Este documento describe una práctica de laboratorio sobre la intoxicación por metanol en cobayos. Se administró metanol por vía intraperitoneal a un cobayo y se observaron sus síntomas y tiempo de muerte. Luego se realizaron reacciones de identificación en las vísceras del animal para confirmar la presencia de metanol. El documento concluye que el metanol es muy tóxico y las reacciones de identificación son indispensables para verificar una intoxicación por este compuesto.
1. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 1
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
PROFESOR: BQF. Carlos García MSc.
ALUMNO:
CURSO: 5to Paralelo: “A”
GRUPO: N° 1
FECHA DE ELABORACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes 16 de Junio del 2014
FECHA DE PRESENTACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes 23 de Junio del 2014
PRÁCTICA N° 3
TÍTULO DE LA PRÁCTICA: INTOXICACIÓN POR METANOL
ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN: Cobayo
VOLUMEN ADMINISTRADO: 20 ml
VÍA DE ADMINISTRACIÓN: Vía Intraperitonial
HORA DE ADMINISTRACIÓN: 8: 25 am
TIEMPO DE MUERTE: 9:45 am
SÍNTOMAS: Pérdida de Equilibrio
Hipoxia
Convulsiones
Ceguera
Hinchazón Abdominal
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante la Intoxicación por Metanol
2. Observar atentamente las manifestaciones que presenta el cobayo ante la
Intoxicación por metanol
3. Controlar el tiempo en que actúa el metanol en el cobayo
4. Conocer mediante pruebas de identificación la presencia de metanol
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MATERIALES SUSTANCIAS
Jeringuilla de 10cc
Campana
Equipo de disección
Vaso de precipitación
Erlenmeyer
Equipo de destilación.
Tubos de ensayo
Pipetas
Agitador
Ácido tartárico
Cloruro de fenilhidrazina
Nitroprusiato de sodio
Ácido sulfúrico
Cloruro férrico
Hidróxido de sodio
Acido clorhídrico
Ferricianuro de potasio
Hidróxido de potasio 12%
Ácido cromotròpico
Guantes de látex
Mascarilla
Mandil
Perlas de vidrio
EQUIPOS
Balanza analítica
Probeta
Espátula
Panema
Pinza para tubos
Tapón de vidrio y de caucho
Cinta
PROCEDIMIENTO
1. Desinfectar el área de trabajo y tener todos los materiales listos en la mesa de
trabajo
2. Aplicar todas las normas de bioseguridad antes de iniciar la práctica
3. Administrar 5ml de metanol al cobayo por vía intraperitoneal
4. Colocar el cobayo en la panema
5. Observar las manifestaciones que se presentan y en qué tiempo se dan hasta su
muerte.
6. Con la ayuda del bisturí procedemos a realizar la disección al cobayo
7. Colocar las vísceras una vez trituradas (picadas lo más finas posibles) en un
recipiente adecuado (balón volumétrico).
8. Pesar 2 gr de ácido tartárico y diluirlo en 50 ml de Agua destilada
9. Colocar la solución de acido tartárico sobre la muestra para acidularla
10. Recoger el destilado de las vísceras en un elermeyer
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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO
Las reacciones particulares para reconocer al metanol como tal, prácticamente no
existen, por lo que es necesario transformarlo en el respectivo aldehído con tal
propósito. Esto se consigue mediante un sencillo método que consiste calentar al rojo
una lámina de cobre (exenta de grasa y otras impurezas) e introducirla en el destilado,
repitiéndose la operación hasta cuando la lámina comienza a desprender pequeñas
partículas color gris en el destilado, lo cual nos indica que hemos conseguido el
propósito de trasformar el metanol en metanal.
En consecuencia, las reacciones que se practican son las mismas que se realizan para el
reconocimiento del formaldehido, así:
1. Reacción de Shiff: Se produce color violeta.
2. Reacción de Rimini: Origina color azul intenso
3. Con la fenil hidracina: Da color rojo grosella
4. Reacción de Marquis: Se obtiene un color violeta
5. Con el ácido cromotrópico: Da color rojo
6. Reacción de Hehner: Se produce color violeta o rojo violeta.
GRÁFICOS
1.- Administrar la sustancia 2.- Colocar el cobayo en 3.- Colocar al cobayo en
tóxica por vía intraperitonial la panema y observar lugar de disección y pro
sus manifestaciones ceder a rasurarlo
4.- Proceder a realizar la 5.- Recoger las vísceras 6.- Triturar las vísceras
disección del cobayo del cobayo y colocarlas en un balón
de Aforado
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7.- Armar el equipo de destilación 8.- Una vez recogido el 9.- Reacción de Shiff
destilado, realizar las reacciones
de identificación
10.- Reacción de Rimini 11.- Reacción con fenilhidracina 12.- Reacc. con ác. cromotrópico
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO
Reacción de Shiff
Solución Problema
(Antes)
Positivo – No Característico
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Reacción de Rimini
Solución Problema
(Antes)
Positivo – No Característico
Reacción con la Fenilhidracina
Solución Problema
(Antes)
Positivo – Característico
Reacción con el Ácido Cromotrópico
Solución Problema
(Antes)
Negativo
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Reacción de Hehner
Solución Problema
(Antes)
Negativo
OBSERVACIONES
Se necesito mas de 5ml de metanol para producir el deceso del cobayo,
Al administrar metanol por vía intraperitoneal el cobayo presentó convulsiones,
movimientos descoordinados, hipoxia.
El tiempo en que se produjo el deseo del cobayo fue muy tardío (80 min) esto se
debió a que los reactivos pueden estar caducados.
CONCLUSIONES
La reacción que presento el caballo ante la intoxicación de metanol fue movimientos
descoordinados, convulsiones, hipoxia y su muerte se produjo después de un tiempo de
80 minutos, con lo que se concluye que el metanol es una sustancia muy tóxica, y
con la ayuda de las reacciones de reconocimiento se pudo comprobar la presencia de
metanol en estos medios biológicos teniendo en cuenta que las reacciones de
reconocimiento de metanol son indispensables para la verificación de una intoxicación
y muerte por este tóxico.
RECOMENDACIONES
Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes,
mascarilla.
Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.
Utilizar pipetas específicas para cada reactivo.
Preparar correctamente las sustancias a la concentración requerida
Para una mayor eficacia en los resultados de la práctica realizar
correctamente la administración del tóxico al animal a experimentar.
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CUESTIONARIO
1. DE UNA BREVE DESCRIPCIÓN DEL METANOL
El metanol, a temperatura ambiente, es un líquido incoloro, volátil e inflamable.
Su olor suave a alcohol puede ser percibido a un umbral de concentración de
6,54 a 131 mg/m3 (5-100 ppm).
2. APLICACIONES DEL METANOL
El metanol también se está utilizando en menor escala como combustible
para las celdas de combustible.
Cristalización, precipitación y limpieza de sales halide alcalinas
metálicas.
Precipitación de resinas de poliestireno y cloropreno.
Limpieza y secado de fracciones de carbón en polvo.
Disolventes de pintura.
Limpieza de superficies metálicas.
Limpieza de resinas de intercambio iónico.
Extracción de humedad y resinas de maderas.
Agente extractor en la industria petrolera, química y alimenticia.
Combustible para cocinas de camping y soldadores.
Líquido anticongelante y limpia parabrisas para automóviles.
Anticongelante para deshidratación de oleoductos.
3. ¿QUÉ EFECTOS A NIVEL DEL APARTO RESPIRATORIO CAUSA LA
EXPOSICION CON METANOL?
La inhalación es una vía importante de exposiciones industriales. El olor del
metanol y sus propiedades irritantes proporcionan generalmente una alarma
adecuada de concentraciones peligrosas. El metanol es ligeramente más pesado
que el aire y puede causar asfixia en espacios poco ventilados, situados a nivel
bajo o cerrados.
Sus principales síntomas son tos, vértigo, dolor de cabeza y náuseas.
4. ¿CUÁL ES EL RANGO DE TOXICIDAD QUE PRESENTA EL
METANOL?
La ingestión de 0,1 g metanol/kg peso corporal o más, debería ser considerada
como grave, la ingestión de más de 1 g metanol/kg peso corporal es
potencialmente letal. La exposición por inhalación de una concentración de más
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de 1309 mg/m3 (1000 ppm) o el contacto prolongado o extenso de la piel puede
causar también toxicidad sistémica.
5. ¿CUÁLES SON LAS FASES DE INTOXICACIÓN QUE PRESENTA EL
METANOL?
Fase narcótica
Periodo latente
Acidosis/neurotoxicidad
6. ¿QUÉ SÍNTOMAS SE PRESENTAN DURANTE LA FASE NARCÓTICA
DEL METANOL?
Hasta 8 horas después de la intoxicación por metanol, pueden presentarse
síntomas de embriaguez como en la intoxicación por etanol, pero en menor
grado: ligera depresión del sistema nervioso central, confusión, ataxia. La
irritación gastrointestinal puede dar como resultado náuseas, vómitos, y dolor
epigástrico
GLOSARIO
EPIGASTRIO
Es la región del abdomen que se extiende desde el diafragma hasta aproximadamente el
séptimo u octavo espacio intercostal, y queda limitada en ambos lados por las costillas
falsas.
