1) El documento describe la microbiología de las heridas, incluyendo la flora residente y transitoria comúnmente encontrada, así como factores de riesgo para infección. 2) Explica los conceptos de contaminación, colonización e infección y métodos para la toma de muestras de heridas incluyendo hisopado, biopsia cuantitativa y aspirado con aguja. 3) Resalta que la sensibilidad a antibióticos de bacterias aisladas de heridas diabéticas es baja y recomienda antibióticos como
3. Flora residente
El cuerpo humano no es estéril
Existen bacterias en la piel y en las capas mas profundas (aeróbicas y
anaeróbicas)
Características generales:
o Constante
o Baja patogenicidad
o No se asocian a infecciones
o Su composición
depende del sitio anatómico
Aburto I. Microbiología de las heridas y toma de cultivo. Medwave 2011;11(01). doi: 10.5867/medwave.2011.01.4839
Aerobios Anaerobios
S. coagulasa (-)
S. epidermidis
S. hominis
Peptostreptococcus
Difteroides
Corynobacterium
sp.
Propionibacterium
acnes
Micrococcus sp. Clostridium sp.
Streptococcus
viridans
4. o Sin embargo, la diversidad microbiana no se limita a las
bacterias; los hongos también tienen papeles importantes en la
estabilidad de la comunidad microbiana, la salud humana y la
enfermedad (Peleg et al.,2010)
o El cuerpo humano tiene unas 10 veces mas células de microbios
que de células humanas.
o La piel protege a los seres humanos de la invasión por
microorganismos patógenos y proporciona un hogar para la diversa
microbiota comensal. (Marples,2012)
Microbial Ecology in States of Health and Disease: Workshop Summary (2014)
5. Flora transitoria
Aburto I. Microbiología de las heridas y toma de cultivo. Medwave 2011;11(01). doi: 10.5867/medwave.2011.01.4839
• Microorganismos no patógenos o parcialmente
patógenos, que habitan la piel o la mucosa durante
horas, días o semanas
• Se adquiere del ambiente y no produce enfermedad.
• Si la flora residente se altera, los microorganismos
transitorios pueden colonizarse, proliferarse y producir
enfermedad.
6. Colonización Infección
Es la presencia y/o
multiplicación de
microorganismos
patógenos sin
respuesta clínica
y/o
inmunológica
es la presencia y/o
multiplicación de
microorganismos
con respuesta
clínica y/o
inmunológica.
TRANSITORIA Y NO INVASIVA
Aburto I. Microbiología de las heridas y toma de cultivo. Medwave 2011;11(01). doi: 10.5867/medwave.2011.01.4839
Tejido
subcutáneo
caldo de cultivo
Diferencia entre colonización e infección
7. CONTAMINACIÓN-
COLONIZACIÓN
• Contaminación: contiene
microorganismos que no
se multiplican y suelen ser
colonizadores habituales de
la piel.
– El proceso de cicatrización
no se encuentra
amenazado.
• Colonización: presencia y
multiplicación de
microorganismos sin que
generen sintomatología
clínica ni signos
específicos de infección.
8. COLONIZACIÓN-
INFECCIÓN
• Colonización crítica:
carga bacteriana elevada
con microorganismos en
proceso de multiplicación
que interfieren en el
proceso de cicatrización, sin
signos clínicos de infección.
• Infección: contiene una
elevada carga bacteriana
(>105 unidades formadoras
de colonias por gramo de
tejido).
9. Existe en piel de manera natural una flora saprofita; las heridas
crónicas también poseen estos microorganismos habituales de la
piel, sin embargo, no son indicadores de que la herida este
infectada.
Los signos clínicos de infección más fiables:
• Enlentecimiento en la cicatrización.
• Aumento del exudado y del mal olor.
• Fragilidad del tejido de granulación.
• Sangrado fácil.
• Cavitaciones y/ o fistulizaciones en el lecho de la lesión.
• Erosiones y heridas en tejido neoformado.
• Aparición de hipergranulación y/o biopelícula.
10. Aun sin mostrar clínica las bacterias retrasan la cicatrización:
11. Las heridas crónicas ofrecen un nicho ecológico ideal para la
proliferación microbiana, por la pérdida de integridad cutánea, hipoxia
tisular y por contaminación directa de la lesión expuesta. La infección
en este tipo de heridas suele ser de tipo polimicrobiana.
12. La cantidad de
bacterias presentes
necesarias para
producir una IHQ es
de 105
microorganismos
por gramo de
tejido.
13. Asociación tridimensional de
células bacterianas en estrecho
contacto entre ellas formando una
matriz extracelular producida por
ellas mismas.
Esta matriz extracelular está
compuesta por exopolisacáridos,
proteínas, ácidos nucleicos y otras
macromoléculas.
Constituye una barrera protectora
para la bacteria ya que le permite
sobrevivir en ambientes hostiles y
durante una infección.
14.
15. *El pie diabético aparecerá en
más de 25% de los pacientes
*50% de estos pacientes sufrirá de
infección
*20% de ellos requerirá
amputación
-Estudio transversal con pacientes ingresados
al Hospital Central del Estado con diagnóstico
de pie diabético infectado entre enero 2015 y
julio 2016.
