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45
Rev Inv Vet Perú 2011; 22(1): 45-52
1
Laboratorio de Patología Aviar, 3
Laboratorio de Microbiología y Parasitología Veterinaria, Facul-
tad de Medicina Veterinaria, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima
2
E-mail : eliana.icochea@gmail.com
INTERFERENCIA DE LA VACUNACIÓN SIMULTÁNEA CONTRA
METAPNEUMOVIRUS AVIAR, BRONQUITIS INFECCIOSA Y
ENFERMEDAD DE NEWCASTLE EN POLLOS DE CARNE
INTERFERENCE OF SIMULTANEOUS VACCINATION AGAINST AVIAN METAPNEUMOVIRUS,
INFECTIOUS BRONCHITIS , AND NEWCASTLE DISEASE IN BROILERS
Víctor Palomino T.1
, E. Icochea D.1,2
, John Guzmán G. 1
, Rosa Sam T.3
,
Alberto Manchego S.3
RESUMEN
El estudio evaluó la interferencia en la protección contra la enfermedad de Newcastle
(ENC) ocasionada por la vacunación contra Metapneumovirus (aMPV) en un programa
de vacunación simultánea al primer día de edad contra ENC y Bonquitis Infecciosa (BI)
en pollos de carne. Se usaron 400 pollos de carne Cobb-Vantress 500 divididos en cuatro
grupos. El grupo I vacunado al primer día contra BI (H120), ENC (VG/GA) y aMPV (11/94)
y revacunado al día 9 contra ENC (VG/GA). El Grupo II vacunado al primer día contra BI
(Ma5), ENC (C2) y aMPV (11/94) y, revacunado al día 9 contra ENC (Clone 30). El grupo
III vacunado al primer día contra BI (H120) y ENC (VG/GA) y revacunado al día 9 contra
ENC (VG/GA). El Grupo IV no fue vacunado. Todos los grupos fueron desafiados el día
30 con una cepa velogénica viscerotrópica del virus de ENC. Se valuó mortalidad, signos
clínicos, respuesta serológica, reacción post vacunal y parámetros productivos. La mor-
talidad fue de 12 y 16% para los grupos vacunados contra aMPV versus 23% para el
grupo no vacunado contra aMPV, y 88% para el control sin vacunas; sin embargo, las
diferencias entre los tres grupos vacunados no fueron significativas. Los resultados
indican que la vacunación contra aMPV en pollos de carne no ocasionó interferencia en
la protección contra la ENC en ninguno de los grupos vacunados simultáneamente con-
tra la ENC, BI y aMPV al primer día de edad, y se vio menor reacción post vacunal usando
la cepa entérica que con la cepa de tropismo respiratorio del virus de la ENC.
Palabras clave: Metapneumovirus Aviar, Bronquitis Infecciosa, Enfermedad de
Newcastle, vacunación, desafío
ABSTRACT
The study evaluated the interference in the immune protection system against
Newcastle disease (ENC) caused by the vaccination against Avian Metapneumovirus
(aMPV) in a simultaneous vaccination against ENC and Infectious Bronchitis (BI) in one-
day-old broilers. Four hundred Cobb-Vantress 500 broilers were distributed into four
Rev Inv Vet Perú 2011; 22(1): 45-5246
V. Palomino et al...
groups. Group I vaccinated at 1-day-old against BI (H120), ENC (VG/GA) and aMPV (11/
94) with revaccination at day 9 against ENC (VG/GA). Group II vaccinated at 1-day-old
against BI (Ma5), ENC (C2) and aMPV (11/94) and revaccinated at day 9 against ENC
(Clone 30). Group III vaccinated at 1-day-old against BI and ENC (VG/GA) and
revaccinated at day 9 against ENC (VG/GA). Group IV received no vaccine. All groups
were challenged at day 30 with a velogenic viscerotropic strain of ENC virus. Mortality,
clinical signs, serologic response, post-vaccination reaction, and productive performan-
ce were evaluated. Mortality was 12 and 16% for groups vaccinated against aMPV
versus 23% for the non-vaccinated group against aMPV, and 88% for the control group;
however, no significant difference was found between the three vaccinated groups.
Findings indicate that vaccination against aMPV in broilers did not cause interference in
the protection against ENC in any of the vaccinated groups; besides, there was less
post-vaccination reaction with the enteric strain vaccine instead of a respiratory strain of
ENC.
Key words: Avian Metapneumovirus, Infectious Bronchitis, Newcastle Disease,
vaccination, challenge
INTRODUCCIÓN
El Síndrome de Cabeza Hinchada
(SCH) en pavos y pollos de carne es una
enfermedad de etiología multifactorial, en la
que intervienen Metapneumovirus aviar
(aMPV) y Escherichia coli. Reviste gran
importancia económica ya que limitan la ca-
pacidad del ave para convertir alimento en
carne. Fue observada por primera vez en
Sudáfrica en 1979 (Morley y Thompson,
1984). De allí se extendió a Europa y Améri-
ca del Sur, y en 1997 a USA. En el Perú, la
observación en campo de cuadros respirato-
rios acompañados por celulitis facial coinci-
dió con la importación de pollos beneficiados
procedentes de Francia en 1985. Además,
ha sido observado en lotes de aves
reproductoras y ponedoras comerciales
(Icochea, 2002).
La exposición al aMPV causa una in-
fección aguda del tracto respiratorio alto, ca-
racterizada por tos, descarga nasal y conjun-
tivitis; además, en pollos de carne se produ-
ce edema subcutáneo en la cabeza, cara y
debajo de la mandíbula, ocasionando una hin-
chazón de la cabeza con inflamación de
parpados y oclusión de ojos. Esta condición
se asocia frecuentemente a una infección se-
cundaria por E. coli, que es responsable del
material caseoso encontrado en el subcutá-
neo, oído medio y huesos craneanos, dando
lugar a una tortícolis. La morbilidad es cer-
cana al 10% y la mortalidad usualmente no
sobrepasa el 2% (Jones, 2002), aunque en
casos complicados con E. coli puede llegar
al 20% (Gross, 1994). No está demostrada la
transmisión vertical (Bennett et al., 2001),
pero se ha detectado ARN viral en la fisura
palatina de pavitos recién nacidos (Shin et
al., 2002); asimismo, las progenies provenien-
tes de reproductoras con brotes de aMPV
tienen mayor tendencia a la enfermedad que
progenies de reproductoras sanas (Villegas,
2009).