Contiene al colon transverso, al duodeno, al píloro y a la aorta descendente
CLOROPRENO
Importante caucho sintético (2-cloro-l,3 butadieno) obtenido mediante reacciones
sucesivas de acetileno y ácido clorhídrico, o bien mediante procedimientos más
recientes, por cloración del butadieno.
ATAXIA
La ataxia es un trastorno de la coordinación del movimiento que comporta una
desviación del segmento corporal o segmentos corporales que lo está(n) realizando, de
la línea ideal que deben seguir durante su recorrido
NARCÓTICO
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Es una sustancia que provoca sopor o sueño, relajación muscular y un embotamiento de la
sensibilidad
UMBRAL
Es la entrada, el principio, el comienzo o el primer paso de cualquier cosa o proceso.
WEBGRAFÍA
Dirección General de Salud Pública Servicio de Sanidad Ambiental. RIESGO
QUÍMICO - ACCIDENTES GRAVES METANOL. Marzo 2007. Murcia España.
Disponible en: http://soymino.files.wordpress.com/2009/12/99967-metanol.pdf
Definición de. NARCÓTICO. 2014. Disponible en: http://definicion.de/narcotico/
Poica 2010 b. METANOL. Aplicaciones del Metanol. MAYO 2010. Disponible en:
http://poica2010b.wordpress.com/2010/04/15/aplicaciones-del-metanol/
Machala 23 de Junio del 2014
FIRMA DE RESPONSADILIDAD
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ANEXOS:
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METANOL
El metanol (CH3OH) es un líquido incoloro ay volátil a temperatura ambiente. Por si
mismo es inofensivo, pero sus metabolitos son tóxicos.
Fuentes de Exposición
Tiene una amplia utilización industrial como disolvente, utilizándose en la fabricación
de plásticos, material fotográfico. Componente de la gasolina, anticongelantes, liquido
limpia cristales, líquido para fotocopias, limpiadores del hogar, etc.
La intoxicación se produce generalmente por ingesta accidental o intencionada.
También se han dado casos de intoxicación por adulteración de bebidas alcohólicas.
Toxicocinética
Cuando se ingiere, se absorbe rápidamente a partir del tracto gastrointestinal y los
niveles en sangre alcanzan su pico a los 30-60 minutos de la ingestión, dependiendo de
a presencia o ausencia de comida. La intoxicación usualmente se caracteriza por un
periodo de latencia (40 minutos a 72 horas), durante el cual nos e observan síntomas.
Esta fase sigue de acidosis con anión gap elevado y de síntomas visuales.
El metabolismo del metanol comprende la formación de formaldehido por una
oxidación catalizada a través del alcohol deshidrogenasa. El formaldehido es 33 veces
más toxico que el metanol, pero es más rápidamente convertido a acido fórmico, que es
6 veces más toxico que el metanol. Los niveles de ácido fórmico se correlacionan con
el grado de acidosis y la magnitud del anión gap. También la mortalidad y los síntomas
visuales se correlacionan con el grado de acidosis.
Mecanismos de acción
El metanol se absorbe por vía oral, a través de la piel, y por vía respiratoria. Su volumen
de distribución es 0.6 l/kg. Se distribuye en el agua corporal y es prácticamente
insoluble en la grasa. El hígado lo metaboliza en su mayor parte, a través del alcohol-
deshidrogenasa, el formaldehido, que es rápidamente convertido a acido fórmico por el
aldehído-deshidrogenasa, el cual es finalmente oxidado a dióxido de carbono. El 3-5%
se excreta por el pulmón y el 12% por vía renal. La vida media es de unas 12 horas, que
puede reducirse a 2.5 mediante hemodiálisis. La eliminación sigue una cinética de
primer orden a bajas dosis y durante la hemodiálisis, mientras que sigue una cinética de
orden cero a altas dosis.
Se piensas que el ácido fórmico es el responsable de la toxicidad ocular asociada a la
intoxicación por metanol, como el ácido láctico, parecen ser los responsables de la
acidosis metabólica y del descenso del bicarbonato.
El metanol afecta principalmente al SNC, produciendo deterioro del nivel de
consciencia convulsiones y coma. La dosis toxica es de 10-30ml, considerándose
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potencialmente letal una dosis de 60-240ml; los niveles plasmáticos tóxicos son
superiores a 0.2g/l, y potencialmente mortales los que superan 1l/g.