-Se incluyeron 102 pacientes
Sáenz-Talavera R y cols. Frecuencia bacteriana y sensibilidad antibiótica in vitro en pie diabético. Rev Mex Angiol 2017; 45(2): 57-63
17. La sensibilidad antibiótica para Gram positivas comparadas
con la terapia empírica (ciprofloxacino y clindamicina) fue
baja.
La mayoría de las bacterias Gram positivas fueron sensibles
a moxifloxacino, vancomicina, linezolid y tigeciclina
La sensibilidad antibiótica para las Gram negativas
comparada con la terapia empírica inicial basada en
ceftriaxona o ciprofloxacino fueron sensibles a tigeciclina,
ertapemen, meropenem y gentamicina
Sáenz-Talavera R y cols. Frecuencia bacteriana y sensibilidad antibiótica in vitro en pie diabético. Rev Mex Angiol 2017; 45(2): 57-63
18.
19. E.COLI BLEE 34%
P. AERUGINOSA 30%
P. AERUGINOSA MDR 24%
E. COLI 22%
E. FAECIUM 20%
S. EPIDERMIDIS 18%
C. ALBICANS 16%
E. FAECALIS 14%
S. AUREUS 10%
Rev de gastroenterología de México 2017; 82 (2): 115 -122
22. Infección de heridas quirúrgicas
Infección de herida quirurgica
incisional superficial: Ocurre
30 días posteriores a la cirugía
Infección de herida quirurgica
incisional profunda: Ocurre en los
primeros 30 días despues de la cirugía
si no se colocó implante o dentro del
primer año si se coloco implante.
Infección de órganos y espacios,
involucra cualquier región (a
excepción de la incisión) que se haya
manipulado durante el
procedimiento quirúrgico.
Norma Oficial Mexicana NOM-045-SSA2-2005, Para la vigilancia epidemiológica, prevención y control de las
infecciones nosocomiales
23. FACTORES DE RIESGO
• Factores del paciente:
– Edad
– Diabetes Mellitus
– Cáncer
– Artritis reumatoide
– Desnutrición
– Pacientes inmunodeprimidos
– Uso continuado de
corticoides
– Tratamientos citotóxicos
– Inmovilidad
– Enfermedades que provocan
hipoxia o hipoperfusión
tisular (Insuficiencia renal,
cardiaca, respiratoria)
– Habito tabáquico
24. FACTORES DE RIESGO
Factores de la herida:
• Presencia de cuerpo
extraño o tejido necrótico
• Isquemia tisular
• Herida de gran tamaño o
profundidad
• Localización anatómica
próxima a focos de
contaminación.
• Heridas de larga
evolución
25. FACTORES DE RIESGO
Factores del germen:
• Patogenia
• Virulencia
• Organización de los
gérmenes colonizadores:
– capacidad de biopelículas o
biofilms. Se definen como
colonias de bacterias
englobadas en una matriz de
exopolisacáridos, producida
por las propias bacterias, y
que se adhiere a la superficie
de una estructura viva o
inerte. Esta organización
permite la supervivencia en el
lecho de la herida y por tanto
son factores de cronicidad
para ésta.
26. FACTORES DE RIESGO
Factores relacionados con el
acto quirúrgico
- Ducha con antisépticos
previa a la cirugía
- Rasurado
- Limpieza de la piel con
antiséptico, previo a la
cirugía
- Profilaxis antibiótica
30. Antes de iniciar un tratamiento antibiótico empírico y únicamente de aquellas
lesiones que presenten signos clínicos de infección
31. – TÉCNICA:
• Presionar sobre la herida
• Rotar 360° según el movimiento de las manecillas del reloj, en un
área de 1 cm2
• Es recomendable utilizar dos hisopos estériles, uno para inocular los
medios de cultivo y otro para realizar la extensión para tinción de gram
• hacer zigzag sobre la superficie girando el hisopo.
HISOPADO
• Permite recoger una escasa cantidad de muestra que fácilmente se deseca por
lo que hay que utilizar hisopos con medios seguros, se recomienda utilizar
alginato de cálcico y el medio de transporte específico (por ejemplo Stuart y/o
medio de transporte para anaerobios).
• Limpiar y desbridar.
• Tomar cultivo de la zona más profunda.
32. BIOPSIA CUANTITATIVA
• Toma de un
fragmento de tejido
del lecho de la herida
• Se reporta el género,
especie y la cantidad
de UFC por gramo de
tejido.
33. • Es considerada como considera el patrón de oro para la toma de
muestras por su alta efectividad diagnóstica.
• Daña el lecho de la herida y puede provocar sangrado.
• MATERIAL: Gasas estériles, Guantes estériles, Suero fisiológico,
Antiséptico, Contenedor estéril de plástico con tapón de rosca, Pinza de
disección sin dientes, Bisturí y Punch de 5 mm.
• TÉCNICA:
* Retirar apósito que cubre la herida y limpiar la herida con suero
fisiológico.