La prevención y control de la enferme-
dad están orientados a evitar la diseminación
del virus y el estrés de las aves, mejorando la
ventilación, reduciendo la densidad
poblacional, evitando fluctuaciones de tem-
peratura, implementando medidas de
bioseguridad y utilizando el sistema de crian-
za “Todo dentro, todo fuera”. Por tratarse de
una enfermedad viral, el tratamiento es para
evitar las infecciones secundarias ocasiona-
das principalmente por E. coli. Debido a la
importancia económica de la enfermedad, se
tiene que recurrir a la vacunación, aunque se
han descrito interferencias entre virus
47Rev Inv Vet Perú 2011; 22(1): 45-52
Interferencia de la vacunación contra tres virus respiratorios en broilers
vacunales respiratorios contra Bronquitis In-
fecciosa (BI) y la enfermedad de Newcastle
(ENC) con la de aMPV (Cook, 2001;
Ganapathy et al., 2006), de allí que algunos
autores recomiendan abstenerse de vacunar
pollos de carne contra aMPV (Jones, 2004).
En el 2006 entraron al mercado nuevas
vacunas vivas contra aMPV diseñadas para
pollos de carne que no producirían interferen-
cia con otros virus vacunales. El presente es-
tudio evaluó la interferencia en la protección
de la vacuna contra la enfermedad de
Newcastle y contra Metapneumovirus en un
programa de vacunación simultánea al primer
día de edad en pollos de carne.
MATERIALES Y MÉTODOS
Lugar de Estudio y Animales
El estudio se realizó en las instalaciones
de la unidad de experimentación del Labora-
torio de Patología Aviar de la Facultad de
Medicina Veterinaria de la Universidad Na-
cional Mayor de San Marcos (UNMSM),
Lima, durante los meses de abril a mayo de
2007. Se utilizaron 400 pollos de carne, mitad
machos y mitad hembras, de la línea Cobb-
Vantress 500. Las aves fueron criadas en
ambientes controlados, donde recibieron el
mismo tipo de alimento y agua ad libitum.
Las aves se distribuyeron en tres grupos de
tratamiento y un grupo control (Cuadro 1).
Reacción Post-vacunal
Desde el primer día de edad hasta el día
21 se registraron los signos clínicos de
estornudos, ronquera, y boqueo. La intensi-
dad de signos clínicos fue considerada como
Grado 0: aves normales; Grado 1: Reacción
ligera (tos); Grado 2: Reacción moderada (es-
tornudo); Grado 3: Reacción severa (ronque-
ra). El porcentaje de aves con signos clínicos
se clasificó como Grado 0: 0%; Grado 1: has-
ta 25%; Grado 2: entre 25 a 50%; Grado 3:
entre 50 a 75%; y Grado 4: entre 75 a 100%.
Evaluación Serológica
Se determinaron los niveles de
anticuerpos contra ENC, BI y aMPV me-
diante la prueba de ELISA con kits comer-
ciales (IDEXX Laboratories). Para esto, se
tomaron muestras de sangre a 10 aves por
grupo en los días 1, 30 y 45 de edad.
Anticuerpos contra BI y aMPV se determi-
naron únicamente en el día 45 de edad.
Parámetros Productivos
Se registró el consumo de alimento y el
peso corporal a todas las aves de cada gru-
po a los 7, 14, 21, 28, 35, 42 y 45 días de
edad. Se analizó el Índice de Conversión Ali-
menticia (ICA) y el Índice de Eficiencia Pro-
ductiva Europeo - IEP (Yvore, 1985). Ade-
más, se registró la mortalidad diaria y sema-
nal, determinándose la causa de muerte.
Análisis Estadístico
El peso corporal, consumo de alimento
y títulos de anticuerpos se analizaron median-
teelanálisisdevarianzaconarreglofactorial.
La tasa de mortalidad se analizó con la prue-
ba de Chi cuadrado.
RESULTADOS
Se presentaron dos tipos de curvas de
reacción post vacunal. Los grupos I y II mos-
traron dos picos de reacción en los días 7 y
12, y el grupo III un solo pico en el día 10
(Fig. 1), mientras que el grupo sin vacunar
no mostró signos respiratorios. Asimismo, el
Grupo II presentó signos respiratorios más
severos en el segundo pico de reacción
vacunal, llegando a afectarse hasta el 95%
de los pollos.
La mortalidad fue de 16.6, 20.0, 33.3 y
84.4% para los grupos I, II, III y IV, respec-
tivamente. No se encontró diferencias esta-
dísticas significativas en mortalidad por ENC
después del reto entre los grupos vacuna-
dos, pero sí entre los grupos vacunados y el
grupo control (p<0.05) (Cuadro 2).
Rev Inv Vet Perú 2011; 22(1): 45-5248
V. Palomino et al.
Cuadro 1. Esquema de vacunaciones en pollos de carne1
1er
día de edad Día 9 de edad
Grupo I
BI (cepa H120)
ENC (cepa VG/GA)
aMPV (cepa 11/94 origen pollo)
ENC (cepa VG/GA)
Grupo II
BI (cepa Ma5)
ENC (cepa C2 de tropismo respiratorio)
aMPV (cepa 11/94 origen pollo)
ENC (Clone 30)
Grupo III
contra IB (cepa H120)
ENC (cepa VG/GA) ENC (cepa VG/GA)
Grupo IV - - - -
1
Al día 30 de edad, todos los grupos fueron desafiados con una cepa velogénica viscerotrópica del
virus de Newcastle (vvENC) aislada en el Laboratorio de Patología Aviar - UNMSM
El promedio de títulos de anticuerpos
maternales para ENC al primer día de edad
fue de 5731, nulos en el 30, previo al desafío,
y en el día 45 fueron de 5321, 6629, 6435 y
69012 para los grupos I, II, III y IV, respecti-
vamente, sin encontrar diferencias estadísti-
cas significativas entre grupos (Cuadro 3).
La respuesta serológica para BI al día
45 mostró niveles muy bajos de anticuerpos
en todos los grupos, no habiendo diferencia
significativa entre grupos vacunados pero sí
entre los vacunados y el control (Cuadro 3).
Asimismo, los títulos para aMPV muestran
dos grupos serológicos, uno constituido por
los Grupos I, II y IV positivos y otro por el
Grupo III negativo a la prueba de ELISA
(Cuadro 3).
