analisis microbiologico basado en tesis

1. MICROORGANISMOS
INDICADORES
Coliformes fecales
Integrantes:
Mendoza Blancas Darghi
Tarazona Tapia Maricruz
Mesofilos

3. Libre
microorganismos
considerados
patógenos
libre de bacterias
indicadoras de
contaminación
fecal

4. 22/10/13
Determinar la calidad bacteriológica del agua
subterránea de consumo humano determinando
el recuento de heterótrofos, coliformes totales y
termotolerantes
Muestra:
Muestra:
Aguas Subterráneas de los 46
Aguas Subterráneas de los 46
pozos de la Yarada y Los Palos –
pozos de la Yarada y Los Palos –
Tacna
Tacna

5. 22/10/13

6. Composición y preparación de medios de
cultivos y reactivos
Verde Brillante Bilis 2% Caldo (gramos/litro )
• Bilis de buey deshidratada………… 20,0gr
• Lactosa ………………………………..10,0gr
• Peptona……………………………… 10,0 gr
• Verde brillante ………………………..0,0133gr
pH: 7,2 +/-0,2
Preparación de Brilla simple en tubos de 10 ml:
66 tubos x 10 ml = 660 ml pero se prepara 661
40 g -----------> 1000 ml
X g <------------ 661 ml
X = 24,44 g para 66 tubos simples.
Preparación del Brilla doble en tubos de 10 ml:
33 tubos x 10 ml = 330 ml pero se prepara 331
40 g ------------> 1000 ml
X g <------------- 331 ml
X = 13,24 g pero por ser doble se usa 13,24 x 2 = 26,48 g
Agua Peptonada (gramos/litro)
• Peptona de carne………. 10,0 gr
• Cloruro de sodio………... 5,0gr
pH: 7,2 +/-0,2

7. Agar Cuenta Colonias + TTC al 0,5%
Agua destilada
estéril
+ 0,5 g de TTC
Filtro de
celulosa
estéril
de 45 µm
Solución
TTC al 0,5 %
estéril
Agar Cuenta
Colonias PCA +
TTC 0,5%

8. Procedimiento
Muestra de Agua
Subterránea
10ml
Caldo Brilla
Doble
Concentrado
COLIFORMES
TERMOTOLERANTES
Caldo Brilla
Simple
Concentrado
Gas (+)
24
horas
Prueba
confirmati
va
positiva
para
Coliforme
Termotole
rante
Prueba
negativ
a
Gas (+) 24
horas
Gas (-)
24
horas
Gas (-)
24
horas
Prueba de
temperatura
elevada en Caldo
Brilla e incubar
a 44,5 +/- 0,2
°C
Reincub
ar 24
Horas
Gas (+) 48
horas:
Prueba
pos itiva
para
Colif ormes
totales
Gas (-) 48
horas:
Prueba
negativa

9. 22/10/13
Presencia de
turbidez
Siembra en Caldo Brilla
Colonias coloreadas teñidas
por la reducción del TTC

10. conteo de bacterias
mesófilas

11. se observa que la mayoría del agua subterránea de los pozos muestreados
), no cumplió con la norma nacional establecida para la cantidad aceptab
coliformes totales

12. 22/10/13
resultados

14. MO Aerobios Mesófilos :
Muestra : preparados de nutricion
enteral
Metodo : recuento en placa por
siembra en profundidad
Medio : agar plate count
Diluyente : agua de peptona 0,1
%

16. MO Coliformes Fecales :
Muestra: preparados de
nutricion enteral
Metodo: recuento en placa
Medio : agar violeta cristal rojo
neutro bilis (VRBA)
Diluyente: agua de peptona
0,1%

18. Métodos normalizados
MO AEROBIOS MESÓFILOS
•ISO 4833
:Directiva
general para el recuento
de
microorganismos.
Método por recuento
de colonias a 30º C
•AF V 08-01 : Método
de
rutina
para
el
recuento
de
microorganismos.
Método de recuento
de las colonias a 30º C
COLIFORMES TOTALES
•ISO 4831 Directiva general
para el recuento de coliformes
•NF V 08-050 Método de rutina
para
la
enumeración
de
coliformes mediante el recuento
de colonias a 30º C.