Este documento describe los aspectos técnicos y aplicaciones clínicas de la electroforesis de lipoproteínas. Explica que este análisis permite evaluar el riesgo de enfermedad coronaria asociado con las dislipidemias mediante la medición del colesterol total, las fracciones de HDL y LDL, y los triglicéridos. También permite valorar complicaciones asociadas con la hiperlipidemia como colelitiasis y pancreatitis.
3. OBESIDAD:OBESIDAD: Cuestión cultural ?Cuestión cultural ?
Cuestión de países desarrollados ?Cuestión de países desarrollados ?
Cuestión genética ? … o TODO..?Cuestión genética ? … o TODO..?
MéxicoMéxico disputa el
Primer Lugar 2013Primer Lugar 2013
en Obesidad en
el Mundo.
Servi-MedServi-MedLaboratoriosLaboratoriosClínicosClínicos
Importante un
Sistema de ClasificaciónClasificación
MediciónMedición y seguimientoseguimiento
en dislipidemias.
4. CLASIFICACIONCLASIFICACION
SOBREPESO / OBESIDADSOBREPESO / OBESIDAD
I.M.C. = Kg peso ÷ (Altura m)2
I.M.C. = Kg peso ÷ (Altura m)2
Servi-MedServi-MedLaboratoriosLaboratoriosClínicosClínicos
Si Lincoln hubiera tenido pc
Si David hubiera viajado a EEUU
Mi IMC: 84.0 kg ÷ (1.80)2
84.0 ÷ 3.24 = 25.9
5. FACTORES DE RIESGOFACTORES DE RIESGO
VIEJOS Y EMERGENTESVIEJOS Y EMERGENTES
Síndrome Metabólico / Síndrome de Resistencia a la Insulina
Dislipidemia – Hipertensión – Diabetes
SíndromeSíndrome
metabólicometabólico
6. - Desfibrilador (60´s)
- Unidad Coronaria (80´s)
- Betabloqueadores
LOSLOS AVANCESAVANCES DE LADE LA
CARDIOLOGIA MODERNACARDIOLOGIA MODERNA
Era de Reperfusión (´80´s)
Trombolisis + Stents
Disminución de MortalidadDisminución de Mortalidad
IntrahospitalariaIntrahospitalaria
NO PREVIENEN… TRATAN DE CORREGIR EL DEFECTO.:!NO PREVIENEN… TRATAN DE CORREGIR EL DEFECTO.:!
7. MORBILIDAD Y MORTALIDADMORBILIDAD Y MORTALIDAD
ASOCIADA A DISLIPIDEMIASASOCIADA A DISLIPIDEMIAS
Cada hora mueren 7 personas en México por
infarto, de los que el 70 % está relacionado
con dislipidemias e hipertensión.
http://www.invdes.com.mx/anteriores/Abril2001/htm/infarto.html
Es la tercer causa de muerte en México,
después de diabetes y cáncer.
http://sinais.salud.gob.mx/mortalidad/tabs/m_009.xls
Se estima que al menos un tercio de la
población mexicana tiene algún grado de
obesidad y dislipidemia, muchos de ellos
asociados a diabetes.
Como medida de control de factores de
riesgo, se debe controlar el nivel denivel de
lípidoslípidos, así como otros factores de riesgo
asociados (hipertensión, tabaquismo y
sedentarismo y hábitos alimenticios).
8. Mortalidad Mundial
22.3
19.3
12.6
9.7
9
6.3
0 5 10 15 20 25 30
AterosclerosisAterosclerosis
Enfermedad infecciosa
Cáncer
Accidentes
Enfermedad pulmonar
SIDA
Causas de mortalidad (%)
The World Health Report 2001. Geneva. WHO. 2001.
9. El papel del Laboratorio Clínico:
Proporcionar elementos medibles para el control de este padecimiento
Tendencias a buscar en la medicina..