El peso corporal fue similar en todos
los grupos hasta el día 28. A los 5 días pos-
teriores al reto, las aves del grupo control
mostraron una disminución considerable de
peso en comparación con los grupos va-
cunados; sin embargo, al final del experimen-
to (45 días de edad), las aves sobrevivientes
Cuadro 2. Porcentaje de mortalidad y de síntomas nerviosos a los 45 días de edad en aves
vacunadas1
contra Bronquitis Infecciosa (BI), Enfermedad de Newcastle (ENC)
y Metapneumovirus (aMPV) al primer día de edad y desafiadas con cepa
velogénica viscerotrópica del virus de Newcastle a los 30 días de edad
Parámetro Grupo I Grupo II Grupo III
Grupo IV
(Control)
Muertas/total desafiadas 10/85 13/85 18/78 76/86
Mortalidad (%) 12a
16a
23a
88.4b
Tics nerviosos 2.4 3.5 1.3 2.3
Parálisis 0 0 0 9.3
a,b
Superíndices diferentes dentro de filas indican diferencia estadística (p<0.05)
1
Grupo I: vacunado contra BI (cepa H120), ENC (cepa VG/GA) y aMPV (cepa 11/94 origen pollo);
Grupo II: contra BI (cepa Ma5), ENC (cepa C2 de tropismo respiratorio) y aMPV (cepa 11/94
origen pollo); Grupo III: contra IB (cepa H120) y ENC (cepa VG/GA). Todos fueron revacunados
contra Newcastle al 9° día de edad.
49Rev Inv Vet Perú 2011; 22(1): 45-52
Interferencia de la vacunación contra tres virus respiratorios en broilers
Cuadro 3. Títulos de anticuerpos contra el virus de la ENC, BI y mPMV a los 45 días de
edad en pollos de carne vacunados al 1er
día de edad y revacunados contra
Newcastle a los 9 días de edad
Grupo I Grupo II Grupo III Grupo IV
PAT1
5616a
6738a
6601a
7258a
PGT2
5321a
6629a
6435a
6902aEnfermedad de
Newcastle
% CV 30.1 17.0 19.9 31.0
PAT 128ª 173ª 150ª 73b
PGT 24ª 112ª 106ª 4b
Bronquitis Infecciosa
% CV 175.3 71.1 80.4 270.8
PAT 4379a
5507a
97b
5691a
PGT 4253a
4512a
17b
4551ªMetapneumovirus
%CV 24.8 64.2 125.9 74.2
a,b
Superíndices diferentes dentro de filas indican diferencia estadística (p<0.05)
1
Promedio aritmético total
2
PGT: Promedio Geométrico Total
Cuadro 4. Peso corporal semanal en pollos de carne (gramos) vacunados al 1er
día de edad
contra ENC, BI y mPMV y revacunados contra Newcastle a los 9 días de edad
Edad Grupo I1
Grupo II Grupo III Grupo IV
Inicio 45.9a
47.3a
46.1a
46.7a
1º semana 162.6a
183.6b
166.3a
189.6b
2º semana 402.5ab
427.5bc
397.0a
450.1c
3º semana 791.6a
851.0bc
824.5ab
890.9c
4º semana 1310.3a
1356.4a
1335.8a
1365.8a
5º semana 1761.4a
1917.3b
1812.1ab
1672.0a
6° semana 2339.0a
2447.2a
2446.9a
2335.6a
45 días 2565.6a
2621.0a
2701.5a
2785.7a
a,b
Superíndices diferentes dentro de filas indican diferencia estadística (p<0.05)
1
Grupo I: vacunado contra BI (cepa H120), ENC (cepa VG/GA) y aMPV (cepa 11/94 origen pollo);
Grupo II: contra BI (cepa Ma5), ENC (cepa C2 de tropismo respiratorio) y aMPV (cepa 11/94 origen
pollo); Grupo III: contra IB (cepa H120) y ENC (cepa VG/GA). Todos fueron revacunados contra
Newcastle al 9° día de edad.
de este grupo presentaron un relativo mayor
peso corporal, aunque sin diferencias esta-
dísticas entre grupos (Cuadro 4). Las aves
del grupo I mostraron el mejor ICA y el me-
jor IEP (Cuadro 5).
DISCUSIÓN
Todos los grupos de aves vacunadas
presentaron reacciones respiratorias post-
vacunales de intensidad variable, lo cual tuvo
Rev Inv Vet Perú 2011; 22(1): 45-5250
V. Palomino et al.
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
1.4
1.6
1.8
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
Días de edad
Intensidad
I II III IV
Cuadro 5. Comportamiento productivo a los 45 días de edad en pollos de carne vacunados
al 1er
día de edad contra ENC, BI y mPMV y revacunados contra Newcastle a los
9 días de edad
Grupo1
Peso Final I.C.A.2
Viabilidad I.E.P.E.3
I 2.57 2.34 83.3 203.0
II 2.62 2.44 80.0 191.0
III 2.70 2.54 71.1 168.0
IV 2.79 10.58 15.6 9.1
1
Grupo I: vacunado contra BI (cepa H120), ENC (cepa VG/GA) y aMPV (cepa 11/94 origen pollo);
Grupo II: contra BI (cepa Ma5), ENC (cepa C2 de tropismo respiratorio) y aMPV (cepa 11/94 origen
pollo); Grupo III: contra IB (cepa H120) y ENC (cepa VG/GA). Todos fueron revacunados contra
Newcastle al 9° día de edad.
2
Índice de Conversión Alimenticia
3
Índice de Eficiencia Productivo Europeo
Figura 1. Grados de reacciones respiratorias audibles (estornudos y ronquera) en los primeros
21 días de edad en pollos de carne vacunados al primer día de edad contra Bronquitis
Infecciosa, Enfermedad de Newcastle y Metapneumovirus. Grupo I: contra BI
(cepa H120), ENC (cepa VG/GA) y aMPV (cepa 11/94 origen pollo); Grupo II:
contra BI (cepa Ma5), ENC (cepa C2 de tropismo respiratorio) y aMPV (cepa
11/94 origen pollo); Grupo III: contra IB (cepa H120) y ENC (cepa VG/GA).
Todos fueron revacunado al 9° día contra ENC.
relación con el programa vacunal y el tipo
de cepa usada en la vacuna contra ENC.
