2. La diferenciación de E. Histolytica de E. Dispar continua
siendo un problema en el diagnostico rutinario.
3. ¿ para que han sido diseñados los
anticuerpos monoclonales contra
proteína de E. histolytica ?
4. realizar estudios de morfología y caracterización de
enzimas y otras proteínas involucradas en el
metabolismo de este protozoo
5. Realizar estudios de la patofisiologia de la amebiasis y
Como posibles candidatos terapéuticos
6. las cisteínas proteasas de los protozoos son consideradas
factores de virulencia no solo en E. Histolytica sino también
en otros protozoos.(leismania)
7. Leishmania:leishmaniasis
La leishmaniasis (o leishmaniosis) es una
enfermedad zoonótica causada por un protozoo del
género Leishmania y transmitido por la picadura de
mosquitos de los géneros Phlebotomus y Lutzomyia en
América. Las manifestaciones clínicas de la
enfermedad van desde úlceras cutáneas que cicatrizan
espontáneamente, hasta formas fatales en las cuales se
presenta inflamación grave del hígado y del bazo.
11. El hecho de diferenciar E. dispar de E. histolytica se
baso en que el gen de Edcp5 presenta diferencias de
hasta un 20% en su secuencia de nucleótidos con el
gen Ehcp5
12. El gen Edcp5 : en su cadena de nucleótidos inserciones
que producen múltiples codones de paro dañando la
funcionalidad del gen,presentandose el fenotipo E.
Dispar que no puede expresar la proteína.
13. la estabilidad genética de los hibridomas en
cultivo depende de factores como el pH del medio
y los nutrientes que este contiene
14. Para evitar la multiplicación de los híbridos no
secretores de anticuerpos que podrían dominar el
cultivo ,después de evaluar los sobrenadantes de las
colonias se procedió a los procesos de clonación y
reclonacion.
15. El anticuerpo monoclonal obtenido permite la
determinación de la enzima proteasa en muestras
clínicas positivas para el complejo E. Histolytica /E.
Dispar
16. Si bien E. Dispar no expresa la cisteína proteasa 5 (cp5)
Esta ameba produce otros tipos de cisteína proteasas
(cp1,cp2,cp3,cp8).
17. Según literatura seria posible el uso del anticuerpo
monoclonal anti-Ehcp5r en una prueba diagnostica
para diferenciar E. Histolytica de E.Dispar.
18. Se logro obtener un anticuerpo monoclonal de ratón
que reconoce la proteína cisteína proteasa 5
recombinante de E. Histolytica (Ehcp5)
19. Es necesario realizar ensayos de validación de las técnicas
empleadas para diferenciación de E. Histolityca de E.Dispar
20. Utilizar el anticuerpo monoclonal obtenido para
determinar la importancia de la cisteína proteasa 5 de E.
Histolytica en los diferentes procesos de la ameba.