El documento trata sobre la resistencia antimicrobiana en bacterias. Brevemente describe que la resistencia antimicrobiana ocurre cuando las bacterias dejan de verse afectadas por antimicrobianos a los que previamente eran sensibles, volviéndose inmunes a sus efectos. Luego, detalla diversos mecanismos de resistencia como la formación de la pared bacteriana, la acción de los betalactámicos, y la expresión y transferencia de genes de resistencia, entre bacterias a través de plásmidos y transposones. Finalmente, resume los principales

2. PARED BACTERIANA

3. RESISTENCIA ANTIMICROBIANA
 Fenómeno por el cual un microorganismo deja
de verse afectado por un antimicrobiano al
que anteriormente era sensible, son inmunes a
los efectos de los antimicrobianos, de modo que
los tratamientos habituales se vuelven
ineficaces y las infecciones persisten y
pueden transmitirse a otras personas”.
Fuente: WHO, Resistencia Antimicrobiana

4. FORMACIÓN DE LA PARED BACTERIANA
Fuente: Suárez C.(2009). Enferm Infecc Microbiol Clin. 27(2):116–129

5. MECANISMO DE ACCIÓN DE LOS BETALACTÁMICOS
Fuente: Suárez C.(2009). Enferm Infecc Microbiol Clin. 27(2):116–129

6. Clasificacióndelos
antibióticos Origen
Biológico
Sintético
Semisintetico
Espectro de acción
Reducido
Amplio
Actividad
Bacteriostático
Bactericida
Bacteriolítico
Estructura Química
1. B-lactámicos
2. Glicopeptidos
3. Aminoglucósidos
4. Macrólidos
5.Tetraciclinas
6.Fluoroquinolonas

7. MECANISMO DE EXPRESION Y
TRANSFERENCIA DE GENES DE RESISTENCIA
LOCALIZACION
DE LOS GENES
Cromosómica
Estabilidad genética
expresión a menudo
constitutiva.
Extra cromosómica Plásmidos fácilmente
movilizados para la
transferencia de una célula
bacteriana a otra.
Transposón Puede transferir material
genético entre el cromosoma
y el plásmido o entre células
bacterianas.
Fuente: Koneman EW, Allen SD, Janda WM, Schreckenberger PC, Winn WC. "Diagnóstico Microbiológico".
5ª ed. Ed. Médica Panamericana SA. Buenos Aires, 1999

8. EXPRESION DE
RESISTENCIA
Constitutiva
Producida con exposición al
estímulo o sin ella.
Inducible
Producida solo después de
la exposición al estímulo.
Constitutiva - inducible
Producida a bajo nivel, Sin
el estímulo.
Producción enormemente
aumentada después de la
estimulación.
Fuente: Koneman EW, Allen SD, Janda WM, Schreckenberger PC, Winn WC. "Diagnóstico Microbiológico". 5ª
ed. Ed. Médica Panamericana SA. Buenos Aires, 1999

9. MECANISMO DE ACCION DE LOS
ANTIBIOTICOS SOBRE LA ESTRUCTURA
BACTERIANA
Fuente: Brock 1999

11. MECANISMOS
DE RESISTENCIA
MECANISMO GRUPO DE ANTIBIOTICO EJEMPLO
INACTIVACION
ENZIMATICA
Betalactámicos Penicilinasas,
Cefalosporinasas,
carbapenemasas
Aminoglucósidos Enzimas
modificadoras de los
aminoglucósidos
RECEPTORES
ALTERADOS
Betalactámicos Proteínas fijadoras
de penicilina
alteradas en
bacterias gram
negativas y Gram
positivas
Tetraciclinas,
eritromicina,
aminoglucósidos
Alteraciones
ribosomicas
Quinolonas
Alteración del ADN
girasa
Sulfametazol y TMS Enzimas bacterianas
alteradas
TRANSPORTE
ALTERADO DEL
ANTIBIOTICO
Alteración en las
proteínas de la membrana
(porinas)
Bacterias gram
negativas
Fuerza motora protónica
disminuida.
aminoglucósidos
Transporte activo desde
la célula bacteriana
Tetraciclinas,
Eritromicina, flujo al
exterior activo.