Los grupos I y II presentaron dos picos bien
diferenciados de reacciones respiratorias
audibles a los 7 y 12 días de edad. El primer
pico fue en reacción a la vacunación con
aMPV y el segundo, mucho más pronunciado
en el grupo II, fue debido a la revacunación
contra ENC (cepa respiratoria). Esto demues-
tra que cuando se usa en la vacunación simul-
tánea una cepa vacunal de ENC de tropismo
respiratorio se incrementa la severidad de las
51Rev Inv Vet Perú 2011; 22(1): 45-52
Interferencia de la vacunación contra tres virus respiratorios en broilers
reacciones respiratorias post vacunales. Los
grupos I y III, vacunados con cepa entérica
de ENC, tuvieron reacciones menos seve-
ras, consideradas como normales y consis-
tentes con el uso de vacunas menos invasivas.
La ausencia de un segundo pico en el grupo
II se debió a que no se vacunó contra aMPV.
La respuesta serológica de los grupos
fue de acuerdo a lo esperado. El primer día,
títulos altos para Newcastle debido a la in-
munidad pasiva proveniente de la madre y el
día 30 con títulos mínimos o nulos de
anticuerpos, lo cual está de acuerdo con el
silencio inmunológico demostrado en las aves
a esta edad (Davison et al., 2008). Al día 45,
los cuatro grupos experimentales mostraron
elevados títulos de anticuerpos contra el vi-
rus de la enfermedad de Newcastle como
consecuencia del desafío con el virus
velogénico.
La respuesta serológica humoral con-
tra el virus de la BI a los 45 días de edad fue
mínima, debido a que las aves recibieron solo
una vacuna viva al primer de edad. Aun cuan-
do los grupos vacunados fueron considera-
dos como seronegativos, el grupo control, no
vacunado, mostró el menor título y el mayor
coeficiente de variación (p<0.05).
Los resultados de la prueba de ELISA
para Metapneumovirus aviar a los 45 días de
edad en los grupos I, II y III estuvieron de
acuerdo con el programa de vacunación usa-
do. Los grupos I y II vacunados contra este
agente presentaron títulos altos, y el grupo
III no vacunado contra aMPV fue negativo;
sin embargo, los resultados del grupo IV con-
trol no vacunado resultaron controversiales,
ya que se obtuvo seroconversión con alto tí-
tulo contra el aMPV y elevado coeficiente
de variación, demostrando contaminación
horizontal del virus vacunal al final del expe-
rimento a partir de los grupos vacunados. La
transmisibilidad horizontal del virus ha sido
demostrada en otros estudios (Jones, 2002).
Las aves de todos los grupos mostraron
signos clínicos a partir del primer día del reto
con la cepa vvENC, inicialmente de tipo res
piratorio, luego digestivo (diarrea), y por últi-
mo nervioso, ocurriendo casos de mortalidad
a partir del 4º día post desafío. Estudios pre-
vios reportaron similares resultados (Alva,
2001).
No se encontró diferencia estadística en
el peso corporal entre grupos experimentales
previo al desafío. Posteriormente, el grupo
control, perdió peso pero logró desarrollar un
crecimiento compensatorio, el cual ha sido
demostrado en aves sobrevivientes a enfer-
medades con alta conversión alimenticia
(Jones, 2002).
La mejor conversión alimenticia fue
observada en los grupos I y II vacunados
contra aMPV, siendo el grupo I ligeramente
mejor que el grupo II debido al uso de una
vacuna de Newcastle con cepa entérica. El
grupo III mostró una conversión ligeramente
más deficiente que el grupo II, debido, pro-
bablemente, a un problema de mortalidad ini-
cial por onfalitis que afectó a las aves de este
grupo en la primera semana. El grupo con-
trol, no vacunado, mostró la peor conversión
alimenticia debido a los efectos de la enfer-
medad de Newcastle, especialmente por la
alta mortalidad ocasionada en este grupo
(88%).
El Grupo I tuvo un mejor desempeño
productivo y menor mortalidad, así como una
reacción post-vacunal más leve que el Grupo
II, debido al uso de la cepa vacunal entérica
de Newcastle, la cual habría dejado más cé-
lulas diana traqueales libres para los otros vi-
rus vacunales (Ganapathy et al., 2005, 2006).
El desempeño global de los grupos esti-
mado de acuerdo al IEP estuvo en relación
con la cantidad y severidad de los signos clí-
nicos ocasionados por el desafío con el virus
de la ENC. Todos los grupos vacunados mos-
traron protección sin diferencia significativa
frente al desafío con virus patógeno de ENC
al día 45; sin embargo, el grupo I, vacunado dos
vecesconunacepadeNewcastleenterotrópica
y aMPV con BI al primer día, mostró una
menor reacción post-vacunal, una menor
mortalidad y, numéricamente, mejor IEP.
Rev Inv Vet Perú 2011; 22(1): 45-5252
V. Palomino et al.
CONCLUSIONES
? La vacunación contra Metapneumovirus
Aviar (aMPV) en forma simultánea con-
tra la enfermedad de Newcastle (ENC)
y Bronquitis Infecciosa (BI) al primer día
de edad en pollos de carne no ocasionó
interferencia en la protección contra la
Enfermedad de Newcastle en ninguno
de los grupos vacunados.
? Se obtuvo menor reacción post vacunal
con la vacunación con cepa entérica del
virus de la Enfermedad de Newcastle
en comparación con el uso de la cepa de
tropismo respiratorio.
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14. Villegas P. 2009. Rol de los virus de
Bronquitis Infecciosa y Metapneumo-
virus Aviar en los problemas respirato-
rios de pollos de carne. Prevención y
control. En: V Seminario Internacional
Asociación de Médicos Veterinarios
EspecialistasenAves.Lima:AMEVEA.

