TINCIÓN
HEMATOXILINA-
EOSINA Ana Karen Ibarra
Danilo Castillo
Introducción
La mayoría de las
células y matrices
extracelulares no
poseen un color
propio por lo que su
observación directa
al microscopio
óptico no permite
observar sus
características
morfológicas.
Las tinciones
generales se usan
habitualmente en los
laboratorios de
histología para
obtener una visión
general de las
muestras de tejido.
Normalmente
combinan más de
un colorante.
La tinción más
común es la que
combina una
sustancia como la
hematoxilina y el
colorante ácido
eosina. 1
Coloración
El núcleo se
teñirá de azul
EL citoplasma
tomará un
color rosa
Músculo se
teñirá de un
color rojizo o
fucsia
Los glóbulos
rojos en
naranja o rojo
La fibrina de
rosa intenso
Colágeno de
un rosa pálido.
Queratina se
tornará rojo
intenso.2
Productos utilizados en el proceso
Xileno
Etanol de
50º, 70º, 80º,
90º, 96º y
100º
Hematoxilina
de Mayer
Eosina
acuosa al
0.2%
H2O
destilada
H2O
corriente
Medio de
montaje3
Materiales
Microscopio
Placas de
muestras
Método
• Desparafinado
• hidratación
Paso 1
• Hematoxilina
por 5 minutos
Paso 2 • Lavado
• Acido acético
5% por 30
segundos
Paso 3
• Lavado
• Viraje azul
Paso 4
Método
• Deshidratación
Paso 5
• Eosina
alcohólica por
2 minutos
Paso 6 • Lavado en
alcohol
Paso 7
• Montaje
Paso 8
¿Qué pasa si… a la placa sólo se le
realiza el desparafinado y la
hidratación?
Microscopio
óptico, campo
claro, 40X, tinción
de hematoxilina y
eosina
•Placa 1.
¿Qué pasa si… aplicamos
hematoxilina tan solo por 2 minutos?
Microscopio
óptico, campo
claro, 40X, tinción
de hematoxilina y
eosina
•Placa 2
¿Qué pasa si…aplicamos
hematoxilina por 5 minutos?
Microscopio
óptico, campo
claro, 40X, tinción
de hematoxilina y
eosina
•Placa 3
¿Qué pasa si…no realizamos
correctamente el lavado con ácido
acético?
Microscopio
óptico, campo
claro, 40X, tinción
de hematoxilina y
eosina
•Placa 4
¿Qué pasa si… no realizamos de
forma correcta el lavado y el viraje
azul?
Microscopio
óptico, campo
claro, 40X, tinción
de hematoxilina y
eosina
•Placa 5
¿Qué pasa si…aplicamos eosina
alcohólica por tan sólo 1 minuto?
Microscopio
óptico, campo
claro, 40X, tinción
de hematoxilina y
eosina
•Placa 6
¿Qué pasa si…aplicamos eosina
alcohólica por 2 minutos?
Microscopio
óptico, campo
claro, 40X, tinción
de hematoxilina y
eosina
•Placa 7
¿Qué pasa si…no hacemos un buen
montaje?
Microscopio
óptico, campo
claro, 40X, tinción
de hematoxilina y
eosina
•Placa 9
¿Qué pasa si… realizamos
correctamente todo?
Microscopio
óptico, campo
claro, 40X, tinción
de hematoxilina y
eosina
•Placa 8
Conclusiones
Debido a que es uno de los
métodos de tinción más utilizado
es necesario que aprendamos a
realizarlo de la mejor manera y al
mismo tiempo es muy importante
saber como quedaría la muestra si
no realizamos el proceso de la
forma correcta
Referencias
1. 2. 3. Depto. de Biología Funcional y Ciencias de la Salud. Tinción: hematoxilina y
eosina. Atlas de Histología Vegetal y Animal. [INTERNET] 2014. [4 de febrero del 2015];
doi: http://webs.uvigo.es/mmegias/6-tecnicas/protocolos/p-tincion-h-e.php

Tinción hematoxilina-eosina

  • 1.