LA MEJOR MEDICINA ES LA QUE CONTROLA Y PREVIENE LOS
FACTORES DE RIESGO Y LAS COMPLICACIONES ASOCIADOS A:
- SINDROME DE RESISTRENCIA A LA INSULINA
- DIABETES / DISLIPIDEMIASDISLIPIDEMIAS,
- HTA / TROMBOSIS
LA MEJOR MEDICINA SERALA MEJOR MEDICINA SERA LA PREVENTIVALA PREVENTIVA……
LA MEJOR MEDICINA ES LA QUE CONTROLA Y PREVIENE LOS
FACTORES DE RIESGO Y LAS COMPLICACIONES ASOCIADOS A:
- SINDROME DE RESISTRENCIA A LA INSULINA
- DIABETES / DISLIPIDEMIASDISLIPIDEMIAS,
- HTA / TROMBOSIS
LA MEJOR MEDICINA SERALA MEJOR MEDICINA SERA LA PREVENTIVALA PREVENTIVA……
10. Origen de las Dislipidemias:
Dislipidemias primarias
CausasCausas genéticasgenéticas (primarias)(primarias)
de Dislipidemias:de Dislipidemias:
Genética FamiliarGenética Familiar
- Hipercolesterolemia FamiliarHipercolesterolemia Familiar
- Dislipidemia Familiar CombinadaDislipidemia Familiar Combinada
- Hipercolesterolemia PoligénicaHipercolesterolemia Poligénica
- Hiperquilomicronemia familiarHiperquilomicronemia familiar
- Hipertrigliceridemia familiarHipertrigliceridemia familiar
- Déficit congénito de HDLDéficit congénito de HDL
CausasCausas genéticasgenéticas (primarias)(primarias)
de Dislipidemias:de Dislipidemias:
Genética FamiliarGenética Familiar
- Hipercolesterolemia FamiliarHipercolesterolemia Familiar
- Dislipidemia Familiar CombinadaDislipidemia Familiar Combinada
- Hipercolesterolemia PoligénicaHipercolesterolemia Poligénica
- Hiperquilomicronemia familiarHiperquilomicronemia familiar
- Hipertrigliceridemia familiarHipertrigliceridemia familiar
- Déficit congénito de HDLDéficit congénito de HDL
11. Enfermedades mas comunes
asociadas a desnutrición:
• Gen Ob en cr7 que codifica para Leptina.
• Se expresa (produce) en adipocitos, y bajo
condiciones normales, será en proporción directa a
la masa de tejido adiposo.
Leptina ↑↑
Aumento de tejido adiposo
Péptidos anoréxicos
- Ghrelina
- Serotonina
- Colecistoquinina
- Neuropéptido Y
Lipogénesis ↓
Lipólisis ↑
Apetito ↓↓
12. Origen de las Dislipidemias:
Dislipidemias Secundarias
- DiabetesDiabetes:: Valores elevados de insulina, defectos en el catabolismo de
quilomicrones y VLDL
- ObesidadObesidad:: Mayor cantidad de lípidos en circulación y valores elevados
de insulina (resistencia a la insulina)
- HipotiroidismoHipotiroidismo:: Disminución del receptor de LDL y depuración lenta de
las LDL
- NefropatíasNefropatías:: Insuficiencia renal crónica y depuración lenta de VLDL con
aumento de producción de LDL. Retención de colesterol para
compensación oncótica.
- ColestasisColestasis:: Bloqueo de vía excretoria de la bilis con aumento del paso
colesterol y fosfolípidos al plasma
- AlcoholismoAlcoholismo:: Estimula la secreción de VLDL por parte del hígado y
síntesis hepática de triglicéridos
- Terapia sustitutiva de EstrógenosEstrógenos:: Mayor síntesis de VLDL y HDL
- DiabetesDiabetes:: Valores elevados de insulina, defectos en el catabolismo de
quilomicrones y VLDL
- ObesidadObesidad:: Mayor cantidad de lípidos en circulación y valores elevados
de insulina (resistencia a la insulina)
- HipotiroidismoHipotiroidismo:: Disminución del receptor de LDL y depuración lenta de
las LDL
- NefropatíasNefropatías:: Insuficiencia renal crónica y depuración lenta de VLDL con
aumento de producción de LDL. Retención de colesterol para
compensación oncótica.
- ColestasisColestasis:: Bloqueo de vía excretoria de la bilis con aumento del paso
colesterol y fosfolípidos al plasma
- AlcoholismoAlcoholismo:: Estimula la secreción de VLDL por parte del hígado y
síntesis hepática de triglicéridos
- Terapia sustitutiva de EstrógenosEstrógenos:: Mayor síntesis de VLDL y HDL
13. Objetivo del estudio de Lípidos:
1.1. Proporcionar unaProporcionar una medidamedida que valore el riesgoque valore el riesgo
de Enfermedad Coronaria (aterosclerosis)de Enfermedad Coronaria (aterosclerosis)
asociada a dislipidemias, mediante elasociada a dislipidemias, mediante el
Indice de Riesgo = CTIndice de Riesgo = CT ÷ cHDL÷ cHDL
2. Valorar dislipidemia y complicaciones asociadas a2. Valorar dislipidemia y complicaciones asociadas a
hiperlipidemia (hiperlipidemia (cifrascifras absolutas de CT y TG) deabsolutas de CT y TG) de
acuerdo a riesgos de: colelitiasis, pancreatitis,acuerdo a riesgos de: colelitiasis, pancreatitis,
hígado graso, etc.hígado graso, etc.