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  • 1. 45 Rev Inv Vet Perú 2011; 22(1): 45-52 1 Laboratorio de Patología Aviar, 3 Laboratorio de Microbiología y Parasitología Veterinaria, Facul- tad de Medicina Veterinaria, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima 2 E-mail : eliana.icochea@gmail.com INTERFERENCIA DE LA VACUNACIÓN SIMULTÁNEA CONTRA METAPNEUMOVIRUS AVIAR, BRONQUITIS INFECCIOSA Y ENFERMEDAD DE NEWCASTLE EN POLLOS DE CARNE INTERFERENCE OF SIMULTANEOUS VACCINATION AGAINST AVIAN METAPNEUMOVIRUS, INFECTIOUS BRONCHITIS , AND NEWCASTLE DISEASE IN BROILERS Víctor Palomino T.1 , E. Icochea D.1,2 , John Guzmán G. 1 , Rosa Sam T.3 , Alberto Manchego S.3 RESUMEN El estudio evaluó la interferencia en la protección contra la enfermedad de Newcastle (ENC) ocasionada por la vacunación contra Metapneumovirus (aMPV) en un programa de vacunación simultánea al primer día de edad contra ENC y Bonquitis Infecciosa (BI) en pollos de carne. Se usaron 400 pollos de carne Cobb-Vantress 500 divididos en cuatro grupos. El grupo I vacunado al primer día contra BI (H120), ENC (VG/GA) y aMPV (11/94) y revacunado al día 9 contra ENC (VG/GA). El Grupo II vacunado al primer día contra BI (Ma5), ENC (C2) y aMPV (11/94) y, revacunado al día 9 contra ENC (Clone 30). El grupo III vacunado al primer día contra BI (H120) y ENC (VG/GA) y revacunado al día 9 contra ENC (VG/GA). El Grupo IV no fue vacunado. Todos los grupos fueron desafiados el día 30 con una cepa velogénica viscerotrópica del virus de ENC. Se valuó mortalidad, signos clínicos, respuesta serológica, reacción post vacunal y parámetros productivos. La mor- talidad fue de 12 y 16% para los grupos vacunados contra aMPV versus 23% para el grupo no vacunado contra aMPV, y 88% para el control sin vacunas; sin embargo, las diferencias entre los tres grupos vacunados no fueron significativas. Los resultados indican que la vacunación contra aMPV en pollos de carne no ocasionó interferencia en la protección contra la ENC en ninguno de los grupos vacunados simultáneamente con- tra la ENC, BI y aMPV al primer día de edad, y se vio menor reacción post vacunal usando la cepa entérica que con la cepa de tropismo respiratorio del virus de la ENC. Palabras clave: Metapneumovirus Aviar, Bronquitis Infecciosa, Enfermedad de Newcastle, vacunación, desafío ABSTRACT The study evaluated the interference in the immune protection system against Newcastle disease (ENC) caused by the vaccination against Avian Metapneumovirus (aMPV) in a simultaneous vaccination against ENC and Infectious Bronchitis (BI) in one- day-old broilers. Four hundred Cobb-Vantress 500 broilers were distributed into four
  • 2. Rev Inv Vet Perú 2011; 22(1): 45-5246 V. Palomino et al... groups. Group I vaccinated at 1-day-old against BI (H120), ENC (VG/GA) and aMPV (11/ 94) with revaccination at day 9 against ENC (VG/GA). Group II vaccinated at 1-day-old against BI (Ma5), ENC (C2) and aMPV (11/94) and revaccinated at day 9 against ENC (Clone 30). Group III vaccinated at 1-day-old against BI and ENC (VG/GA) and revaccinated at day 9 against ENC (VG/GA). Group IV received no vaccine. All groups were challenged at day 30 with a velogenic viscerotropic strain of ENC virus. Mortality, clinical signs, serologic response, post-vaccination reaction, and productive performan- ce were evaluated. Mortality was 12 and 16% for groups vaccinated against aMPV versus 23% for the non-vaccinated group against aMPV, and 88% for the control group; however, no significant difference was found between the three vaccinated groups. Findings indicate that vaccination against aMPV in broilers did not cause interference in the protection against ENC in any of the vaccinated groups; besides, there was less post-vaccination reaction with the enteric strain vaccine instead of a respiratory strain of ENC. Key words: Avian Metapneumovirus, Infectious Bronchitis, Newcastle Disease, vaccination, challenge INTRODUCCIÓN El Síndrome de Cabeza Hinchada (SCH) en pavos y pollos de carne es una enfermedad de etiología multifactorial, en la que intervienen Metapneumovirus aviar (aMPV) y Escherichia coli. Reviste gran importancia económica ya que limitan la ca- pacidad del ave para convertir alimento en carne. Fue observada por primera vez en Sudáfrica en 1979 (Morley y Thompson, 1984). De allí se extendió a Europa y Améri- ca del Sur, y en 1997 a USA. En el Perú, la observación en campo de cuadros respirato- rios acompañados por celulitis facial coinci- dió con la importación de pollos beneficiados procedentes de Francia en 1985. Además, ha sido observado en lotes de aves reproductoras y ponedoras comerciales (Icochea, 2002). La exposición al aMPV causa una in- fección aguda del tracto respiratorio alto, ca- racterizada por tos, descarga nasal y conjun- tivitis; además, en pollos de carne se produ- ce edema subcutáneo en la cabeza, cara y debajo de la mandíbula, ocasionando una hin- chazón de la cabeza con inflamación de parpados y oclusión de ojos. Esta condición se asocia frecuentemente a una infección se- cundaria por E. coli, que es responsable del material caseoso encontrado en el subcutá- neo, oído medio y huesos craneanos, dando lugar a una tortícolis. La morbilidad es cer- cana al 10% y la mortalidad usualmente no sobrepasa el 2% (Jones, 2002), aunque en casos complicados con E. coli puede llegar al 20% (Gross, 1994). No está demostrada la transmisión vertical (Bennett et al., 2001), pero se ha detectado ARN viral en la fisura palatina de pavitos recién nacidos (Shin et al., 2002); asimismo, las progenies provenien- tes de reproductoras con brotes de aMPV tienen mayor tendencia a la enfermedad que progenies de reproductoras sanas (Villegas, 2009). La prevención y control de la enferme- dad están orientados a evitar la diseminación del virus y el estrés de las aves, mejorando la ventilación, reduciendo la densidad poblacional, evitando fluctuaciones de tem- peratura, implementando medidas de bioseguridad y utilizando el sistema de crian- za “Todo dentro, todo fuera”. Por tratarse de una enfermedad viral, el tratamiento es para evitar las infecciones secundarias ocasiona- das principalmente por E. coli. Debido a la importancia económica de la enfermedad, se tiene que recurrir a la vacunación, aunque se han descrito interferencias entre virus
