El documento describe un laboratorio de microbiología en el que se realizaron tinciones y observaciones de microorganismos en muestras de sarro dental y yogurt. Se prepararon frotis que se tiñeron con azul de metileno para visualizar las bacterias al microscopio. En la muestra de sarro dental se observaron cocos, diplococos, estreptococos y cristales, mientras que en la de yogurt se vieron bacilos y cocos. Las tinciones son importantes en microbiología para diferenciar las bacterias de su entorno.

1. Universidad Hispanoamericana de Panamá
Licenciatura en Ciencias de la Enfermería
Biología
Laboratorio #4
Tinciones y Observación de Microorganismos
Integrantes: Lisney Vásquez 8-936513
Indira Valdivieso 8-898-2336
Deyaneris López 10-708-2291
Yuribeth Murillo 8-918-1647
Profesor: Darwin Díaz. Q
Panamá, 21 de Maro del 2017

2. Procedimiento
Preparación de los Frotis: Extensión y Fijación
1. Colocamos una gota de agua sobre dos
portaobjetos, con ayuda de un palillo tomamos
una muestra de yogurt y los mezclamos con el
agua en cada placa, preparando una fina
extinción (frotis) en cada porta objetos.
Lo dejamos secar
2. Luego procedimos a utilizar dos frotis pero
utilizando sarro dental como muestra.
Colocamos una gota de agua sobre dos
portaobjetos, con ayuda de un hisopo estéril.
Luego tomamos una muestra de sarro dental,
pasándola por la base de los dientes.
Mezclamos la muestra con el agua de cada
placa, preparando una fina extensión (frotis) en
cada portaobjetos.
Dejamos secar.
3. Luego fijamos cada frotis con calor. (realizamos
cuatro frotis).
Tinción Simple
A. Tinción con azul de metileno
1. Tomamos los frotis realizados (uno de yogurt
y el otro de sarro dental) y a cada lámina le
agregamos una gota de azul metileno hasta
cubrir toda la muestra.

3. Dejamos actuar por 5 minutos.
2. Lavamos cada placa con agua del grifo y
dejamos secar por 5 minutos.
3. Utilizamos el microscopio y miramos cada
placa con el objetivo de 100x.
Cuestionario
1. ¿Qué son los colorantes?
Los colorantes son sustancias de origen
químico o biológico, generalmente tintes,
pigmentos, reactivos u otros compuestos,
empleados en la coloración de tejidos de
microorganismos para exámenes
microscópicos, debiendo tener al menos, un
grupo cromoforo que le proporcione la
propiedad de teñir
2. ¿Cuál es el tamaño promedio de las
bacterias?
Las bacterias son microorganismos
procariotas que presentan un tamaño de
unos pocos micrómetros (por lo general
entrem0, 5 y 5 um de longitud).
3. Indique las diferencias entre las tinciones
simples y las tinciones diferenciales
La diferencia entre la tinción simple y la
diferencial es que: En la tinción simple se

4. utiliza un solo colorante y todas sus
estructuras celulares se tiñen con la misma
tonalidad. Y en la tinción diferencial se
utilizan varios colorantes combinados y sus
estructuras celulares se diferencian en
función a los diferentes colorantes que fijan
de acuerdo con su propia constitución
química.
4. Investigue el nombre de dos tinciones
selectivas que no se hayan utilizado en el
laboratorio.
Describa y explique en qué consiste su
procedimiento.
Tinción Negativa: es el reverso del
procedimiento de tinción usual las células se
dejan si teñir, pero se colorea en cambio
medio que las rodea. Lo que se ve, por tanto,
es el perfil de las células. La sustancia
utilizada para la tinción negativa es un
material opaco que no contiene afinidad por
los constituyentes celulares y que
simplemente rodea las células, tal como la
tinta china (que es una suspensión de
partículas de carbono coloidal) o la nigrosina
(un colorante negro insoluble en el agua). La
tinción negativa es un modo satisfactorio de
aumentar el contraste de las células en la
microscopia óptica su mayor utilidad esta en
revelar la presencia de capsulas alrededor
de las células bacterianas