1.1. Proporcionar unaProporcionar una medidamedida que valore el riesgoque valore el riesgo
de Enfermedad Coronaria (aterosclerosis)de Enfermedad Coronaria (aterosclerosis)
asociada a dislipidemias, mediante elasociada a dislipidemias, mediante el
Indice de Riesgo = CTIndice de Riesgo = CT ÷ cHDL÷ cHDL
2. Valorar dislipidemia y complicaciones asociadas a2. Valorar dislipidemia y complicaciones asociadas a
hiperlipidemia (hiperlipidemia (cifrascifras absolutas de CT y TG) deabsolutas de CT y TG) de
acuerdo a riesgos de: colelitiasis, pancreatitis,acuerdo a riesgos de: colelitiasis, pancreatitis,
hígado graso, etc.hígado graso, etc.
“Solo se puede conocer lo que se puede medir”
14. Valoración de las Dislipidemias por LaboratorioValoración de las Dislipidemias por Laboratorio
Medición de Colesterol + Triglicéridos.
Medición del Perfil de Lípidos
Colesterol
cHDL + cLDL + cVLDL “LIPIDOS TOTALES..??? “
Triglicéridos
Test de Quilomicrones: Se deja reposar el suero a 4ºC durante 24 hs;
cuando existen quilomicrones, aparece un sobrenadante cremoso en la
superficie. En sueros normales, esto nunca aparecerá.
Medición de Perfil de Lípidos + Electroforesis de Lipoproteínas
- Colesterol
- cHDL + cLDL + cVLDL
- Triglicéridos
- Indice de Riesgo Aterogénico
C.T. / cHDL
- Alfa
- Pre-Beta
- Beta
- Indices de Riesgo Aterogénico
Pre-Beta / Alfa
Beta / Alfa
15. CALCULO DE cLDL y cVLDL A PARTIR DECALCULO DE cLDL y cVLDL A PARTIR DE
COLESTEROL, TRIGLICERIDOS Y cHLDCOLESTEROL, TRIGLICERIDOS Y cHLD
Fórmula de FriedewaldFórmula de Friedewald para calcular las distintas
fracciones de colesterol:
- Medición directa de Colesterol (CT),
- Medición directa de Triglicéridos (TG)
- Medición directa de cHDL
- Calcular cLDLcLDL y cVLDLcVLDL mediante las fórmulas:
* cLDL = CT – ((Tg / 5 ) + cHDL)
* cVLDL = CT – (cLDL + cHDL)
No valora riesgo asociado a hipertrigliceridemiahipertrigliceridemia
cVLDL = TG / 5
16.
17. METODOS PARA VALORACIONMETODOS PARA VALORACION
DE RIESGO ATEROGÉNICODE RIESGO ATEROGÉNICO
Medición de Colesterol y Triglicéridos, incluyendo las fracciones cHDL, cLDL Y
cVLDL, para obtener el riesgo aterogénico derivado de alteraciones del
colesterol y las lipoproteínas de transporte.
No valora riesgo asociado a hipertrigliceridemiahipertrigliceridemia
Normal
(mg/dL)
Ejemplo 1 Ejemplo 2
Ejemplo 3 Ejemplo 4
Colesterol Total 100 – 200 200 200 250 314
Triglicéridos 50 – 170 170 170 400 245
cHDL > 50 35 50 60 46
cLDL < 100 131 116 110 219
cVLDL < 21 34 34 80 49
Riesgo
Aterogénico
C T / cHDL
< 4.5 5.7 4.0 4.1 6.8
18. METODOS PARA VALORACIONMETODOS PARA VALORACION
DE RIESGO ATEROGÉNICODE RIESGO ATEROGÉNICO
Medición de Colesterol y Triglicéridos, incluyendo las fracciones cHDL, cLDL Y
cVLDL, para obtener el riesgo aterogénico derivado de alteraciones del
colesterol y las lipoproteínas de transporte.