  • 3. 47Rev Inv Vet Perú 2011; 22(1): 45-52 Interferencia de la vacunación contra tres virus respiratorios en broilers vacunales respiratorios contra Bronquitis In- fecciosa (BI) y la enfermedad de Newcastle (ENC) con la de aMPV (Cook, 2001; Ganapathy et al., 2006), de allí que algunos autores recomiendan abstenerse de vacunar pollos de carne contra aMPV (Jones, 2004). En el 2006 entraron al mercado nuevas vacunas vivas contra aMPV diseñadas para pollos de carne que no producirían interferen- cia con otros virus vacunales. El presente es- tudio evaluó la interferencia en la protección de la vacuna contra la enfermedad de Newcastle y contra Metapneumovirus en un programa de vacunación simultánea al primer día de edad en pollos de carne. MATERIALES Y MÉTODOS Lugar de Estudio y Animales El estudio se realizó en las instalaciones de la unidad de experimentación del Labora- torio de Patología Aviar de la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Na- cional Mayor de San Marcos (UNMSM), Lima, durante los meses de abril a mayo de 2007. Se utilizaron 400 pollos de carne, mitad machos y mitad hembras, de la línea Cobb- Vantress 500. Las aves fueron criadas en ambientes controlados, donde recibieron el mismo tipo de alimento y agua ad libitum. Las aves se distribuyeron en tres grupos de tratamiento y un grupo control (Cuadro 1). Reacción Post-vacunal Desde el primer día de edad hasta el día 21 se registraron los signos clínicos de estornudos, ronquera, y boqueo. La intensi- dad de signos clínicos fue considerada como Grado 0: aves normales; Grado 1: Reacción ligera (tos); Grado 2: Reacción moderada (es- tornudo); Grado 3: Reacción severa (ronque- ra). El porcentaje de aves con signos clínicos se clasificó como Grado 0: 0%; Grado 1: has- ta 25%; Grado 2: entre 25 a 50%; Grado 3: entre 50 a 75%; y Grado 4: entre 75 a 100%. Evaluación Serológica Se determinaron los niveles de anticuerpos contra ENC, BI y aMPV me- diante la prueba de ELISA con kits comer- ciales (IDEXX Laboratories). Para esto, se tomaron muestras de sangre a 10 aves por grupo en los días 1, 30 y 45 de edad. Anticuerpos contra BI y aMPV se determi- naron únicamente en el día 45 de edad. Parámetros Productivos Se registró el consumo de alimento y el peso corporal a todas las aves de cada gru- po a los 7, 14, 21, 28, 35, 42 y 45 días de edad. Se analizó el Índice de Conversión Ali- menticia (ICA) y el Índice de Eficiencia Pro- ductiva Europeo - IEP (Yvore, 1985). Ade- más, se registró la mortalidad diaria y sema- nal, determinándose la causa de muerte. Análisis Estadístico El peso corporal, consumo de alimento y títulos de anticuerpos se analizaron median- teelanálisisdevarianzaconarreglofactorial. La tasa de mortalidad se analizó con la prue- ba de Chi cuadrado. RESULTADOS Se presentaron dos tipos de curvas de reacción post vacunal. Los grupos I y II mos- traron dos picos de reacción en los días 7 y 12, y el grupo III un solo pico en el día 10 (Fig. 1), mientras que el grupo sin vacunar no mostró signos respiratorios. Asimismo, el Grupo II presentó signos respiratorios más severos en el segundo pico de reacción vacunal, llegando a afectarse hasta el 95% de los pollos. La mortalidad fue de 16.6, 20.0, 33.3 y 84.4% para los grupos I, II, III y IV, respec- tivamente. No se encontró diferencias esta- dísticas significativas en mortalidad por ENC después del reto entre los grupos vacuna- dos, pero sí entre los grupos vacunados y el grupo control (p<0.05) (Cuadro 2).
  • 4. Rev Inv Vet Perú 2011; 22(1): 45-5248 V. Palomino et al. Cuadro 1. Esquema de vacunaciones en pollos de carne1 1er día de edad Día 9 de edad Grupo I BI (cepa H120) ENC (cepa VG/GA) aMPV (cepa 11/94 origen pollo) ENC (cepa VG/GA) Grupo II BI (cepa Ma5) ENC (cepa C2 de tropismo respiratorio) aMPV (cepa 11/94 origen pollo) ENC (Clone 30) Grupo III contra IB (cepa H120) ENC (cepa VG/GA) ENC (cepa VG/GA) Grupo IV - - - - 1 Al día 30 de edad, todos los grupos fueron desafiados con una cepa velogénica viscerotrópica del virus de Newcastle (vvENC) aislada en el Laboratorio de Patología Aviar - UNMSM El promedio de títulos de anticuerpos maternales para ENC al primer día de edad fue de 5731, nulos en el 30, previo al desafío, y en el día 45 fueron de 5321, 6629, 6435 y 69012 para los grupos I, II, III y IV, respecti- vamente, sin encontrar diferencias estadísti- cas significativas entre grupos (Cuadro 3). La respuesta serológica para BI al día 45 mostró niveles muy bajos de anticuerpos en todos los grupos, no habiendo diferencia significativa entre grupos vacunados pero sí entre los vacunados y el control (Cuadro 3). Asimismo, los títulos para aMPV muestran dos grupos serológicos, uno constituido por los Grupos I, II y IV positivos y otro por el Grupo III negativo a la prueba de ELISA (Cuadro 3). El peso corporal fue similar en todos los grupos hasta el día 28. A los 5 días pos- teriores al reto, las aves del grupo control mostraron una disminución considerable de peso en comparación con los grupos va- cunados; sin embargo, al final del experimen- to (45 días de edad), las aves sobrevivientes Cuadro 2. Porcentaje de mortalidad y de síntomas nerviosos a los 45 días de edad en aves vacunadas1 contra Bronquitis Infecciosa (BI), Enfermedad de Newcastle (ENC) y Metapneumovirus (aMPV) al primer día de edad y desafiadas con cepa velogénica viscerotrópica del virus de Newcastle a los 30 días de edad Parámetro Grupo I Grupo II Grupo III Grupo IV (Control) Muertas/total desafiadas 10/85 13/85 18/78 76/86 Mortalidad (%) 12a 16a 23a 88.4b Tics nerviosos 2.4 3.5 1.3 2.3 Parálisis 0 0 0 9.3 a,b Superíndices diferentes dentro de filas indican diferencia estadística (p<0.05) 1 Grupo I: vacunado contra BI (cepa H120), ENC (cepa VG/GA) y aMPV (cepa 11/94 origen pollo); Grupo II: contra BI (cepa Ma5), ENC (cepa C2 de tropismo respiratorio) y aMPV (cepa 11/94 origen pollo); Grupo III: contra IB (cepa H120) y ENC (cepa VG/GA). Todos fueron revacunados contra Newcastle al 9° día de edad.