12. MECANISMO DE
RESISTENCIA
GRAM POSITIVAS
Fuente: Arias C, Murray B. Nature Review, 2012 Vol 10; P 266-278

13. MECANISMOS PRODUCIDO POR
Staphylococcus
 Enzimas extracelulares por β- lactamasas
 Alteraciones en el sitio de diana
(modificación de las PBP)
 Resistencia de los macrólidos inducida por la
Eritromicina
 VISA o VRSA

14. PRUEBA DE LA Β-LACTAMASA
CEFINASA
 Es una cefalosporina nitrocefina de color
amarillo pálido, pero adquiere el color rojizo
cuando el enlace del anillo β- lactámico es
eliminado por la enzima presente en el
microorganismo

15. Staphylococcus sp. RESISTENTES A LOS
B-LACTAMICOS
PRODUCCION DE β- LACTAMASAS
ALTERACION DE PROTEINAS DE MEMBRANA

16. PBP
PBP
PBP
PBP PBP
Membrana
Celular
Citoplasma
DNA
Ribosoma
b-lactam
PBPPLP
PBP 2aPBP 2a
PBP 2a
S. aureus
Proteína ligadora de
penicilina
b-lactam
Pared Celular
Resistencia Bacteriana: mecA PBP2a
Penicillinas
Ampicilina
Amoxicilina
Cefalosporinas
A. Clavulanico
b-lactam
Inhibición de PBP

17. RESISTENCIA Staphylococcus sp A LOS BETALACTAMICOS
POR MODIFICACION DEL SITIO DIANA (PBP)
S. aureus, S. lugdunensis y staphylococcus coagulasa negativas
Su deteccion se realiza mediante la
prueba con el disco de cefoxitin. utilizada
para predecir la presencia del Gen mecA
que media la resistencia a los B-lactámicos
incluyendo a la oxacilina.
Cuando la oxacilina es resistente se dice:
que hay modificación del PBP, y se reporta
como Meticilino resistente.
Cuando la oxacilina es sensible, se debe
realizar test confirmatorio con el Cefoxitin
30 ug (FOX).
SARM
(Staphylococcus
aureus resistente
a meticilina)
SARM
(Hospitalario)
SARM
(Asociado a la
comunidad)
Resistencia a los 4 grupos de
antibióticos β-lactámicos
(penicilinas, cefalosporinas,
monobactámicos y carbapenemes)

18. ALGORITMO PARA LA DETECCION DE RESISTENCIA A METICILINA EN
Staphylococcus aureus Y S. lugdunensis
HALOS DE OXACILINA Y CEFOXITINA
Test de cefoxitin: Positivo(+) <22mm
Negativo(-)=> 22mm
OXA: 10mm
CEFOXI: 19mm
Con o sin R acompañante
SAMR
Staphyloccocus aureus
meticilino resistente
OXA: 13 mm
CEFOXI: 22mm
SAMS
Staphyloccocus aureus
meticilino sensibleGen mecA o
PBP 2a

19. TEST DE CEFOXITIN POSITIVO

21. RESISTENCIA AL GRUPO MLSB
Macrólidos (eritromicina), lincosamidas (clindamicina) y
estreptograminas B.
Prueba “D”:
Tipos de resistencia:
• Constitutiva (MLSBc)
• Inducible (MLSBi)
Relacionadas con la
expresión de los genes
ERM (erythromycin
ribosome methylation).

