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Manuela Mosquera Castellanos
III Semestre
Medicina
Universidad Pontificia Bolivariana
2
INTRODUCTION
ABO system
*4 common categories A, B, AB, and O.
*Antigens are glycoproteins.
*The specificity is conferred by a sugar,
which may or may not be added
depending on whether the person has
the enzyme that catalyzes the reaction.
3
HLA system
Human leukocyte antigen
*It is involved in immune recognition and signaling
between cells of the immune system.
*On the surface of the cells.
*Presentation to the TCR in T lymphocytes.
Kidney Transplant
*Patients with end-stage renal disease.
*Sensitization due to pregnancy, blood transfusions and
previous transplants.
*Desensitization:
Remove anti HLA antibodies.
Reduction of circulating anti-A/B antibody levels.
T CELL
OBJECTIVE
Develop ATechnique For
Detection of Intragraft
Anti-Blood Group A and B
Antibodies Following
RenalTransplantation
MATERIALESY MÉTODOS
Identificar proteínas específicas en una
muestra.
-Separación: ELECTROFORESIS
-Transferencia.
-Visualización.
5
Determinar la presencia de antígenos
A y B en complejo con la PLVAP, por
medio de Anti A, Anti B y Anti PLVAP
en el lisado de aloinjerto de personas
con tipo de sangre A, O y B.
FUNDAMENTO ¿PARA QUÉ?
WESTERN BLOT
HISTOPATOLOGÍA
6
Uso de anticuerpos para
determinar si hay antígenos
en una muestra de tejido.
El anticuerpo va unido a una
enzima o tinte que se activa
cuando el anticuerpo entra
en contacto con el antígeno.
INMUNOHISTOQUÍMICA
Extracción de tejido de
alguna parte del cuerpo
para examinar en el mismo
la presencia de una
enfermedad.
BIOPSIA
Anatomía microscópica
que identifica las células.
Estudia la composición,
estructura y características
de los tejidos de los seres
vivos.
HISTOLOGÍA
Componentes
MATERIALESY MÉTODOS
Busca diagnosticar enfermedades a
través del estudio y análisis de los
tejidos junto con sus características
macroscópicas y microscópicas.
7
Localizar en las muestras del
aloinjerto renal los antígenos A y B,
junto con la PLVAP, por medio de
anticuerpos Anti-A,Anti-B y Anti-
PLVAP.
FUNDAMENTO ¿PARA QUÉ?
HISTOPATOLOGÍA
MATERIALESY MÉTODOS
PLVAP = proteína asociada a
vesículas del plasmalema.
Perlas recubiertas del anticuerpo
de interés.
8
Capturar complejos antígeno –
PLVAP para detectarse
posteriormente con análisis
Luminex.
FUNDAMENTO ¿PARA QUÉ?
Perlas PLVAP
RESULTADOS
RESULTADOS
AUTHOR CONCEPT YES OR NOT
Tasaki M, et al. Among various molecules, PLVAP, Band III,
andVW were considered as candidate carrier
proteins.
Tanaka H, et al. Originally, the ICFA technique was developed
to detect HLA-DSA and HLA complexes.
BacheletT, et al. Like HLA-DSA, it is possible that serum ABO-
DSA does not truly reflect the status ofAMR.
DISCUSSION
CONCLUSIONS
The study provides a new technique to
determine the presence and reaction of
antigen-antibody by introducing PLVAP to
the ICFA method. A correct determination
of this is essential to avoid renal rejection
and therefore preserve the proper
functioning of the entire organism.
12
1 Molecular biology in research allows to
determine interactions between different
components of living beings, in this case it
helps to understand why there is rejection
in transplants and why a compatibility of
small cellular components is needed.
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  • 1. Manuela Mosquera Castellanos III Semestre Medicina Universidad Pontificia Bolivariana
  • 2. 2 INTRODUCTION ABO system *4 common categories A, B, AB, and O. *Antigens are glycoproteins. *The specificity is conferred by a sugar, which may or may not be added depending on whether the person has the enzyme that catalyzes the reaction.
  • 3. 3 HLA system Human leukocyte antigen *It is involved in immune recognition and signaling between cells of the immune system. *On the surface of the cells. *Presentation to the TCR in T lymphocytes. Kidney Transplant *Patients with end-stage renal disease. *Sensitization due to pregnancy, blood transfusions and previous transplants. *Desensitization: Remove anti HLA antibodies. Reduction of circulating anti-A/B antibody levels. T CELL
  • 4. OBJECTIVE Develop ATechnique For Detection of Intragraft Anti-Blood Group A and B Antibodies Following RenalTransplantation
  • 5. MATERIALESY MÉTODOS Identificar proteínas específicas en una muestra. -Separación: ELECTROFORESIS -Transferencia. -Visualización. 5 Determinar la presencia de antígenos A y B en complejo con la PLVAP, por medio de Anti A, Anti B y Anti PLVAP en el lisado de aloinjerto de personas con tipo de sangre A, O y B. FUNDAMENTO ¿PARA QUÉ? WESTERN BLOT
  • 6. HISTOPATOLOGÍA 6 Uso de anticuerpos para determinar si hay antígenos en una muestra de tejido. El anticuerpo va unido a una enzima o tinte que se activa cuando el anticuerpo entra en contacto con el antígeno. INMUNOHISTOQUÍMICA Extracción de tejido de alguna parte del cuerpo para examinar en el mismo la presencia de una enfermedad. BIOPSIA Anatomía microscópica que identifica las células. Estudia la composición, estructura y características de los tejidos de los seres vivos. HISTOLOGÍA Componentes
  • 7. MATERIALESY MÉTODOS Busca diagnosticar enfermedades a través del estudio y análisis de los tejidos junto con sus características macroscópicas y microscópicas. 7 Localizar en las muestras del aloinjerto renal los antígenos A y B, junto con la PLVAP, por medio de anticuerpos Anti-A,Anti-B y Anti- PLVAP. FUNDAMENTO ¿PARA QUÉ? HISTOPATOLOGÍA
  • 8. MATERIALESY MÉTODOS PLVAP = proteína asociada a vesículas del plasmalema. Perlas recubiertas del anticuerpo de interés. 8 Capturar complejos antígeno – PLVAP para detectarse posteriormente con análisis Luminex. FUNDAMENTO ¿PARA QUÉ? Perlas PLVAP
  • 11. AUTHOR CONCEPT YES OR NOT Tasaki M, et al. Among various molecules, PLVAP, Band III, andVW were considered as candidate carrier proteins. Tanaka H, et al. Originally, the ICFA technique was developed to detect HLA-DSA and HLA complexes. BacheletT, et al. Like HLA-DSA, it is possible that serum ABO- DSA does not truly reflect the status ofAMR. DISCUSSION
  • 12. CONCLUSIONS The study provides a new technique to determine the presence and reaction of antigen-antibody by introducing PLVAP to the ICFA method. A correct determination of this is essential to avoid renal rejection and therefore preserve the proper functioning of the entire organism. 12 1 Molecular biology in research allows to determine interactions between different components of living beings, in this case it helps to understand why there is rejection in transplants and why a compatibility of small cellular components is needed. 2
  • 13. 13