  • 5. 49Rev Inv Vet Perú 2011; 22(1): 45-52 Interferencia de la vacunación contra tres virus respiratorios en broilers Cuadro 3. Títulos de anticuerpos contra el virus de la ENC, BI y mPMV a los 45 días de edad en pollos de carne vacunados al 1er día de edad y revacunados contra Newcastle a los 9 días de edad Grupo I Grupo II Grupo III Grupo IV PAT1 5616a 6738a 6601a 7258a PGT2 5321a 6629a 6435a 6902aEnfermedad de Newcastle % CV 30.1 17.0 19.9 31.0 PAT 128ª 173ª 150ª 73b PGT 24ª 112ª 106ª 4b Bronquitis Infecciosa % CV 175.3 71.1 80.4 270.8 PAT 4379a 5507a 97b 5691a PGT 4253a 4512a 17b 4551ªMetapneumovirus %CV 24.8 64.2 125.9 74.2 a,b Superíndices diferentes dentro de filas indican diferencia estadística (p<0.05) 1 Promedio aritmético total 2 PGT: Promedio Geométrico Total Cuadro 4. Peso corporal semanal en pollos de carne (gramos) vacunados al 1er día de edad contra ENC, BI y mPMV y revacunados contra Newcastle a los 9 días de edad Edad Grupo I1 Grupo II Grupo III Grupo IV Inicio 45.9a 47.3a 46.1a 46.7a 1º semana 162.6a 183.6b 166.3a 189.6b 2º semana 402.5ab 427.5bc 397.0a 450.1c 3º semana 791.6a 851.0bc 824.5ab 890.9c 4º semana 1310.3a 1356.4a 1335.8a 1365.8a 5º semana 1761.4a 1917.3b 1812.1ab 1672.0a 6° semana 2339.0a 2447.2a 2446.9a 2335.6a 45 días 2565.6a 2621.0a 2701.5a 2785.7a a,b Superíndices diferentes dentro de filas indican diferencia estadística (p<0.05) 1 Grupo I: vacunado contra BI (cepa H120), ENC (cepa VG/GA) y aMPV (cepa 11/94 origen pollo); Grupo II: contra BI (cepa Ma5), ENC (cepa C2 de tropismo respiratorio) y aMPV (cepa 11/94 origen pollo); Grupo III: contra IB (cepa H120) y ENC (cepa VG/GA). Todos fueron revacunados contra Newcastle al 9° día de edad. de este grupo presentaron un relativo mayor peso corporal, aunque sin diferencias esta- dísticas entre grupos (Cuadro 4). Las aves del grupo I mostraron el mejor ICA y el me- jor IEP (Cuadro 5). DISCUSIÓN Todos los grupos de aves vacunadas presentaron reacciones respiratorias post- vacunales de intensidad variable, lo cual tuvo
  • 6. Rev Inv Vet Perú 2011; 22(1): 45-5250 V. Palomino et al. 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6 1.8 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 Días de edad Intensidad I II III IV Cuadro 5. Comportamiento productivo a los 45 días de edad en pollos de carne vacunados al 1er día de edad contra ENC, BI y mPMV y revacunados contra Newcastle a los 9 días de edad Grupo1 Peso Final I.C.A.2 Viabilidad I.E.P.E.3 I 2.57 2.34 83.3 203.0 II 2.62 2.44 80.0 191.0 III 2.70 2.54 71.1 168.0 IV 2.79 10.58 15.6 9.1 1 Grupo I: vacunado contra BI (cepa H120), ENC (cepa VG/GA) y aMPV (cepa 11/94 origen pollo); Grupo II: contra BI (cepa Ma5), ENC (cepa C2 de tropismo respiratorio) y aMPV (cepa 11/94 origen pollo); Grupo III: contra IB (cepa H120) y ENC (cepa VG/GA). Todos fueron revacunados contra Newcastle al 9° día de edad. 2 Índice de Conversión Alimenticia 3 Índice de Eficiencia Productivo Europeo Figura 1. Grados de reacciones respiratorias audibles (estornudos y ronquera) en los primeros 21 días de edad en pollos de carne vacunados al primer día de edad contra Bronquitis Infecciosa, Enfermedad de Newcastle y Metapneumovirus. Grupo I: contra BI (cepa H120), ENC (cepa VG/GA) y aMPV (cepa 11/94 origen pollo); Grupo II: contra BI (cepa Ma5), ENC (cepa C2 de tropismo respiratorio) y aMPV (cepa 11/94 origen pollo); Grupo III: contra IB (cepa H120) y ENC (cepa VG/GA). Todos fueron revacunado al 9° día contra ENC. relación con el programa vacunal y el tipo de cepa usada en la vacuna contra ENC. Los grupos I y II presentaron dos picos bien diferenciados de reacciones respiratorias audibles a los 7 y 12 días de edad. El primer pico fue en reacción a la vacunación con aMPV y el segundo, mucho más pronunciado en el grupo II, fue debido a la revacunación contra ENC (cepa respiratoria). Esto demues- tra que cuando se usa en la vacunación simul- tánea una cepa vacunal de ENC de tropismo respiratorio se incrementa la severidad de las
  • 7. 51Rev Inv Vet Perú 2011; 22(1): 45-52 Interferencia de la vacunación contra tres virus respiratorios en broilers reacciones respiratorias post vacunales. Los grupos I y III, vacunados con cepa entérica de ENC, tuvieron reacciones menos seve- ras, consideradas como normales y consis- tentes con el uso de vacunas menos invasivas. La ausencia de un segundo pico en el grupo II se debió a que no se vacunó contra aMPV. La respuesta serológica de los grupos fue de acuerdo a lo esperado. El primer día, títulos altos para Newcastle debido a la in- munidad pasiva proveniente de la madre y el día 30 con títulos mínimos o nulos de anticuerpos, lo cual está de acuerdo con el silencio inmunológico demostrado en las aves a esta edad (Davison et al., 2008). Al día 45, los cuatro grupos experimentales mostraron elevados títulos de anticuerpos contra el vi- rus de la enfermedad de Newcastle como consecuencia del desafío con el virus velogénico. La respuesta serológica humoral con- tra el virus de la BI a los 45 días de edad fue mínima, debido a que las aves recibieron solo una vacuna viva al primer de edad. Aun cuan- do los grupos vacunados fueron considera- dos como seronegativos, el grupo control, no vacunado, mostró el menor título y el mayor coeficiente de variación (p<0.05). Los resultados de la prueba de ELISA para Metapneumovirus aviar a los 45 días de edad en los grupos I, II y III estuvieron de acuerdo con el programa de vacunación usa- do. Los grupos I y II vacunados contra este agente presentaron títulos altos, y el grupo III no vacunado contra aMPV fue