22. TEST D POSITIVO

23. PRUEBA “D” POSITIVA
Interpretación:
Si se observa una prueba positiva se debe informar
resistencia a clindamicina a pesar de que parezca
sensible.
20 mm
Eritromicina puede inducir a que la bacteria induzca resistencia sobre la
Clindamicina.
Se realiza cuando la eritromicina es resistente y la clindamicina sensible.
Fuente: INS

24. S. aureus Vs. VANCOMICINA
.
Sensibilidad reducida a Vancomicina por adq. de vanA:
VRSA: Resistentes (CIMs > ó =16 μg/ml)
VISA: Intermedio (CIM 4-8 μg/ml)
h-VISA: CIM VAN < 2 μg/ml (sensible) pero capaces
de seleccionar subpoblaciones VISA.
El mecanismo de resistencia se encontró asociado a una
alteración en la regulación de la síntesis y degradación de
la pared producida que genera cambios en la misma.
En algunas cepas se observa crecimiento lento y
coagulasa débil.

26. RESISTENCIA DE Enterococcus sp A LAS
PENICILINAS
Presenta dos mecanismos diferentes: B-lactamasas e
hiperproduccion de PBP de baja afinidad
E. faecalis. Suelen producir enzimas penicilinasas.
resistentes a penicilina, ampicilinas y ureidopenicilinas.
E faecium suele ser resistente a penicilinas por
hiperproduccion PBP de baja afinidad.
Fuente: INS

27. • E. faecalis
Usualmente susceptible a ampicilina y penicilina.
Puede adquirir resistencia a vancomicina,
usualmente por van A o van B.
Ocasionalmente produce beta-lactamasa.
• E. faecium
Con frecuencia resistente a ampicilina y penicilina.
Puede adquirir resistencia a vancomicina,
usualmente por van A o van B.
• E. raffinosus, E. avium y E. durans
Puede adquirir resistencia a vancomicina por los
genes vanA o vanB o, menos frecuentemente, por
los genes van D, van E, o van G.
Fuente: INS

28. Enterococcus sp.
Fuente: INS

29. MECANISMO DE RESISTENCIA GRAM NEGATIVAS

30. Antibióticos Iniciales del
disco
Nivel de
cefalosporina
Cefotaxime CTX Tercera
generación
Ceftriaxona CRO Tercera
generación
Ceftazidime CAZ Tercera
generación
Cefepime CPM
FEP
Cuarta generación
Cefoxitin FOX Segunda
generación
(cefamicina)
Aztronam AZT Monobactámico
ANTIBIOTICOS DE ESPECTRO EXTENDIDO

31. Penicilina P
Oxacilina OX
Cefalotina CF o KF
Ampicilina AMP
Piperacilina PIP
Carbecilina CAR
Amoxacilina AXA
B- LACTAMASAS DE ESPECTRO AMPLIADO

32. Ertapenem ETP
Meropenem MEM
Doripenem DOR
Imipenem IMP
CARBAPENEMICOS

33. MECANISMO DE RESISTENCIA A LOS
B- LACTÁMICOS EN GRAM NEGATIVOS
 Enzimas inactivantes (betalactamasas)
 Alteración de permeabilidad de la
membrana externa (perdida o reducción de
porinas).
 Aumento de bombas de extrusión
 Modificación de dianas de acción (Mutación
en las proteínas de unión a la penicilina).

34. CLASIFICACIÓN DE LAS BETALACTAMASAS
Los esquemas más utilizados para la clasificación de las
betalactamasas son:
• Bush- Jacoby-
MedeirosFuncional
• Ambler (clases
A, B, C y D)Molecular

