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CURSO: EQUIPOS DE
LABORATORIO CLINICO
TEMA: TIPOS DE COLORANTES
AÑO DEL BICENTENARIO, DE LA CONSOLIDACIÓN DE NUESTRA
INDEPENDENCIA, Y DE LA CONMEMORACIÓN DE LAS HEROICAS
BATALLAS DE JUNÍN Y AYACUCHO”.
Los colorantes son compuestos químicos
utilizados en laboratorios de diversas
disciplinas, desde la biología y la química
hasta la medicina y la industria
alimentaria. Su aplicación es fundamental
para resaltar, identificar o distinguir
diferentes componentes en muestras o
materiales, permitiendo así la realización
de análisis precisos y la obtención de
resultados significativos.
COLORANTES
 Cristal violeta. Da color azul o violáceo
a las bacterias Gram positivas.
 Safranina. Da color rojizo o anaranajado a
las bacterias Gram negativas.
Aparte de estos colorantes, en la tinción de Gram se usará el
Lugol como mordiente, y alcohol 96% para decolorar. Todas
las células (sean Gram positivas o negativas) se teñirán con
el cristal violeta
UTILIDADES
La principal utilidad de la tinción de Gram es la de distinguir entre bacterias Gram positivas y
negativas. Las Gram negativas que perdieron coloración por el tratamiento con alcohol ahora se
verán de color rojo, naranja o rosáceo por acción de la safranina. Por otra parte, las bacterias Gram
positivas teñidas con cristal violeta tendrán un color azulado o violáceo.
Gram positivas
Podemos observar
que forman racimos,
pero su forma es
irregular, y los grupos
pueden ser de diversa
morfología.
Se puede observar que es
un cocobacilo alargado
que suele agruparse
formando cadenas.
Visión de Listeria
monocytogenes con
la tinción de Gram.
Visión
de Staphylococus
aureus con la
tinción de Gram
gram negativas
Legionella
pneumophila con la
tinción de Gram.
Pseudomonas
aeruginosa con la tinción
de Gram. Aparecen como
bacilos alargados
Tinción Ziehl-Neelsen
La tinción de Ziehl-Neelsen es de tipo
diferencial, y sirve para detectar
bacterias ácido-alcohol resistentes
(BAAR), siendo la más
destacada Mycobacterium tuberculosis.
Esto es muy útil, sobre todo teniendo en
cuenta que M. tuberculosis no puede
ser detectada correctamente con la
tinción de Gram.
 Fucsina fenicada. Da un
color rojizo a las bacterias
AAR.
 Azul de metileno. Da un
color azulado al resto de
bacterias que no son AAR.
COLORANTES
En la tinción de Ziehl-Neelsen, el alcohol-ácido cumple
la una función parecida a la del alcohol 96% en la
tinción de Gram. En este caso, el contraste aparece por
los ácidos micólicos, que hacen que sus bacterias sean
impermeables al alcohol-ácido
UTILIDADES
La principal función de la tinción de Ziehl-Neelsen es la
detección de micobacterias, tales como las provocadoras de
tuberculosis (M. tuberculosis) o la lepra (M. leprae). También hay
otras micobacterias que, si bien no son patógenas, sí que pueden
ser patógenos oportunistas en determinadas circunstancias.
Tinción de Wirtz-Conklin
La tinción de Wirtz-Conklin se usa para observar bien
las endosporas bacterianas. La muestra debe ser obtenida de un cultivo en fase
estacionaria. En este caso, para su observación al microscopio hay que usar la
lente x100, usando aceite de inmersión.
COLORANTES
 Verde malaquita. Tiñe las
endosporas de verde.
 Safranina. Es opcional, y
sirve para colorear el resto
de la célula con un color
anaranjado.
UTILIDADES
Se usa para observan las endosporas bacterianas, estructuras de
resistencia que forman algunas bacterias para sobrevivir en condicione
ambientales extremas donde no pueden hacer su ciclo de vida normal.
Así, se pueden ver las endosporas que forman Bacillus
anthracis y Clostridium perfringens,
TINCIÓN DE LEIFSON
La tinción de Leifson usa para la observación de flagelos bacterianos; entra dentro
de las tinciones selectivas. Tienen un espesor de 0.01 micrones, por lo que son
invisibles al microscopio óptico; por ello hace falta esta técnica especial. Para su
observación en el microscopio óptico, se debe usar aceite de inmersión y el aumento
100x.
COLORANTES
Se usa el colorante de Leifson que está formado por:
 Fucsina básica 95%. Es
el colorante en sí mismo.
 Etanol 1.2%. Ácido tánico 3%.
