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INMUNODIAGNÓSTICO DE LA INFECCIÓN
                “VIGILANCIA EPIDEMIOLÓGICA”
                    (reporte de casoclÍnico)

  FECHA DE ENTREGA DESDE EL 29 DE OCTUBRE HASTA 1 NOVIEMBRE DEL
                       2012, HORA: 23:55 PM

Por favor leer toda la informaciónteórica y apliqueconceptosadquiridos en

el tema I.



Se presentaunbrote de enfermedad en un integral porcino en el departamento

de Norte de Santander, caracterizadopor:

Una forma hiperaguda o sobreaguda en 20 cerdoscriollossusceptibles y no

vacunados y quecasisuúnicosignoclínicofue la muertesúbita de 18 animales en

los   primeros   5   díasdespués     de    la   infección.Al   practicarse   la

necropsiasolamente se observaronsignos de congestiónagudageneralizada.

Una formaaguda con unaaltamorbilidad (100 animales) y mortalidad (62

animales), queocurrió entre los 10-20 díasdespués de la infección. Se

caracterizópor: fiebrealta (hasta más de 410C), depresión, inapetencia,

leucopenia con linfopenia, enrojecimiento de la pielqueevolucionóhacia la

cianosis (orejas, hocico, abdomen y en la zona medial de lasextremidades),

signosnerviosos (temblores, marchaondulante, posición de "perrosentado",
caída del tren posterior y pedaleo), conjuntivitiscatarral, descargasnasales y

diarreas de color amarillo a rojizo (hemorrágicas).




En la necropsia se observaron: hemorragiaspetequiales (puntiformes) en

riñones, vejigaurinaria, ganglioslinfáticos, laringe, vesículabiliar, estómago e

intestinos. Se observaronzonas de necrosis en tonsilas, infartosmarginales en

el bazo y úlcerasbotonosas en el intestinogrueso (colon), entre otraslesiones.



La      pesteporcinaclásica(PPC),         tambiénconocidacomocóleraporcino        o

fiebreporcinaclásica,    esunaenfermedadinfecto-contagiosa     de   origen   viral,

queafecta a los cerdosdomésticos y silvestres.

La PPCesproducidapor un virus ARN, envuelto, quejunto al virus de la diarrea

bovina (DVB) y al de la enfermedad de la frontera(EF)conforman el

géneroPestivirus, de la familiaFlaviviridae, los quetienen gran similituddesde el

punto      de    vista      antigénico,      estructural   y    biológico.       Lo

querequiereundiagnósticodiferencial.

Pertenece al grupo de lasllamadas"Enfermedades Rojas del Cerdo",

yaquecursaclínicamentecomounafiebrehemorrágicahiperaguda o sobreaguda,
con    altamorbilidad    y   mortalidad,    aunquetambiéntieneotrasformas      de

presentación            (aguda,            subaguda           y           crónica)

queincluyenademáslasinfeccionessubclínicas o inaparentes.



Por la similitud del cuadroclínico y anatomopatológico con otrasenfermedades

Rojas del Cerdo, la PPCrequiere del diagnósticodiferencial de laboratorio con:

La pesteporcinaafricana"PPA"(virus), erisipela, salmonelosis, pasteurelosis,

estreptococosis, leptospirosis (bacterias) e intoxicaciones con cumarínicos

(rodenticidas u otropesticida).



Confirmación de laboratorio:

El diagnóstico de laboratorio se basa en la demostración de la presencia de:

Virus (Macerado de órganos: tonsilas, ganglios, bazo y riñón) y sangre.

-   Poraislamiento viral en cultivos de células de la línea PK-15.

-   Porinoculación intramuscular en cerdos.

Componentes del virus (proteínas y/o ácidosnucleicos).Detección de Ag.

-   MétodosInmunohistoquímicos: (Cortes criostáticosde         órganos: tonsilas,

    ganglios, bazo, riñón e íleo).
InmunofluorescenciaDirecta(IFD). Sobrecortescriostáticos de órganos.

       Con el uso de un sueropoliclonal contra pestivirus y monoclonal contra

       PPC.

       InmunoperoxidasaDirecta(IPD).                                       Con

       anticuerposmonoclonalesconjugados con peroxidasa.