35. GRUPO BUSH-
JACOBY (2009)
GRUPO BUSH-
JACOBY (2009)
AMBLER SUSTRATO
INHIBIDO POR
REPRESENTANTE
Ac. Clav. EDTA
1
1 C Cefalosporinas y cefamicinas No No AmpC, CMY-2, FOX, MIR, ACT,
1e C Cefalosporinas No No GCI, CMY-37
2
2a A Penicilinas Si No PC-1
2b A
Penicilinas y cefalosporinas de primera
generación
Si No TEM-1, TEM-2, SHV-1
2be A
Cefalosporinas de espectro extendido y
monobactámicos
Si No TEM-3, SHV-2, CTX-M-15, PER-1
2br A Penicilinas No No TEM-30, SHV-10
2ber A
Cefalosporinas de espectro extendido y
monobactámicos
No No TEM-50
2c A Carbenicilinas Si No PSE-1, CARB-3
2ce A Carbenicilina y cefepime Si No RTG-4
2d D Cloxacilina Variable No OXA-1, OXA-10
2de D
Cloxaxilina y cefalosporinas de espectro
extendido
Variable No 0XA-11, OXA-15
2df D Cloxacilina y carbapenemes Variable No OXA-23, OXA-24, OXA-48
2e A
Cefalosporinas de espectro extendido (no
actúa sobre monobactámicos)
Si No CepA
2f A Carbapenemes Variable No KPC, IMI, SME
3
3a B Carbapenemes No Si IMP, VIM, GIM, SPM, SIM, NDM
3b B Carbapenemes No Si CAU, GOB, FEZ
CLASIFICACIÓN DE LAS BETALACTAMASAS
Fuente: Bush K. et al (1995). AAC. 39(6): 1211–1233. Bush, K. (2010). AAC. 54 (3): 969 - 976

36. Enzimas derivadas del grupo 2be: SHV-2 a SHV-6, TEM-3 a TEM-26,CTX-M,
PER-1, MEN-1, VEB-1.
Fuente: INS

37. La prueba tamiz y la prueba confirmatoria fenotípica para la detección de BLEE
está recomendada para Klebsiella pnuemoniae, Klebsiella oxytoca, E. coli y
Proteus mirabilis.
El test confirmatorio se realiza con Ac.
Clavulanico, cefotaxime, ceftazindima.
Prueba positiva:
Un incremento ≥ 5 mm en la zona de
diámetro para cualquiera de los agentes
antimicrobianos probados en combinación
con acido clavulánico.
Ejemplo:
Ceftazidime (CAZ): 16 mm
Ceftazidme + Ac. clavulánico
(CAZ/CLA): 21
TEST CONFIRMATORIO PARA DETECCIÓN DE
BLEE

38. BETALACTAMASA ESPECTRO
EXTENDIDO (BLEE)
:

39. TEST DEL ACIDO CLAVULANICO POSITIVO

40. MECANISMO DE RESISTENCIA BLES
MICROORGANISMOS ASOCIADOS Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae,
Proteus mirabilis
GEN DE RESISTENCIA Sin gen especifico
LOCALIZACIONES DE LOS GENES Plásmidos (extra cromosómicos)
EXPRESION GENETICA Constitutiva
ENZIMAS RELACIONADAS Tem3, SHV, CTX-M-15
TEST CONFIRMATORIO Acido clavulánico
ANTIBIOTICOS INDICADORES
(SUSTRATO)
Cefalosporinas de 3era y 4ta generación,
Aztreonam
ANTIBIOTICOS PARA DETECTAR
MECANISMO DE RESISTENCIA
Cefoxitim: Sensible
Pipercilim-Taxobactam: Sensible
Dra. María Luisa Ramírez. Universidad de Santander – Catedra de Correlación Clínica (Microbiología) - 2015

42. Antibiograma
 Sexo: Femenina
 Edad: 28
 Muestra: ORINA
Urocultivo >100.000 UFC/ml
 Escherichia coli
 Germen productor de
Betalactamasa de
espectro extendido. No
se recomienda el uso de
antibióticos de 3
generación como
Ceftazidime, Ceftriaxona,
Cefotaxime y
monobactámicos como
Aztreonam
Antibiótico MIC 1
Amikacina <=2 S
Ampicilina-
sulbaltam
16 R
Cefalotina >=64 R
Cefepime 8 R
Cefotaxime >=64 R
Ceftriaxona >=64 R
Cefuroxime-
sódico
>=64 R
Ceftazidima 16 R
Ciprofloxacina >=4 R
Ertapenem <=0,5 S
Gentamicina >=16 R
Meropenem <=0,25 S
Nitrofurantoina <=16 S