Tiene función de
mordiente
 Ácido tánico 3%.
Tiene función de
mordiente.
UTILIDADES
Esta tinción se usa para ver a los flagelos, algo esencial para identificar muchas especies. Y
es que los flagelos pueden aparecen en número y disposición diferente en las bacterias, de ahí
que sean una forma de clasificación de estas (para ver los tipos de bacterias según el número
y disposición de flagelos puedes entrar en el artículo de la célula procariota, en la sección
“flagelo”).
Flagelos de diversas especies de Bacillus con la tinción de Leifson. Usando la tinción de Gram no
se podrían ver dichos flagelos, de ahí la necesidad de usar esta alternativa.
TINCIÓN DE GIEMSA
Esta tinción es más usada en citología, ya que puede discriminar entre zonas con altos
contenidos de ADN, por lo que puede diferenciar diversos orgánulos de la célula; es una
tinción diferencial. No obstante, también se usa en microbiología para la detección de
ciertas bacterias, destacando Rickettsia.
COLORANTES
Colorante de
Giemsa. Da un
color azul oscuro
o violáceo al
microorganismo
UTILIDADES
En microbiología, la tinción de Giemsa detecta
a bacterias como Rickettsia y Chlamydia,
a protistas como Plasmodium y Pneumocystis, y ciertos hongos,
como Histoplasma. Dichos microorganismos se detectan en posibles células
infectadas.
Visión de Plasmodium malariae con la
tinción de Giemsa (azul oscuro). Se
pueden ver hasta 8 merozoitos dentro
de la célula infectada
Presencia de Helicobacter
pylori (bacterias con forma de
espirilo) con tinción de
Giemsa en una bioscopia
gástrica
TINCIÓN NEGATIVA
Se usa para detectar las cápsulas que aparecen en algunas bacterias, así que entra en el grupo
de las tinciones selectivas. La tinción negativa se puede usar para el microscopio óptico o
para el microscopio electrónico.
Esta técnica se basa en contrastar las muestras mediante una sustancia opaca en ambos
microscopios.
COLORANTES
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Utilidades
La principal función de la tinción negativa
es observar las cápsulas bacterianas.
Esto ocurre porque las cápsulas no
absorben la tinta china, por lo que estas
estructuras aparecen como zonas claras
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Visión de las cápsulas
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neoformans en el microscopio
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tipos de colorantes / para laboratorio clínico

  • 1. CURSO: EQUIPOS DE LABORATORIO CLINICO TEMA: TIPOS DE COLORANTES AÑO DEL BICENTENARIO, DE LA CONSOLIDACIÓN DE NUESTRA INDEPENDENCIA, Y DE LA CONMEMORACIÓN DE LAS HEROICAS BATALLAS DE JUNÍN Y AYACUCHO”.
  • 2. Los colorantes son compuestos químicos utilizados en laboratorios de diversas disciplinas, desde la biología y la química hasta la medicina y la industria alimentaria. Su aplicación es fundamental para resaltar, identificar o distinguir diferentes componentes en muestras o materiales, permitiendo así la realización de análisis precisos y la obtención de resultados significativos.
  • 3. COLORANTES  Cristal violeta. Da color azul o violáceo a las bacterias Gram positivas.  Safranina. Da color rojizo o anaranajado a las bacterias Gram negativas. Aparte de estos colorantes, en la tinción de Gram se usará el Lugol como mordiente, y alcohol 96% para decolorar. Todas las células (sean Gram positivas o negativas) se teñirán con el cristal violeta
  • 4. UTILIDADES La principal utilidad de la tinción de Gram es la de distinguir entre bacterias Gram positivas y negativas. Las Gram negativas que perdieron coloración por el tratamiento con alcohol ahora se verán de color rojo, naranja o rosáceo por acción de la safranina. Por otra parte, las bacterias Gram positivas teñidas con cristal violeta tendrán un color azulado o violáceo. Gram positivas Podemos observar que forman racimos, pero su forma es irregular, y los grupos pueden ser de diversa morfología. Se puede observar que es un cocobacilo alargado que suele agruparse formando cadenas. Visión de Listeria monocytogenes con la tinción de Gram. Visión de Staphylococus aureus con la tinción de Gram gram negativas Legionella pneumophila con la tinción de Gram. Pseudomonas aeruginosa con la tinción de Gram. Aparecen como bacilos alargados
  • 5. Tinción Ziehl-Neelsen La tinción de Ziehl-Neelsen es de tipo diferencial, y sirve para detectar bacterias ácido-alcohol resistentes (BAAR), siendo la más destacada Mycobacterium tuberculosis. Esto es muy útil, sobre todo teniendo en cuenta que M. tuberculosis no puede ser detectada correctamente con la tinción de Gram.