No valora riesgo asociado a hipertrigliceridemiahipertrigliceridemia
Normal
(mg/dL)
Ejemplo 5 Ejemplo 6
Ejemplo 7 Ejemplo 8
Colesterol Total 100 – 200 185 180 205 344
Triglicéridos 50 – 170 400 679 754 3 018
cHDL > 50 37 42 56 65
cLDL < 100 68 2 - 1 - 324
cVLDL < 21 80 136 150 603
Riesgo
Aterogénico
C T / cHDL
< 4.5 5.0 4.3 3.6 :-) 5.3
19. VALORACION DE RIESGO DE ENFERMEDAD CORONARIA (EC) CONVALORACION DE RIESGO DE ENFERMEDAD CORONARIA (EC) CON
CIFRAS DE COLESTEROL, TRIGLICERIDOS Y LOS cHDL, cLDL Y cVLDLCIFRAS DE COLESTEROL, TRIGLICERIDOS Y LOS cHDL, cLDL Y cVLDL
Datos de Riesgo y Terapéutica del Toronto Working Group, 1998Toronto Working Group, 1998
Factor de
Riesgo
Coronario
Nivel de
riesgo
Riesgo EC
a 10 años
Tratamiento, si:
LDL(mg) ó CT/HDL
≥ 4 Muy alto ≥ 40% 135 ó >5
≤ 3 Alto 20 a 39% ≥ 174 ó >6
≤ 2 Normal 10 a 19% ≥ 193 ó >7
≤ 1 Bajo <10% ≥ 232 ó >8
20. Las lipoproteínas están formadas por:
- Fracción proteica o Apo (Apoproteína)
Función primordial en acoplamiento a
receptores.
- Colesterol total y esterificado
- Triglicéridos.
COMPOSICION DE LAS LIPOPROTEINASCOMPOSICION DE LAS LIPOPROTEINAS
21. COMPOSICION DE LAS LIPOPROTEINASCOMPOSICION DE LAS LIPOPROTEINAS
PROPORCION DE LIPIDOS / APOPROTEINASPROPORCION DE LIPIDOS / APOPROTEINAS
26. CAUSAS Y CLASIFICACIONCAUSAS Y CLASIFICACION
DE LAS DISLIPIDEMIASDE LAS DISLIPIDEMIAS
27. PROCESO DE LAPROCESO DE LA ATEROSCLEROSISATEROSCLEROSIS
28. IMPORTANCIA DEL ESTUDIO DELIMPORTANCIA DEL ESTUDIO DEL
PACIENTE CON DISLIPIDEMIAPACIENTE CON DISLIPIDEMIA
Cual es su riesgo aterogénico..??Cual es su riesgo aterogénico..??
NO HAY REGLA: Hay “flacos” con hipercolesterolemia o
hipertrigliceridemia, y flacos normolipémicos.
Hay “gordos” con hipercolesterolemia y/o hipertrigliceridemia
y “gordos normolipémicos.
Se pueden clasificar las dislipidemias y medir el riesgo
aterogénico… con solo medir colesterol y triglicéridos ?
… Causas de obesidad ?
… Causas de talla baja ?
29. ESTUDIO DE DISLIPIDEMIASESTUDIO DE DISLIPIDEMIAS
• La ELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINAS ofrece un método
sensible y accesible para valoración de riesgos aterogénicos, tanto
asociados a hipercolesterolemia como hipertrigliceridemia.
Patológico: Aumento de LDL y VLDL con agravamiento por
presencia de quilomicrones. Disminución de síntesis de HDL.
Tendencia óptima: Aumentar HDL y disminuir LDL, IDL y VLDL
Clasificación de
Dislipidemias
Terapéutica específica Riesgo EC
Respuesta
A tratamiento
Electroforesis de
Lipoproteinas
31. Clasificacion de las DislipidemiasClasificacion de las Dislipidemias
(OMS 1970 modificada de Fredickson y Levi de 1963)(OMS 1970 modificada de Fredickson y Levi de 1963)
- Tipo I: Quilomicrones.
- Tipo IIa: Betalipoproteínas (LDL)
- Tipo IIb: LDL + VLDL (Beta y p-Beta)
- Tipo III: IDL (Beta ancha)
- Tipo IV: VLDL (pre-Betalipoproteínas)
- Tipo V: VLDL + Quilomicrones
Método semi-semi-
cuantitativocuantitativo
Debe interpretarse
junto con los valores de
colesterolcolesterol y triglicéridos.triglicéridos.
Banda en el punto de aplicación
corresponde a la presencia de
quilomicrones,
Banda ancha que abarca beta y
prebeta sugiere un acúmulo
anormal de IDL y/o de
remanentes de quilomicrones.
Banda Pre-Pre-αα (LipoalbúminaLipoalbúmina)
aparece cuando hay ácidos
grasos libres y lecitina unida a
albúmina (no patológica).
32. ELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINASELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINAS
ELECTROFORESIS DE MICROZONA (acetato de celulosa)ELECTROFORESIS DE MICROZONA (acetato de celulosa)
Punto de aplicación
Lipoproteínas Beta (LDL)
Lipoproteínas Pre-Beta (VLDL)
Lipoproteínas Alfa (HDL)
Sitio de aparición de
los quilomicrónes
Método electroforético que permite separar e identificar y medir las distintas
fracciones lipoproteicas, mediante su tinción con Sudán Negro y su integración
densitométrica en un lipidograma.
34. MUESTRA A USAR…?MUESTRA A USAR…?
El SUEROSUERO contiene Lipoprotein LipasaLipoprotein Lipasa, que es activa y estará
degradando lipoproteínas en la muestra.
La Lipoprotein Lipasa es activada por laactivada por la HEPARINAHEPARINA, por lo que no
es una muestra útil para una electroforesis de lipoproteinas.
ElEl EDTAEDTA inhibe la actividad de la enzima Lipoprotein Lipasa, por loinhibe la actividad de la enzima Lipoprotein Lipasa, por lo
que es la muestra ideal a utilizar, ya seaque es la muestra ideal a utilizar, ya sea EDTA -Na, -K, o -LiEDTA -Na, -K, o -Li..
NO HAY CAMBIOS SIGNIFICATIVOS SI SE EMPLEA UNA
MUESTRA DE SUERO Y SE EFECTUA LA ELECTROFORESIS
ANTES DE 48 HORAS EN SUERO REFRIGERADO.
Si no se procesará antes de 48 horas de obtenida la muestra, será
mas conveniente una muestra de plasma y refrigerar para procesar.
35. Datos del
paciente
ELECTROFORESIS DE PROTEINASELECTROFORESIS DE PROTEINAS
REPORTEREPORTE
Corrimiento
electroforético
Datos de
interpretación
clínica
Integración de
electroforesis
PROPORCIONAR AL
MEDICO, TODA LA
INFORMACION POSIBLE
PARA EL CORRECTO
APROBECHAMIENTO
DEL ESTUDIO
40. FENOTIPO DE DISLIPIDEMIASFENOTIPO DE DISLIPIDEMIAS
FENOTIPO IV: Hiper-Betalipo (trigliceridemia)FENOTIPO IV: Hiper-Betalipo (trigliceridemia)
41. FENOTIPO DE DISLIPIDEMIASFENOTIPO DE DISLIPIDEMIAS
FENOTIPO IV: Hiper-Betalipo (trigliceridemia)FENOTIPO IV: Hiper-Betalipo (trigliceridemia)
42. FENOTIPO DE DISLIPIDEMIASFENOTIPO DE DISLIPIDEMIAS
FENOTIPO V: Hipertrigliceridemia con quilomicronesFENOTIPO V: Hipertrigliceridemia con quilomicrones
43. FENOTIPO DE DISLIPIDEMIASFENOTIPO DE DISLIPIDEMIAS
FENOTIPO V: Hipertrigliceridemia con quilomicronesFENOTIPO V: Hipertrigliceridemia con quilomicrones
44. ELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINASELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINAS
Principales problemas y alternativas:Principales problemas y alternativas:
Muy baja cantidad de lípidos (ppalm tg) Prescribir a pacientes dislipidémicos
Uso de sueros envejecidos (> 2 días)
Procesar al menos 3 veces por semana
Usar plasma si se procesara después de 48 hs
Uso de sueros/plasmas congelados No congelar. Ideal refrigerar a 4°C
Uso de Buffer equivocado o deteriorado Recambio de buffer y uso de secantes
Déficit Congénito
de HDL ..?
Usar un suero normal como
Control Interno
45. ELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINASELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINAS
Principales problemasPrincipales problemas
Principales problemas de corrimientos:
1. Deficiente preparación de acetatos por no recambio de filtros Habrá
aparición de artificios en el corrimiento
2. Envejecimiento de reactivos Teñido deficiente
3. Uso de amortiguador impropio Corrimiento anormal
4. Muestras envejecidas Desaparición o atenuamiento de bandas
5. No coincide lo que veo en el corrimiento con lo que integra el integrador
densitométrico Limpieza y mantenimiento de los sensores o
fotoceldas de cada canal de integración.
Sugerencias:
- En lo posible, meter suero “normal” para comparar patrones anormales.
- Recambio de papel filtro de puentes y desecantes.
- Procesamiento 3 veces por semana
- Programación de mantenimiento preventivo al menos una vez al año