Cuadro clínico
La intoxicación por metanol habitualmente se produce por ingestión, pero también
puede ocurrir por absorción cutánea y por inhalación. El inicio del cuadro puede ser
precoz, o retrasarse hasta 24 horas, si se han ingerido también alimentos. Los
principales signos y síntomas son:
a) Perdida de agudeza visual con adema de papila. Además puede aparecer
nistagmus (movimiento involuntario de los ojos. Usualmente es de lado a lado
pero sa veces es de arriba abajo o en forma circular: es un movimiento rotatorio
incontrolable) y alteración de los reflejos pupilares. Asimismo, puede
desarrollarse pérdida de visión y ceguera irreversible por atrofia del nervio
óptico.
b) Taquipnea medida por acidosis y parada respiratorio súbita
c) Síntomas digestivos como dolor abdominal, anorexia, náuseas y vómitos,
acompañados a veces, de aumento de transaminasas y enzimas pancreáticos
d) Síntomas neurológicos que van desde la confusión hasta el coma profundo,
convulsiones, cefalea vértigo, infarto de ganglios basales, etc.
e) Alteraciones hemodinámicas como bradiarritmias, hipotensión y depresión
miocárdica.
f) La acidosis metabólica es un hallazgo constante en todos los casos graves, y se
debe principalmente al ácido fórmico. También esta aumentado el anión gap.
Diagnóstico
El diagnostico puede hacerse por la historia clínica a través del paciente o de los
acompañantes. Sin una historia clínica de ingestión de metanol, el diagnóstico
diferencial es amplio, e incluye cetoacidosis diabética, pancreatitis, nefrolitiasis,
meningitis, hemorragia subaracnoidea, etc.
En estos pacientes, está indicado realizar al ingreso analítica de sangre y orina de rutina.
Además es importante obtener una gasometría arterial para determinar acidosis
metabólica. El diagnostico de certeza nos lo dará el nivel de metanol en sangre.
Tratamiento
El tratamiento inicial de la intoxicación aguda por metanol es de soporte. Es prioritario
asegurar la vía aérea y mantener una ventilación y circulación adecuadas. La
recuperación del paciente parece estar directamente relacionada con el intervalo de
tiempo transcurrido entre la ingestión del toxico y el inicio del tratamiento. También
depende del grado de acidosis, que a su vez, es también en parte, función del tiempo.
Para prevenir la absorción se hará gástrico, a ser posible en las dos primeras horas o en
las 4 primeras horas si la ingesta se acompaño de alimentos. El carbón activado y los
catárticos son ineficaces. Puede realizarse infusión de etanol para bloquear la
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metabolización hepática del metanol por inhibición competitiva del alcohol
deshidrogenasa, y forzar la eliminación del toxico por rutas extra hepáticas. Para
conseguir los niveles plasmáticos óptimos de etanol (entre 1 y 2g/l), se administra un
bolo i.v. de 1.1 ml/kg disuelto en 100ml de suero glucosado al 5% pasar en 15 minutos;
a continuación 0.1ml/kg/h disueltos cada vez en 100ml de suero glucosado al 5% se si
trata de un alcohólico crónico, la dosis de mantenimiento es de 0.2 ml/kg/h. La
perfusión de etanol deben hacerse por vía central para evitar tromboflebitis. Deben
controlarse periódicamente los niveles de etanol y ajustar la dosis de perfusión.
Es necesario el aporte de volumen por la deshidratación y la inhibición de la hormono
antidiurética, que se realiza con suero salino. Se administrara bicarbonato para corregir
la acidosis. Se debe administrar ácido fólico, que aumenta la oxidación del ácido
fórmico a dióxido de carbono y agua.
La diuresis forzada no es eficaz, pero con la hemodiálisis se consigue depurar tanto el
metanol como el ácido fórmico y el formaldehido. Los criterios para indicar la diálisis
serian cualquiera de los siguientes: metanol >0.5 g/l, acidosis metabólica con pH< 7.20
trastornos visuales o disminución del nivel de consciencia. Si se indica diálisis debe
mantenerse durante varias horas, y no interrumpirse hasta que el metanol sea <0.2g/l.
Para controlar las convulsiones se utiliza diazepan y fenitoína.
Reacciones de reconocimiento
Reconocimiento en medios biológicos
Las reacciones particulares para reconocer al metanol como tal, prácticamente no
existen, por lo que es necesario transformarlo en el respectivo aldehído con tal
propósito. Esto se consigue mediante un sencillo método que consiste calentar al rojo
una lámina de cobre (exenta de grasa y otras impurezas) e introducirla en el destilado,
repitiéndose la operación hasta cuando la lámina comienza a desprender pequeñas
partículas color gris en el destilado, lo cual nos indica que hemos conseguido el
propósito de trasformar el metanol en metanal.
En consecuencia, las reacciones que se practican son las mismas que se realizan para el
reconocimiento del formaldehido, así:
7. Reacción de Shiff: Se produce color violeta.
8. Reacción de Rimini: Origina color azul intenso
9. Con la fenil hidracina: Da color rojo grosella
10. Reacción de Marquis: Se obtiene un color violeta
11. Con el ácido cromotrópico: Da color rojo
12. Reacción de Hehner: Se produce color violeta o rojo violeta.