tipos de tinción

1. CURSO: EQUIPOS DE
LABORATORIO CLINICO
TEMA: TIPOS DE COLORANTES
AÑO DEL BICENTENARIO, DE LA CONSOLIDACIÓN DE NUESTRA
INDEPENDENCIA, Y DE LA CONMEMORACIÓN DE LAS HEROICAS
BATALLAS DE JUNÍN Y AYACUCHO”.

2. Los colorantes son compuestos químicos
utilizados en laboratorios de diversas
disciplinas, desde la biología y la química
hasta la medicina y la industria
alimentaria. Su aplicación es fundamental
para resaltar, identificar o distinguir
diferentes componentes en muestras o
materiales, permitiendo así la realización
de análisis precisos y la obtención de
resultados significativos.

3. COLORANTES
 Cristal violeta. Da color azul o violáceo
a las bacterias Gram positivas.
 Safranina. Da color rojizo o anaranajado a
las bacterias Gram negativas.
Aparte de estos colorantes, en la tinción de Gram se usará el
Lugol como mordiente, y alcohol 96% para decolorar. Todas
las células (sean Gram positivas o negativas) se teñirán con
el cristal violeta

4. UTILIDADES
La principal utilidad de la tinción de Gram es la de distinguir entre bacterias Gram positivas y
negativas. Las Gram negativas que perdieron coloración por el tratamiento con alcohol ahora se
verán de color rojo, naranja o rosáceo por acción de la safranina. Por otra parte, las bacterias Gram
positivas teñidas con cristal violeta tendrán un color azulado o violáceo.
Gram positivas
Podemos observar
que forman racimos,
pero su forma es
irregular, y los grupos
pueden ser de diversa
morfología.
Se puede observar que es
un cocobacilo alargado
que suele agruparse
formando cadenas.
Visión de Listeria
monocytogenes con
la tinción de Gram.
Visión
de Staphylococus
aureus con la
tinción de Gram
gram negativas
Legionella
pneumophila con la
tinción de Gram.
Pseudomonas
aeruginosa con la tinción
de Gram. Aparecen como
bacilos alargados

5. Tinción Ziehl-Neelsen
La tinción de Ziehl-Neelsen es de tipo
diferencial, y sirve para detectar
bacterias ácido-alcohol resistentes
(BAAR), siendo la más
destacada Mycobacterium tuberculosis.
Esto es muy útil, sobre todo teniendo en
cuenta que M. tuberculosis no puede
ser detectada correctamente con la
tinción de Gram.

6.  Fucsina fenicada. Da un
color rojizo a las bacterias
AAR.
 Azul de metileno. Da un
color azulado al resto de
bacterias que no son AAR.
COLORANTES
En la tinción de Ziehl-Neelsen, el alcohol-ácido cumple
la una función parecida a la del alcohol 96% en la
tinción de Gram. En este caso, el contraste aparece por
los ácidos micólicos, que hacen que sus bacterias sean
impermeables al alcohol-ácido

7. UTILIDADES
La principal función de la tinción de Ziehl-Neelsen es la
detección de micobacterias, tales como las provocadoras de
tuberculosis (M. tuberculosis) o la lepra (M. leprae). También hay
otras micobacterias que, si bien no son patógenas, sí que pueden
ser patógenos oportunistas en determinadas circunstancias.

8. Tinción de Wirtz-Conklin
La tinción de Wirtz-Conklin se usa para observar bien
las endosporas bacterianas. La muestra debe ser obtenida de un cultivo en fase
estacionaria. En este caso, para su observación al microscopio hay que usar la
lente x100, usando aceite de inmersión.
COLORANTES
 Verde malaquita. Tiñe las
endosporas de verde.
 Safranina. Es opcional, y
sirve para colorear el resto
de la célula con un color
anaranjado.

9. UTILIDADES
Se usa para observan las endosporas bacterianas, estructuras de
resistencia que forman algunas bacterias para sobrevivir en condicione
ambientales extremas donde no pueden hacer su ciclo de vida normal.
Así, se pueden ver las endosporas que forman Bacillus
anthracis y Clostridium perfringens,

10. TINCIÓN DE LEIFSON
La tinción de Leifson usa para la observación de flagelos bacterianos; entra dentro
de las tinciones selectivas. Tienen un espesor de 0.01 micrones, por lo que son
invisibles al microscopio óptico; por ello hace falta esta técnica especial. Para su
observación en el microscopio óptico, se debe usar aceite de inmersión y el aumento
100x.
COLORANTES
Se usa el colorante de Leifson que está formado por:
 Fucsina básica 95%. Es
el colorante en sí mismo.
 Etanol 1.2%. Ácido tánico 3%.
Tiene función de
mordiente
 Ácido tánico 3%.
Tiene función de
mordiente.

11. UTILIDADES
Esta tinción se usa para ver a los flagelos, algo esencial para identificar muchas especies. Y
es que los flagelos pueden aparecen en número y disposición diferente en las bacterias, de ahí
que sean una forma de clasificación de estas (para ver los tipos de bacterias según el número
y disposición de flagelos puedes entrar en el artículo de la célula procariota, en la sección
“flagelo”).
Flagelos de diversas especies de Bacillus con la tinción de Leifson. Usando la tinción de Gram no
se podrían ver dichos flagelos, de ahí la necesidad de usar esta alternativa.

12. TINCIÓN DE GIEMSA
Esta tinción es más usada en citología, ya que puede discriminar entre zonas con altos
contenidos de ADN, por lo que puede diferenciar diversos orgánulos de la célula; es una
tinción diferencial. No obstante, también se usa en microbiología para la detección de
ciertas bacterias, destacando Rickettsia.
COLORANTES
Colorante de
Giemsa. Da un
color azul oscuro
o violáceo al
microorganismo

13. UTILIDADES
En microbiología, la tinción de Giemsa detecta
a bacterias como Rickettsia y Chlamydia,
a protistas como Plasmodium y Pneumocystis, y ciertos hongos,
como Histoplasma. Dichos microorganismos se detectan en posibles células
infectadas.
Visión de Plasmodium malariae con la
tinción de Giemsa (azul oscuro). Se
pueden ver hasta 8 merozoitos dentro
de la célula infectada
Presencia de Helicobacter
pylori (bacterias con forma de
espirilo) con tinción de
Giemsa en una bioscopia
gástrica

14. TINCIÓN NEGATIVA
Se usa para detectar las cápsulas que aparecen en algunas bacterias, así que entra en el grupo
de las tinciones selectivas. La tinción negativa se puede usar para el microscopio óptico o
para el microscopio electrónico.
Esta técnica se basa en contrastar las muestras mediante una sustancia opaca en ambos
microscopios.
COLORANTES
Nigrosina.
Tinta china.

15. Utilidades
La principal función de la tinción negativa
es observar las cápsulas bacterianas.
Esto ocurre porque las cápsulas no
absorben la tinta china, por lo que estas
estructuras aparecen como zonas claras
en un fondo negro, oscuro.
Visión de las cápsulas
de Cryptococcus
neoformans en el microscopio
óptico con tinción negativa
(tinta china)

17. Y como dijo sus
ex términos