-   ELISA. Con el uso de un sueropoliclonal contra pestivirus y monoclonal

    contra PPC. (Macerado de órganos: tonsilas, ganglios, bazo y riñón) y

    sangre, plasma y suero.


-   Pormétodosmoleculares (RT-PCR, Secuenciación de ácidosnucleicos u

    otros). (Macerado de órganos: tonsilas, ganglios, bazo y riñón) sangre,

    plasma, suero y sobrenadante de cultivoscelularesinfectados.


Detección de Anticuerpos (Ac). (Suero)

-   Neutralización de la Peroxidasa(NPLA). Requiere de facilidades de cultivos

    de tejidos.

-   Neutralización de la Fluorescencia(NIF). Requiere de facilidades de cultivos

    de tejidos y microscopio de fluorescencia.

-   ELISA. Debetenerse a la hora de suselecciónlascondicionesepizootiológicas

    de la enfermedad en el país y tenermuyclaro los objetivos de suaplicación.

-
Ante la sospecha de unbrote de PPC se debeproceder al diagnóstico del virus

o de suscomponentes (Ags y ácidonucleico), pues los Acs no aparecen hasta

al menos 2-3 semanasdespués de la infección. Esporelloque la serología no

puedeser la únicaherramientadiagnósticapara la vigilanciadurante la fase de

erradicación   de   la   enfermedad,   pues    se   corre   el   riesgo   de   no

detectaroportunamente los casosclínicos de enfermedad y de esta forma

favorecer la diseminación de la PPC. Además, en los lugaresdonde se vacuna

contra la PPC, los animalesposeenAcs post-vacunales, lo cuallimita a estetipo

de diagnóstico.(LEA Y EXPLIQUE LAS ANTERIORES TÉCNICAS Y DIGA COMO

SERIA PARA ESTE CASO (CON SUS PLABRAS)

-   Toma, envío y conservación de muestras para los diferentes laboratorios

       Esquemas de diagnósticos directos, que Ud. Propone

       Diagnósticos indirectos que se pueden emplear.

       Diagnóstico diferencial.

       Nota. Deben leer primero la patogenia del PPC para enteder la dinámica

       de la respuesta inmune de la población porcina afectada.

       Respetuosamente,

       Israel Giovanni González Murillo DMV.

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Diagnóstico de brote de PPC mediante técnicas de laboratorio