43. BETALACTAMASA AMPC, CEFALOSPORINASAS
Este tipo de B- lactamasas puede ser inducido por la exposición a antibióticos
B- lactamicos.
Esto se debe a la presencia en estos microorganismos de un gen regulador
denominado AmpR, el cual en condiciones de crecimiento normal tiene la función de
reprimir la expresión de AmpC.
.
La sigla AMPCES hace referencia a los siguientes microorganismo en el cual se
observan este tipo de resistencia.
Acinetobacter
Morganella
Proteus/Providencia
Citrobacter
Enterobacter
Serratia

44. Pruebas para
la detección
de AmpC
Prueba de
disco con
Acido borónico
Prueba de
disco tris
EDTA
TECNICAS PARA DETECTAR AMPC
 Hidrolizan las cefalosporinas
de 1, 2, 3, generación , en
algunos casos en menor
medida al CEFEPIME,
incluyendo resistencia a las
cefamicinas, aztreonam y a
los inhibidores B-lactamicos

46. MECANISMO DE RESISTENCIA CEFALOSPORINASAS
MICROORGANISMOS ASOCIADOS Acinetobacter sp. Morganella morganii,
Proteus indol positivo, Citrobacter sp.
Enterobacter sp. Serratia sp.
GEN DE RESISTENCIA AmpR
LOCALIZACIONES DE LOS GENES Cromosoma
EXPRESION GENETICA Constitutiva e Inducible
ENZIMAS RELACIONADAS Ampc
TEST CONFIRMATORIO Acido fenil-boronico
ANTIBIOTICOS INDICADORES
(SUSTRATO)
Cefalosporinas, Cefamicinas, Cefoxitin
ANTIBIOTICOS PARA DETECTAR
MECANISMO DE RESISTENCIA
Cefepime: Sensible
Dra. María Luisa Ramírez. Universidad de Santander – Catedra de Correlación Clínica (Microbiología) - 2015

47. CARBAPENEMASAS
Metalobetalactamasas
MBL –clase B
Enzimas tipo
serina clase A
Enzimas tipo serina
clase D -
Oxacilinasas
BGNNF >> Enterob.
R a C3G y C4G
S a AZT
Inh. por EDTA
VIM, NDM, IMP,
SPM. GIM, SIM, AIM,
KHM, DIM, FIM Enterob>>BGNNF
KPC y GES:
R a C3G, C4G y
AZT
Inh. por APB
KPC, GES,
Sme, IMI/NMC
Acinetob>> Enterob.
No perfil típico
hidrólisis variable
Sin inhibidores
OXA-23, OXA-24,
OXA-51, OXA-58,
OXA-143, OXA-48
Grupo 3 Grupo 2f Grupo 2d
Diapositiva de Fernando Pasteran

48. KPC.(Klebsiella pneumoniae
carbapenemasa).
Carbapenemasas tipo KPC: variantes KPC-2 y KPC-3 (1, 2, 3, 4, 5)
Son de naturaleza plasmidica asociada a transposón Tn4401.
Las KPC hidrolizan de forma eficiente penicilinas, carbapenémicos, cefalosporinas,
no se inhiben por el ácido clavulánico, pero si por el acido Borónico.
Detectadas en Enterobacterias (principalmente K, pneumoniae, E coli) y no
fermentadores como P. aeruginosa.
Diseminación de KPC-3 en hospitales de diferentes ciudades de Colombia

49. Recomendada por CLSI, para
enterobacterias, se debe realizar
cuando se cumplan los siguientes
criterios (únicamente para
enterobacterias):
 Resistencia a una o más
cefalosporinas de la subclase III.
(ceftriaxone, cefotaxime, ceftazidime,
cefoperazone, ceftizoxime)
Resistencia o susceptibilidad
intermedia a por lo menos un
carbapenémico:1. Control negativo para producción de carbapenemasas
2. Control positivo para producción de carbapenemasas
3. Aislamiento positivo para producción de carbapenemasas
Test De Hodge - TMH
 Difusión de disco:
Ertapenem (19-21mm) y meropenem
(16-21mm), no imipenem.
 Microdilución (CIM):
CIM de Ertapenem
2µg/mL
CIM de Imipenem y/o
Meropenem 2 – 4 µg/mL.

