Este documento proporciona información sobre el antibiograma, que determina la sensibilidad de un microorganismo a diferentes antibióticos mediante pruebas in vitro. Describe los métodos de dilución y difusión para realizar el antibiograma, incluidos la preparación del inóculo bacteriano, la inoculación de placas de agar, la aplicación de discos de antibióticos y la medición de zonas de inhibición. El objetivo es determinar la concentración inhibitoria mínima y la concentración bactericida mínima de diferentes antibióticos contra la

1. ANTIBIOGRAMADra. Natalia Izurieta CergneuxPRÁCTICA NO. 4 - LABORATORIO DE BACTERIOLOGÍA Y MICOLOGÍA

2. DEFINICIÓNPrueba in vitro que determina la sensibilidad de un microorganismo frente a diferentes antibióticos.SENSIBLERESISTENTE

3. OBJETIVOS

4. MÉTODOS - ANTIBIOGRAMA

6. CONCENTRACIÓN INHIBITORIA MÍNIMAEs la mínima concentración de un antimicrobiano que inhibe la multiplicación y crecimiento visible de una cepa bacteriana en un medio de cultivo.

7. CONCENTRACIÓN BACTERICIDA MÍNIMAPara determinar la CBM se seleccionan tubos donde no haya turbidez y se siembra el contenido en un medio de cultivo sólido y se observa si hay o no crecimiento. LA CBM corresponde a aquella dilución donde no hay crecimiento bacteriano.

8. CIM Y CBMCONTROL SIN ABABABABABABS/CS/CS/CS/CC/CC/CC/CC/CS/CC/CS/CC/C

9. MÉTODO DE DILUCIONConsiste en determinar el crecimiento de una bacteria en presencia de concentraciones decrecientes de un mismo antibiótico. Se observa el crecimiento de los microorganismos mediante la aparición de turbidez

10. MÉTODO DE DIFUSIÓNEs el método más empleado en el laboratorio.Se trabaja a partir de un microorganismo debidamente aislado e identificado (CULTIVO PURO)

11. MÉTODO DE DIFUSIÓNPRINCIPIO DEL MÉTODO

13. SELECCIÓN DE LAS COLONIASEs el paso más importante. Se selecciona de 3 a 5 colonias del microorganismo.

15. PREPARACIÓN DEL INÓCULO Y ESTANDARIZACIÓN DE LA SUSPENSIÓNEn ambos métodos, la turbidez de la suspensión debe ser estandarizada al estándar 0,5 de McFarland (que corresponde a aproximadamente 1,5 X 10 -8 CFU/ml).

16. SUSPENSIÓN DIRECTA DE LAS COLONIASSe trabaja con cultivos jóvenes. En esta técnica se estandariza el inóculo al mismo tiempo que se prepara la suspensión. SS ó CALDO COMÚN3 A 5 COLONIASAJUSTAR TURBIDEZ0,5 ESCALA DE McFARLANDESTABILIZAR 15 MIN.

17. FASE LOGARÍTMICA DE CRECIMIENTOSe usa para la mayoría de microorganismos de rápido crecimiento.3 A 5 COLONIASSS ó CALDO COMÚNINCUBACIÓN A 35 0 C 2-6 HORASAJUSTAR TURBIDEZ0,5 ESCALA DE McFARLAND

19. PREPARACIÓN PARA LA INOCULACIÓNLosdiscos deben permanecer a temperatura ambiente durante 1-2 horas.El agar de elección para esta prueba es el agar Mueller-Hinton (MHA).

20. INOCULACIÓN DE LA PLACA213

21. INOCULACIÓN DE LA PLACA1ml de inóculo

22. APLICACIÓN DE LOS DISCOS DE ANTIBIÓTICOSMÉTODO MANUAL

23. MÉTODO AUTOMÁTICO

24. APLICACIÓN DE LOS DISCOS DE ANTIBIÓTICOS187293654

25. MEDICIÓN DE LAS ZONAS DE INHIBICIÓN