  • 1. INMUNODIAGNÓSTICO DE LA INFECCIÓN “VIGILANCIA EPIDEMIOLÓGICA” (reporte de casoclÍnico) FECHA DE ENTREGA DESDE EL 29 DE OCTUBRE HASTA 1 NOVIEMBRE DEL 2012, HORA: 23:55 PM Por favor leer toda la informaciónteórica y apliqueconceptosadquiridos en el tema I. Se presentaunbrote de enfermedad en un integral porcino en el departamento de Norte de Santander, caracterizadopor: Una forma hiperaguda o sobreaguda en 20 cerdoscriollossusceptibles y no vacunados y quecasisuúnicosignoclínicofue la muertesúbita de 18 animales en los primeros 5 díasdespués de la infección.Al practicarse la necropsiasolamente se observaronsignos de congestiónagudageneralizada. Una formaaguda con unaaltamorbilidad (100 animales) y mortalidad (62 animales), queocurrió entre los 10-20 díasdespués de la infección. Se caracterizópor: fiebrealta (hasta más de 410C), depresión, inapetencia, leucopenia con linfopenia, enrojecimiento de la pielqueevolucionóhacia la cianosis (orejas, hocico, abdomen y en la zona medial de lasextremidades), signosnerviosos (temblores, marchaondulante, posición de "perrosentado",
  • 2. caída del tren posterior y pedaleo), conjuntivitiscatarral, descargasnasales y diarreas de color amarillo a rojizo (hemorrágicas). En la necropsia se observaron: hemorragiaspetequiales (puntiformes) en riñones, vejigaurinaria, ganglioslinfáticos, laringe, vesículabiliar, estómago e intestinos. Se observaronzonas de necrosis en tonsilas, infartosmarginales en el bazo y úlcerasbotonosas en el intestinogrueso (colon), entre otraslesiones. La pesteporcinaclásica(PPC), tambiénconocidacomocóleraporcino o fiebreporcinaclásica, esunaenfermedadinfecto-contagiosa de origen viral, queafecta a los cerdosdomésticos y silvestres. La PPCesproducidapor un virus ARN, envuelto, quejunto al virus de la diarrea bovina (DVB) y al de la enfermedad de la frontera(EF)conforman el géneroPestivirus, de la familiaFlaviviridae, los quetienen gran similituddesde el punto de vista antigénico, estructural y biológico. Lo querequiereundiagnósticodiferencial. Pertenece al grupo de lasllamadas"Enfermedades Rojas del Cerdo", yaquecursaclínicamentecomounafiebrehemorrágicahiperaguda o sobreaguda,
  • 3. con altamorbilidad y mortalidad, aunquetambiéntieneotrasformas de presentación (aguda, subaguda y crónica) queincluyenademáslasinfeccionessubclínicas o inaparentes. Por la similitud del cuadroclínico y anatomopatológico con otrasenfermedades Rojas del Cerdo, la PPCrequiere del diagnósticodiferencial de laboratorio con: La pesteporcinaafricana"PPA"(virus), erisipela, salmonelosis, pasteurelosis, estreptococosis, leptospirosis (bacterias) e intoxicaciones con cumarínicos (rodenticidas u otropesticida). Confirmación de laboratorio: El diagnóstico de laboratorio se basa en la demostración de la presencia de: Virus (Macerado de órganos: tonsilas, ganglios, bazo y riñón) y sangre. - Poraislamiento viral en cultivos de células de la línea PK-15. - Porinoculación intramuscular en cerdos. Componentes del virus (proteínas y/o ácidosnucleicos).Detección de Ag. - MétodosInmunohistoquímicos: (Cortes criostáticosde órganos: tonsilas, ganglios, bazo, riñón e íleo).
  • 4. InmunofluorescenciaDirecta(IFD). Sobrecortescriostáticos de órganos. Con el uso de un sueropoliclonal contra pestivirus y monoclonal contra PPC. InmunoperoxidasaDirecta(IPD). Con anticuerposmonoclonalesconjugados con peroxidasa. - ELISA. Con el uso de un sueropoliclonal contra pestivirus y monoclonal contra PPC. (Macerado de órganos: tonsilas, ganglios, bazo y riñón) y sangre, plasma y suero. - Pormétodosmoleculares (RT-PCR, Secuenciación de ácidosnucleicos u otros). (Macerado de órganos: tonsilas, ganglios, bazo y riñón) sangre, plasma, suero y sobrenadante de cultivoscelularesinfectados. Detección de Anticuerpos (Ac). (Suero) - Neutralización de la Peroxidasa(NPLA). Requiere de facilidades de cultivos de tejidos. - Neutralización de la Fluorescencia(NIF). Requiere de facilidades de cultivos de tejidos y microscopio de fluorescencia. - ELISA. Debetenerse a la hora de suselecciónlascondicionesepizootiológicas de la enfermedad en el país y tenermuyclaro los objetivos de suaplicación. -
  • 5. Ante la sospecha de unbrote de PPC se debeproceder al diagnóstico del virus o de suscomponentes (Ags y ácidonucleico), pues los Acs no aparecen hasta al menos 2-3 semanasdespués de la infección. Esporelloque la serología no puedeser la únicaherramientadiagnósticapara la vigilanciadurante la fase de erradicación de la enfermedad, pues se corre el riesgo de no detectaroportunamente los casosclínicos de enfermedad y de esta forma favorecer la diseminación de la PPC. Además, en los lugaresdonde se vacuna contra la PPC, los animalesposeenAcs post-vacunales, lo cuallimita a estetipo de diagnóstico.(LEA Y EXPLIQUE LAS ANTERIORES TÉCNICAS Y DIGA COMO SERIA PARA ESTE CASO (CON SUS PLABRAS) - Toma, envío y conservación de muestras para los diferentes laboratorios Esquemas de diagnósticos directos, que Ud. Propone Diagnósticos indirectos que se pueden emplear. Diagnóstico diferencial. Nota. Deben leer primero la patogenia del PPC para enteder la dinámica de la respuesta inmune de la población porcina afectada. Respetuosamente, Israel Giovanni González Murillo DMV.