  • 6.  Fucsina fenicada. Da un color rojizo a las bacterias AAR.  Azul de metileno. Da un color azulado al resto de bacterias que no son AAR. COLORANTES En la tinción de Ziehl-Neelsen, el alcohol-ácido cumple la una función parecida a la del alcohol 96% en la tinción de Gram. En este caso, el contraste aparece por los ácidos micólicos, que hacen que sus bacterias sean impermeables al alcohol-ácido
  • 7. UTILIDADES La principal función de la tinción de Ziehl-Neelsen es la detección de micobacterias, tales como las provocadoras de tuberculosis (M. tuberculosis) o la lepra (M. leprae). También hay otras micobacterias que, si bien no son patógenas, sí que pueden ser patógenos oportunistas en determinadas circunstancias.
  • 8. Tinción de Wirtz-Conklin La tinción de Wirtz-Conklin se usa para observar bien las endosporas bacterianas. La muestra debe ser obtenida de un cultivo en fase estacionaria. En este caso, para su observación al microscopio hay que usar la lente x100, usando aceite de inmersión. COLORANTES  Verde malaquita. Tiñe las endosporas de verde.  Safranina. Es opcional, y sirve para colorear el resto de la célula con un color anaranjado.
  • 9. UTILIDADES Se usa para observan las endosporas bacterianas, estructuras de resistencia que forman algunas bacterias para sobrevivir en condicione ambientales extremas donde no pueden hacer su ciclo de vida normal. Así, se pueden ver las endosporas que forman Bacillus anthracis y Clostridium perfringens,
  • 10. TINCIÓN DE LEIFSON La tinción de Leifson usa para la observación de flagelos bacterianos; entra dentro de las tinciones selectivas. Tienen un espesor de 0.01 micrones, por lo que son invisibles al microscopio óptico; por ello hace falta esta técnica especial. Para su observación en el microscopio óptico, se debe usar aceite de inmersión y el aumento 100x. COLORANTES Se usa el colorante de Leifson que está formado por:  Fucsina básica 95%. Es el colorante en sí mismo.  Etanol 1.2%. Ácido tánico 3%. Tiene función de mordiente  Ácido tánico 3%. Tiene función de mordiente.
  • 11. UTILIDADES Esta tinción se usa para ver a los flagelos, algo esencial para identificar muchas especies. Y es que los flagelos pueden aparecen en número y disposición diferente en las bacterias, de ahí que sean una forma de clasificación de estas (para ver los tipos de bacterias según el número y disposición de flagelos puedes entrar en el artículo de la célula procariota, en la sección “flagelo”). Flagelos de diversas especies de Bacillus con la tinción de Leifson. Usando la tinción de Gram no se podrían ver dichos flagelos, de ahí la necesidad de usar esta alternativa.
  • 12. TINCIÓN DE GIEMSA Esta tinción es más usada en citología, ya que puede discriminar entre zonas con altos contenidos de ADN, por lo que puede diferenciar diversos orgánulos de la célula; es una tinción diferencial. No obstante, también se usa en microbiología para la detección de ciertas bacterias, destacando Rickettsia. COLORANTES Colorante de Giemsa. Da un color azul oscuro o violáceo al microorganismo
  • 13. UTILIDADES En microbiología, la tinción de Giemsa detecta a bacterias como Rickettsia y Chlamydia, a protistas como Plasmodium y Pneumocystis, y ciertos hongos, como Histoplasma. Dichos microorganismos se detectan en posibles células infectadas. Visión de Plasmodium malariae con la tinción de Giemsa (azul oscuro). Se pueden ver hasta 8 merozoitos dentro de la célula infectada Presencia de Helicobacter pylori (bacterias con forma de espirilo) con tinción de Giemsa en una bioscopia gástrica
  • 14. TINCIÓN NEGATIVA Se usa para detectar las cápsulas que aparecen en algunas bacterias, así que entra en el grupo de las tinciones selectivas. La tinción negativa se puede usar para el microscopio óptico o para el microscopio electrónico. Esta técnica se basa en contrastar las muestras mediante una sustancia opaca en ambos microscopios. COLORANTES Nigrosina. Tinta china.
  • 15. Utilidades La principal función de la tinción negativa es observar las cápsulas bacterianas. Esto ocurre porque las cápsulas no absorben la tinta china, por lo que estas estructuras aparecen como zonas claras en un fondo negro, oscuro. Visión de las cápsulas de Cryptococcus neoformans en el microscopio óptico con tinción negativa (tinta china)
  • 16.
  • 17. Y como dijo sus ex términos