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FAUSTO BLADIMIR PANTOJA 
UNIVERSIDAD DE NARIÑO 
MEDCINA VETERINARIA 
2013
La diferenciación de E. Histolytica de E. Dispar continua 
siendo un problema en el diagnostico rutinario.
¿ para que han sido diseñados los 
anticuerpos monoclonales contra 
proteína de E. histolytica ?
realizar estudios de morfología y caracterización de 
enzimas y otras proteínas involucradas en el 
metabolismo de este protozoo
Realizar estudios de la patofisiologia de la amebiasis y 
Como posibles candidatos terapéuticos
las cisteínas proteasas de los protozoos son consideradas 
factores de virulencia no solo en E. Histolytica sino también 
en otros protozoos.(leismania)
Leishmania:leishmaniasis 
La leishmaniasis (o leishmaniosis) es una 
enfermedad zoonótica causada por un protozoo del 
género Leishmania y transmitido por la picadura de 
mosquitos de los géneros Phlebotomus y Lutzomyia en 
América. Las manifestaciones clínicas de la 
enfermedad van desde úlceras cutáneas que cicatrizan 
espontáneamente, hasta formas fatales en las cuales se 
presenta inflamación grave del hígado y del bazo.
Como se contagia
Efectos visibles
leishmaniosis
El hecho de diferenciar E. dispar de E. histolytica se 
baso en que el gen de Edcp5 presenta diferencias de 
hasta un 20% en su secuencia de nucleótidos con el 
gen Ehcp5
El gen Edcp5 : en su cadena de nucleótidos inserciones 
que producen múltiples codones de paro dañando la 
funcionalidad del gen,presentandose el fenotipo E. 
Dispar que no puede expresar la proteína.
la estabilidad genética de los hibridomas en 
cultivo depende de factores como el pH del medio 
y los nutrientes que este contiene
Para evitar la multiplicación de los híbridos no 
secretores de anticuerpos que podrían dominar el 
cultivo ,después de evaluar los sobrenadantes de las 
colonias se procedió a los procesos de clonación y 
reclonacion.
El anticuerpo monoclonal obtenido permite la 
determinación de la enzima proteasa en muestras 
clínicas positivas para el complejo E. Histolytica /E. 
Dispar
Si bien E. Dispar no expresa la cisteína proteasa 5 (cp5) 
Esta ameba produce otros tipos de cisteína proteasas 
(cp1,cp2,cp3,cp8).
Según literatura seria posible el uso del anticuerpo 
monoclonal anti-Ehcp5r en una prueba diagnostica 
para diferenciar E. Histolytica de E.Dispar.
Se logro obtener un anticuerpo monoclonal de ratón 
que reconoce la proteína cisteína proteasa 5 
recombinante de E. Histolytica (Ehcp5)
Es necesario realizar ensayos de validación de las técnicas 
empleadas para diferenciación de E. Histolityca de E.Dispar
Utilizar el anticuerpo monoclonal obtenido para 
determinar la importancia de la cisteína proteasa 5 de E. 
Histolytica en los diferentes procesos de la ameba.
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  • 1. FAUSTO BLADIMIR PANTOJA UNIVERSIDAD DE NARIÑO MEDCINA VETERINARIA 2013
  • 2. La diferenciación de E. Histolytica de E. Dispar continua siendo un problema en el diagnostico rutinario.
  • 3. ¿ para que han sido diseñados los anticuerpos monoclonales contra proteína de E. histolytica ?
  • 4. realizar estudios de morfología y caracterización de enzimas y otras proteínas involucradas en el metabolismo de este protozoo
  • 5. Realizar estudios de la patofisiologia de la amebiasis y Como posibles candidatos terapéuticos
  • 6. las cisteínas proteasas de los protozoos son consideradas factores de virulencia no solo en E. Histolytica sino también en otros protozoos.(leismania)
  • 7. Leishmania:leishmaniasis La leishmaniasis (o leishmaniosis) es una enfermedad zoonótica causada por un protozoo del género Leishmania y transmitido por la picadura de mosquitos de los géneros Phlebotomus y Lutzomyia en América. Las manifestaciones clínicas de la enfermedad van desde úlceras cutáneas que cicatrizan espontáneamente, hasta formas fatales en las cuales se presenta inflamación grave del hígado y del bazo.
  • 11. El hecho de diferenciar E. dispar de E. histolytica se baso en que el gen de Edcp5 presenta diferencias de hasta un 20% en su secuencia de nucleótidos con el gen Ehcp5
  • 12. El gen Edcp5 : en su cadena de nucleótidos inserciones que producen múltiples codones de paro dañando la funcionalidad del gen,presentandose el fenotipo E. Dispar que no puede expresar la proteína.
  • 13. la estabilidad genética de los hibridomas en cultivo depende de factores como el pH del medio y los nutrientes que este contiene
  • 14. Para evitar la multiplicación de los híbridos no secretores de anticuerpos que podrían dominar el cultivo ,después de evaluar los sobrenadantes de las colonias se procedió a los procesos de clonación y reclonacion.
  • 15. El anticuerpo monoclonal obtenido permite la determinación de la enzima proteasa en muestras clínicas positivas para el complejo E. Histolytica /E. Dispar
  • 16. Si bien E. Dispar no expresa la cisteína proteasa 5 (cp5) Esta ameba produce otros tipos de cisteína proteasas (cp1,cp2,cp3,cp8).
  • 17. Según literatura seria posible el uso del anticuerpo monoclonal anti-Ehcp5r en una prueba diagnostica para diferenciar E. Histolytica de E.Dispar.
  • 18. Se logro obtener un anticuerpo monoclonal de ratón que reconoce la proteína cisteína proteasa 5 recombinante de E. Histolytica (Ehcp5)
  • 19. Es necesario realizar ensayos de validación de las técnicas empleadas para diferenciación de E. Histolityca de E.Dispar
  • 20. Utilizar el anticuerpo monoclonal obtenido para determinar la importancia de la cisteína proteasa 5 de E. Histolytica en los diferentes procesos de la ameba.