50. Test Modificado de Hodge (TMH)
A partir de la suspensión 0,5
Mac Farland realizar una
dilución 1/10 con solución
salina

51. MECANISMO DE RESISTENCIA CARBAPENEMASAS
MICROORGANISMOS ASOCIADOS Clase A: Klebsiella pneumoniae y otras enterobacterias
Clase B: Pseudomonas sp. y otras enterobacterias
Clase D: Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter sp.
GEN DE RESISTENCIA Transposón Tn 4401
LOCALIZACIONES DE LOS GENES Plásmidos
EXPRESION GENETICA Inducible
ENZIMAS RELACIONADAS Clase A: KPC, GES, SME
Clase B: VIM, NDM Clase D: OXA
TEST CONFIRMATORIO Clase A: Test de Hodge1
Clase B: Dependientes de Zinc: EDTA
Clase D: No hay test relacionado
ANTIBIOTICOS INDICADORES (SUSTRATO) Meropenem, Ertapenem2, Imipenem, Doripenem
ANTIBIOTICOS PARA DETECTAR MECANISMO DE
RESISTENCIA
Clase A: Meropenem: R. Ertapenem: R
Clase B: Astronam: Sensible
Clase D: Resistente a todos los antibioticos
1: Son inhibidos por el acido fenil-boronico. 2: Se aconseja el uso de Ertrapenem ya que no induce tanta resistencia en comparación al Meropenem
Dra. María Luisa Ramírez. Universidad de Santander – Catedra de Correlación Clínica (Microbiología) - 2015

52. Walsh T. (2005). CMR. 18: 306-25
Se han reportado falsos positivos en
P. aeruginosa y A. baumannii
Prueba positiva:
Un incremento en la CIM ≥ 3 diluciones dobles en la
elipse de imipenem en combinación con EDTA (IPI)
vs la zona de elipse con imipenem solo.
Ejemplo:
Imipenem (IP): 64mg/mL
Imipenen / EDTA (IPI): ≤1mg/mL
E-test MBL

53.  Paciente: masculino
 Procedencia : UCI ADULTOS
 Muestra: secreción bronquial
 Prueba: Cultivo de gérmenes comunes
ANTIBIOTICOS MIC 1
Ampicilina-
Sulbactam
>=32 R
Cefotaxime >=64 R
Ceftriazona >=64 R
Ceftazidima >=64 R
Ciprofloxacina >=4 R
Gentamicina >=16 R
Meropenem >=16 R
Trimetropim/sulfamet
oxazole
160 R
Tigeciclina <=05 S
Colistin <=0,5 S
Imipenem >=16 R
S= Sensible R=Resistente I=Intermedio
Microorganismo:
Acinetobacter
baumannii complex
El microorganismos
muestra resistencia
a carbapenemicos

54. Las especies Proteus sp, Providencia sp y Morganella sp, pueden
presentar CIMs elevados a imipenem por mecanismos no relacionados
a la producción de carbapenemasas, por lo cual sugiere iniciar la
búsqueda de carbapenemasas en estos géneros a partir de una CIM de
4µg/mL para imipenem y 2µg/mL para ertapenem y meropenem
Reporte en caso de prueba positiva: “Organismo con posible
producción de carbapenemasas” y no cambie la interpretación
de susceptibilidad a carbapenémicos
No todos los aislamientos de Enterobacteriacea productores de
Carbapenemasas son TMH (+) y resultados de MHT (+) pueden
encontrarse en aislamientos con mecanismos de resistencia a
carbapenémicos diferentes a la producción de carbapenemasas