5. Tinción Estructural: es la producción de
color por superficies con estructuras
microscópicas, o a veces llamadas
esquemocros, lo suficiente finos para
interferir con la luz visible, a veces en
combinación con pigmentos
5. Explique en forma completa la teoría que
explica la tinción de Gram.
Varias son las teorías emitidas para explicar
el mecanismo de la tinción de Gram. Stearn
(1923) baso la suya en una combinación
química entre el colorante y las proteínas de
las bacterias, las proteínas y aminoácidos
son cuerpos anfóteros, esto es, tienen la
facultad de reaccionar con ácidos y con
bases, gracias a sus grupos amino y
carboxilo ; en soluciones acidas, reaccionan
con los ácidos y en soluciones alcalinas lo
hacen con las bases . De igual manera
comprobaron que la reacción de tinción de
las bacterias obedece a gran parte de su
contenido proteínico; estos microorganismos
se conducen como cuerpos anfóteros, al
combinarse con colorantes ácidos de
soluciones acidas y con los básicos en medio
alcalino.
6. De acuerdo a las características de la pared
bacteriana indique como se observan las
Gram-positivas y las Gram-negativas en las
placas teñidas.

6. Las bacterias Gram-positivas se ven de color
violeta, y las Gram-negativas de color rosa o
rojo
7. ¿Cuáles son las fuentes de errores más
comunes en las Gram?
Las fuentes de error son: Impurezas en los
reactivos de tinción.
Concentración inadecuada en los reactivos
de tinción.
PH inadecuado.
Tiempo de tinción incorrecto.
8. ¿Porque se necesita aceite de inmersión
para ver las bacterias?
Restringe el movimiento de la muestra,
además evita el rozamiento entre el cubre
objetos y el objetivo, generalmente se le
utiliza cuando vamos a observar con el
objetivo 100x. Otra función del aceite de
inmersión es evitar que la luz se desvíe; al
contrario lo que se pretende es que la luz
llegue concentrada hacia la muestra.
9. ¿Qué tipo de morfología bacteriana observo
en la muestra de sarro dental y del yogurt?

7. En la del sarro dental observamos: cocos,
diplococos, estreptococos, cristales de
carbohidratos y restos de comida.
Y en las de yogurt: bacilos, cocos
10. Mencione el
(Genero y Especie) de cinco bacterias
utilizadas en la fabricación del yogurt
Streptococcus thermophilus de género:
streptococcus y de especie: de bacteria
Gram+ anaeróbica facultativa también
alfahemolitica del grupo viridans
Lactobacillus bulgaricus de género:
Lactobacillus y de especie: Gram+
Lactobacillus acidophilus de género:
Lactobacillus y de especie: Gram+
Bifodobacterium es un género de bacterias
Gram+, anaeróbicas especies B.
adolescentis, B. angulatum, B. animalis, B.
asteroides, etc.
Lactobacillus casei es una especie de
bacteria anaeróbica Gram+ de genero
Lactobacillus

8. Morfologia Bacteriana del Sarro Dental

9. Morfologia Bacteriana del Yogurt
(Yogurt Estrella Azul Natural)

10. Conclusión
En este trabajo presentado podemos concluir lo siguiente: la
diferencia química es lo que permite distinguir las bacterias por
Tinción, el colorante reacciona con la célula bacteriana, pero
no reacciona con su medio exterior. Debido a esto la tinción es
importante para la microbiología ya que proporciona contraste
entre el microorganismo y el medio que lo rodea, permitiendo
diferenciarlas. También permite el estudio de las estructuras
internas de la célula bacteriana.

11. Bibliografía
Biología Pretince Hall
Biología de la Vida en la Tierra Fisiología
(Novena Edición)
https://es.wikipedia.org/wiki/Streptococcus_thermophilus
https://es.wikipedia.org/wiki/Lactobacillus_acidophilus