml de potasa alcohólica y
calentar no usar aceite.
Enfriar los matraces y titular usando una solución estándar (HCl 5N). Usar 3 gotas
de fenolftaleína hasta cambio de color y después agregar dos más.

22. COLORACIÓN
TÉCNICA
Los lípidos se colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el colorante Sudán
III.
MATERIAL REACTIVOS
1 gradilla Colorante Sudán III en
solución alcohólica
10 tubos de ensayo Tinta roja
5 pipetas
TECNICA
1. Disponer en una gradilla con tubos de ensayo colocando en ambos
2ml de diferentes aceites
2. Añadir a uno de los tubos 4-5 gotas de solución alcohólica de Sudán
III.

23. 3. A los otros tubos añadir 4-5 gotas de tinta roja.
4. Agitar ambos tubos y dejar reposar
5. Observar los resultados: en el tubo con Sudan III todo el aceite tiene
que aparecer teñido, mientras que, en el tubo con tinta, esta se irá al
fondo y el aceite no estará teñido.
RESULTADOS Y OBSERVACIONES
Sudán III Tinta roja
Tubo 1 Teñido No teñido
Tubo 2 Teñido Tenido
Tubo 3 Teñido No teñido
Tubo 4 Teñido Teñido
Tubo 5 tenido No teñido
CUESTIONARIO
1. ¿Qué son los jabones?
Son sales de ácidos grasos, producidos mediante una reacción química
conocida como saponificación. En esta reacción la grasa reacciona con la
sosa para producir jabón y glicerina.

24. 2. ¿Cómo se pueden obtener los jabones?
La preparación de jabón se hace mediante una reacción conocida
como saponificación. Para esta reacción tradicionalmente se han usado
aceites animales o vegetales.
3. ¿Porque en la saponificación la glicerina aparece en la fase acuosa?
Porque la glicerina es liposoluble
4. ¿Qué enzima logra en el aparato digestivo el hidrolisis de las grasas?
Indica lo que ocurre con la mezcla aceite-Sudán III y aceite-tinta y explica a
qué se debe la diferencia entre ambos resultados.
5. Escribe las fórmulas de los lípidos utilizados en la práctica
CONCLUSIONES
Bueno en esta práctica observamos como es que reaccionan las distintas
mezclas, y como es que en la saponificación con una gota pueda cambiar
completamente de color. En los aceites muestra con cuales soluciones si se
pueden mezclar y con otros no son se diluyen.