negativo; sin embargo, los resultados del grupo IV con- trol no vacunado resultaron controversiales, ya que se obtuvo seroconversión con alto tí- tulo contra el aMPV y elevado coeficiente de variación, demostrando contaminación horizontal del virus vacunal al final del expe- rimento a partir de los grupos vacunados. La transmisibilidad horizontal del virus ha sido demostrada en otros estudios (Jones, 2002). Las aves de todos los grupos mostraron signos clínicos a partir del primer día del reto con la cepa vvENC, inicialmente de tipo res piratorio, luego digestivo (diarrea), y por últi- mo nervioso, ocurriendo casos de mortalidad a partir del 4º día post desafío. Estudios pre- vios reportaron similares resultados (Alva, 2001). No se encontró diferencia estadística en el peso corporal entre grupos experimentales previo al desafío. Posteriormente, el grupo control, perdió peso pero logró desarrollar un crecimiento compensatorio, el cual ha sido demostrado en aves sobrevivientes a enfer- medades con alta conversión alimenticia (Jones, 2002). La mejor conversión alimenticia fue observada en los grupos I y II vacunados contra aMPV, siendo el grupo I ligeramente mejor que el grupo II debido al uso de una vacuna de Newcastle con cepa entérica. El grupo III mostró una conversión ligeramente más deficiente que el grupo II, debido, pro- bablemente, a un problema de mortalidad ini- cial por onfalitis que afectó a las aves de este grupo en la primera semana. El grupo con- trol, no vacunado, mostró la peor conversión alimenticia debido a los efectos de la enfer- medad de Newcastle, especialmente por la alta mortalidad ocasionada en este grupo (88%). El Grupo I tuvo un mejor desempeño productivo y menor mortalidad, así como una reacción post-vacunal más leve que el Grupo II, debido al uso de la cepa vacunal entérica de Newcastle, la cual habría dejado más cé- lulas diana traqueales libres para los otros vi- rus vacunales (Ganapathy et al., 2005, 2006). El desempeño global de los grupos esti- mado de acuerdo al IEP estuvo en relación con la cantidad y severidad de los signos clí- nicos ocasionados por el desafío con el virus de la ENC. Todos los grupos vacunados mos- traron protección sin diferencia significativa frente al desafío con virus patógeno de ENC al día 45; sin embargo, el grupo I, vacunado dos vecesconunacepadeNewcastleenterotrópica y aMPV con BI al primer día, mostró una menor reacción post-vacunal, una menor mortalidad y, numéricamente, mejor IEP.
  • 8. Rev Inv Vet Perú 2011; 22(1): 45-5252 V. Palomino et al. CONCLUSIONES ? La vacunación contra Metapneumovirus Aviar (aMPV) en forma simultánea con- tra la enfermedad de Newcastle (ENC) y Bronquitis Infecciosa (BI) al primer día de edad en pollos de carne no ocasionó interferencia en la protección contra la Enfermedad de Newcastle en ninguno de los grupos vacunados. ? Se obtuvo menor reacción post vacunal con la vacunación con cepa entérica del virus de la Enfermedad de Newcastle en comparación con el uso de la cepa de tropismo respiratorio. LITERATURA CITADA 1. Alva B. 2001. Newcastle velogénico, siempre un tema de actualidad. En: Me- morias XXIV Reunión Científica Anual de la Asociación Peruana de Producción Animal. Lima, Perú: APPA. 2. Bennett RS, Nezworski J, Velayudhan BT, Nagaraja KV, Zeman DH, Dyer N, Graham T, Lauer DC, Nenga MK, Halvorson DA. 2001.Evidence of avian pneumovirus spread beyond Minnesota among wild and domestic birds in cen- tral North America. Avian Dis 48: 902- 908. 3. Cook JK. 2001. Infectious bronchitis vi- rus vaccine interferes with the replication of avian Metapneumovirus vaccine in domesticfowl.AvianPathol30:233-242. 4. Davison F, Kaspers B, Schat KA. 2008. Avian immunology. London: Academic Press. 481 p. 5. Ganapathy K, Cargill P, Montiel E, Jones RC. 2006. Interaction between live avian Metapneumovirus and Newcastle disease virus vaccines in specific pathogen free chickens. Avian Pathol 34: 297-302. 6. Ganapathy K, Todd V, Cargill P, Montiel E, Jones RC. 2006 Interaction between a live avian Metapneumovirus vaccine and two different Newcastle disease virus vaccines in broiler chickens with mater- nal antibodies to Newcastle disease vi- rus. Avian Pathol 35: 429-434. 7. Gross WB. 1994. Disease due to Escherichia coli in poultry. In: Escherichia coli in domestic animals and humans. Gyles CL (ed). Wallingford, United Kingdom: CAB Internacional. p 237-259. 8. Icochea E. 2002. Infección por Pneumovirus aviar. En: Memorias I Se- minario Asociación de Médicos Veteri- narios Especialistas en Aves. Lima, Perú: AMEVEA. 9. Yvore P. 1985. The use of shuttle programs for the control of coccidiosis in broilers. Proc. Gerogia Coccidiosis Conf. Georgia, USA. 10. Jones RC. 2002. Infección por Pneumovirus aviar en pollos de engorde y ponedoras. X Congreso de Patología Aviar. Athens, Georgia, EEUU. 11. Jones RC. 2004. Avian Metapneu- movirus infections in chickens and turkeys. En: Memorias II Seminario In- ternacional Asociación de Médicos Ve- terinarios Especialistas en Aves. Lima, Perú: AMEVEA. 12. Morley AJ, Thompson DK. 1984. Swollen head syndrome in broiler chickens. Avian Dis 28: 238-243. 13. Shin HJ, Jirjis FF, Kumar MC, Njenga MK, Shaw DP, Noll SL, Nagaraja KV, Halvorson DA. 2002. Neonatal avian pneumovirus infection in commercial turkeys. Avian Dis 46: 239- 244. 14. Villegas P. 2009. Rol de los virus de Bronquitis Infecciosa y Metapneumo- virus Aviar en los problemas respirato- rios de pollos de carne. Prevención y control. En: V Seminario Internacional Asociación de Médicos Veterinarios EspecialistasenAves.Lima:AMEVEA.