El documento describe el proceso de tinción de Gram, el método de tinción diferencial más importante en bacteriología. La tinción de Gram divide las bacterias en dos grupos dependiendo de la composición química de su pared celular: Gram-positivas con una gruesa capa de peptidoglicano y Gram-negativas con una capa más delgada rodeada de una membrana externa. El proceso involucra el uso de cristal violeta, yodo, alcohol etílico y safranina para teñir y diferenciar las bacterias Gram-

1. MARCO TEORICO
Una tinción, es el proceso por el cual las moléculas de un colorante se adsorben a una
superficie, el uso de colorantes permite cambiar el color de las células de los
microorganismos y poder realizar la observación en microscopio óptico.
Dado que las bacterias son casi incoloras, no presentan contraste con el medio en el cual se
encuentran suspendidas y no pueden observarse claramente sin algún tratamiento previo.
Tinción de Gram
Es aplicada a muestras clínicas permite, además, visualizar otras estructuras (leucocitos,
fibrina, células epiteliales)
Es el método de tinción diferencial más importante usado en bacteriología llamada así en
honor al Dr. Hans Christian Gram, este método divide las bacterias en dos grandes grupos,
las Gram-negativas y las Gram-positivas.
Esto es esencial para la clasificación y diferenciación de microorganismos, la reacción a la
tinción de Gram está basada en la diferencia en la composición química de la pared celular
bacteriana.
Las bacterias Grampositivas tienen una gruesa capa de peptidoglicano o mureína, mientras
que esta capa es más fina en las Gram-negativas y está rodeada por una bicapa lipídica
externa, el Peptidoglicano es un polisacárido formado por dos subunidades químicas, N-
acetilglucosamina y acido Nacetilmurámico.
Se utiliza Cristal Violeta, que tiñe todas las células moradas.
Mordiente: Yodo o lugol.
El yodo, aparte de matar bacterias, incrementa la afinidad del colorante primario con la
célula, formando complejos insolubles con este.
El complejo cristal violeta-yodo sirve para intensificar el color del tenido.
Agente decolorante: Se utiliza alcohol etílico al 95%. El etanol tiene doble función:
deshidratante de proteínas y solvente de lípidos.
El alcohol disuelve los lípidos de la parte externa de la pared celular Gram-negativa,
haciendo la pared más porosa.
De esta manera, el complejo Cristal violeta-yodo es removido de la capa de mureina más
fina de las bacterias Gram negativas, mientras que la pared más gruesa de las Gram-
positivas retiene el tinte en su interior.

2. Tinción de Contraste: Safranina. Este tinte se utiliza para teñir de rojo las células
previamente decoloradas, o sea, las Gram-negativas.
Conclusiones
 Es un procedimiento rápido, con Eficacia conocida.
 Son Baratas y no necesitan un equipo que no exista ya en la mayoría de
laboratorios.
Recomendaciones
 Tener conocimientos previos para que la tinción sea efectiva
 Manejar los reactivos de manera correcta
Bibliografía
 http://www.pucmmsti.edu.do/websise/estudiante/materias/201220132/ST-BIO-231-
P-071/BIO-231%20PRACTICA
 Baylet and Scoth ``DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICO``12º Edición
Editorial medica Panamericana
 http://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2014/ir141b.pdf