  • 2.
    Introducción La mayoría delas células y matrices extracelulares no poseen un color propio por lo que su observación directa al microscopio óptico no permite observar sus características morfológicas. Las tinciones generales se usan habitualmente en los laboratorios de histología para obtener una visión general de las muestras de tejido. Normalmente combinan más de un colorante. La tinción más común es la que combina una sustancia como la hematoxilina y el colorante ácido eosina. 1
  • 3.
    Coloración El núcleo se teñiráde azul EL citoplasma tomará un color rosa Músculo se teñirá de un color rojizo o fucsia Los glóbulos rojos en naranja o rojo La fibrina de rosa intenso Colágeno de un rosa pálido. Queratina se tornará rojo intenso.2
  • 4.
    Productos utilizados enel proceso Xileno Etanol de 50º, 70º, 80º, 90º, 96º y 100º Hematoxilina de Mayer Eosina acuosa al 0.2% H2O destilada H2O corriente Medio de montaje3
  • 5.
  • 6.
    Método • Desparafinado • hidratación Paso1 • Hematoxilina por 5 minutos Paso 2 • Lavado • Acido acético 5% por 30 segundos Paso 3 • Lavado • Viraje azul Paso 4
  • 7.
    Método • Deshidratación Paso 5 •Eosina alcohólica por 2 minutos Paso 6 • Lavado en alcohol Paso 7 • Montaje Paso 8
  • 8.
    ¿Qué pasa si…a la placa sólo se le realiza el desparafinado y la hidratación? Microscopio óptico, campo claro, 40X, tinción de hematoxilina y eosina •Placa 1.
  • 9.
    ¿Qué pasa si…aplicamos hematoxilina tan solo por 2 minutos? Microscopio óptico, campo claro, 40X, tinción de hematoxilina y eosina •Placa 2
  • 10.
    ¿Qué pasa si…aplicamos hematoxilinapor 5 minutos? Microscopio óptico, campo claro, 40X, tinción de hematoxilina y eosina •Placa 3
  • 11.
    ¿Qué pasa si…norealizamos correctamente el lavado con ácido acético? Microscopio óptico, campo claro, 40X, tinción de hematoxilina y eosina •Placa 4
  • 12.
    ¿Qué pasa si…no realizamos de forma correcta el lavado y el viraje azul? Microscopio óptico, campo claro, 40X, tinción de hematoxilina y eosina •Placa 5
  • 13.
    ¿Qué pasa si…aplicamoseosina alcohólica por tan sólo 1 minuto? Microscopio óptico, campo claro, 40X, tinción de hematoxilina y eosina •Placa 6
  • 14.
    ¿Qué pasa si…aplicamoseosina alcohólica por 2 minutos? Microscopio óptico, campo claro, 40X, tinción de hematoxilina y eosina •Placa 7
  • 15.
    ¿Qué pasa si…nohacemos un buen montaje? Microscopio óptico, campo claro, 40X, tinción de hematoxilina y eosina •Placa 9
  • 16.
    ¿Qué pasa si…realizamos correctamente todo? Microscopio óptico, campo claro, 40X, tinción de hematoxilina y eosina •Placa 8
  • 17.
    Conclusiones Debido a quees uno de los métodos de tinción más utilizado es necesario que aprendamos a realizarlo de la mejor manera y al mismo tiempo es muy importante saber como quedaría la muestra si no realizamos el proceso de la forma correcta
  • 19.
    Referencias 1. 2. 3.Depto. de Biología Funcional y Ciencias de la Salud. Tinción: hematoxilina y eosina. Atlas de Histología Vegetal y Animal. [INTERNET] 2014. [4 de febrero del 2015]; doi: http://webs.uvigo.es/mmegias/6-tecnicas/protocolos/p-tincion-h-e.php