* Realizar un desbridamiento cortante de restos necróticos y
esfacelos.
* Tomar dos muestras de distinto sitio de la herida con el punch.
* Introducir las muestras en el contenedor estéril, añadir unas gotas
de suero fisiológico para evitar la desecación y asegurarse que
queda bien cerrado.
34. ASPIRADO CON AGUJA
• Uso principalmente en
abscesos.
• Es el mejor método por
su sencillez y facilidad
para obtener muestras
de úlceras, abscesos y
heridas superficiales,
especialmente para la
búsqueda de bacterias
anaerobias
35. MATERIAL: Gasas estériles, Guantes, Alcohol etílico o isopropílico de 70º,
Antiséptico, Jeringa estéril de 5 ml, 2 agujas IM, Suero fisiológico 0,9% , Medio de
transporte para bacterias aerobias-anaerobias
Procedimiento:
• Exponer la herida retirando el apósito
• La punción se realiza a través de la piel integra de la piel periulceral,
seleccionando el lado de la lesión con mayor presencia de tejido viable, y menor
presencia de necrosis o esfacelos.
• Llevar a cabo una buena limpieza concéntrica de la zona de punción con alcohol
etílico o isopropílico al 70%, aplicar el antiséptico.
• Realizar una punción-aspiración con la jeringa y aguja manteniendo una
inclinación aproximada de 45º y aproximándose al nivel de la pared de la lesión.
El volumen óptimo de aspirado está establecido entre 1 y 5 ml.
• Una vez realizada la aspiración, expulsaremos el aire de la jeringa, tapando la
aguja con una gasa estéril impregnada en alcohol para eliminar el riesgo de
generar aerosoles
36. • Se reemplaza la aguja utilizada por una nueva y se inocula el contenido, previa
desinfección del tapón de goma, en un vial de transporte para anaerobios.
• Resguardar los medios de transporte utilizados de la luz manteniendo a una
temperatura entre 2 y 25º y no poner en nevera
Notas del editor
La tipificación de las bacterias se basa en el estudio de sus características mediante técnicas que oscilan entre las más sencillas tinciones y los más complejos estudios moleculares. Una técnica útil y de bajo costo consiste en la tinción de Gram y posterior observación de la muestra mediante el microscopio de luz para estudiar las bacterias, su forma, tipo de agrupación y color: grampositivas o gramnegativas. La mayor parte de las bacterias puede ser ubicada en uno de estos dos grupos o en un tercero, de acuerdo a la ácido-alcohol resistencia que presenten (Ziehl-Neelsen).
Las bacterias aeróbicas requieren oxígeno para crecer . Las bacterias anaerobias son aquellas bacterias que son capaces de crecer en ausencia de oxígeno. Los anaerobios facultativos pueden crecer en presencia de oxígeno, pero no lo requieren, mientras que los anaerobios obligados mueren en presencia de oxígeno y dependen de otros gases tales como el metano.
Las grampositivas se tiñen de morado ya que el colorante se queda atrapad en la capa gruesa de peptidoglucanos que rodea a la célula
Las gramnegativas tienen una capa de petidoglucano mucho más delgada es por ello que no retiene el violeta cristal y por esto las células se tiñen con safranina y las observamos rojas.
La patogenia de A. baumannii hace referencia a su capacidad para adherirse a las superficies usando pili, para crear una biopelícula sobre las superficies y las células humanas
). Por lo tanto, un elevado
número de infecciones bacterianas crónicas implican biofilms bacterianos que no son
fácilmente eliminados usando terapia antibiótica convencional. Las infecciones asociadas
a biofilm comparten una serie de características clínicas. El biofilm se desarrolla
preferentemente en superficies inertes o tejido muerto donde el crecimiento y la
aparición de síntomas son muy lentos. Las células bacterianas sésiles liberan antígenos y
estimulan la producción de anticuerpos, pero las infecciones producidas por biofilm
raramente son resueltas por los mecanismos de defensa del huésped.
Aunque, en general, no se recomienda tomar muestras superficiales mediante torunda/hisopo, es un método sencillo, barato y no invasivo. Sin embargo, todas las lesiones abiertas están colonizadas por bacterias. Por tanto, no es la mejor toma para realizar un cultivo.
La muestra obtenida mediante frotis de la herida puede detectar sólo los contaminantes de superficie y no reflejar el verdadero microorganismo que provoca la infección tisular, teniendo un dudoso valor diagnóstico. Para un mejor resultado, la herida debe estar previamente limpia y desbridada.
pero su coste y riesgo-beneficio aconsejan usarlo solo en casos aislados y en el ambiente atención especializada.
Tomar 1 ml de S.F. O.9% estéril e inyectar en la zona a cultivar, para aspirar el posible contenido bacteriano anidado en las partes más profundas de la herida.
Si la lesión es de características no supurativas podemos completar la aspiración con 0,5ml o 1 ml de suero fisiológico. Anotar en la petición y en el frasco de transporte la cantidad de suero añadido en la extracción para facilitar el contaje a posteriori.