Este documento describe los procedimientos para extraer y separar los carotenos presentes en las zanahorias. Inicialmente, los pigmentos son extraídos de la zanahoria usando alcohol y éter de petróleo. Luego, los carotenos son separados de las xantofilas mediante cromatografía en columna usando alúmina como fase estacionaria y una mezcla de éter de petróleo y acetona como eluyente. Finalmente, las diferentes fracciones obtenidas son identificadas.

1. 1
JOSE LUIS MORALES
CODIGO:2111401304

2. En este trabajo se podrá encontrar la definición de los lípidos, su composición,
tipos y estructuras, además de algunos de los métodos más utilizados para
analizar y separarlos.
También se podrá encontrar la definición y tipos de terpenos que se
encuentran en la naturaleza y que en esta práctica son objeto de estudio así
mismo de los carotenos que son un tipo de tetra terpenos que constituyen
tanto la coloración de las zanahorias (que son los vegetales utilizados para esta
práctica) como su fuente nutrimental de aporte en vitaminas.
Igualmente ,cabe aclarar que este trabajo se realizo con un compendio de
información encontrada en diferentes sitios referenciados al final.Esto con el fin
de optimizar y tener claridad en los puntos explicados.
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3. Las grasas y aceites [ácidos
carboxílicos con cadenas
hidrocarbonadas de 4-36 carbonos
(en algunos completamente saturada
sin dobles enlaces y sin ramificar y
otros con uno o varios dobles enlaces);
unos cuantos contienen anillos de 3
carbonos o grupos hidroxilo] son
derivados de los ácidos grasos y sirven
de almacenamiento de energía.
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4. La cadena hidrocarbonada apolar explica la poca solubilidad de ácidos grasos en
agua. Cuanto más larga sea la cadena acíclica grasa y el menor número de dobles
enlaces, menor es la solubilidad del agua. El grupo ácido carboxílico es polar (y ioniza
a pH neutro) y justifica la ligera solubilidad en agua de los ácidos grasos de cadena
corta.
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5. Los lípidos más sencillos obtenidos a partir de los ácidos grasos son los
triacilgliceroles (triglicéridos, grasas o grasas neutras) compuestos de 3 ácidos
grasos en enlace éster con un solo glicerol.
 Triacilgliceroles simples: Mismo tipo de ácido graso en las 3 posiciones y se
denominan según el ácido graso que contienen. Ej. Triestearina 16:0 y
trioleína 18:1.
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6. ESTEROIDES
compuestos que comparten el núcleo esteroide de 4
anillos pero son más polares que el colesterol, y gran
número de isoprenoides que se sintetizan a partir de
precursores de 5 carbonos relacionados con el isopreno.
 Dentro de los isoprenoides se encuentran las vitaminas
A, D, E y K.
 Los principales grupos de hormonas esteroides son las
hormonas sexuales masculinas y femeninas y las
hormonas de la corteza suprarrenal, el cortisol y la
aldosterona.
 El fosfatidilinositol y sus derivados fosforilados son
componentes de las membranas plasmáticas de todas
las células eucarióticas.
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7. Vitamina A (retinol):Pigmento esencial para la visión. No se
presenta en los vegetales, pero muchas plantas contienen
carotenoides, pigmentos que absorben la luz y se pueden
convertir enzimáticamente en vitamina A (por rotura del β-
caroteno).
La deficiencia de vitamina A
 produce piel reseca, xeroftalmia, membranas mucosas
secas, desarrollo y crecimiento retardados, esterilidad en
animales machos y ceguera nocturna.
Vitamina D: Derivado del colesterol y precursor de una
hormona esencial en el metabolismo de calcio y fosfato en
vertebrados.
 La vitamina D3 (colecalciferol), se forma en piel mediante
una reacción fotoquímica.
 Abunda en aceites de hígado de pescado
 Su deficiencia produce formación defectuosa de huesos
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8. Vitamina E (tocoferoles):Contienen un anillo aromático sustituido y una
cadena lateral hidrocarbonada larga.
 Presente en huevos de gallina, aceites vegetales y germen de trigo.
 Su deficiencia produce piel escamosa, debilidad muscular y esterilidad.
 Previenen la destrucción oxidativa de lípidos de las membranas celulares al
reaccionar con las formas más reactivas del oxígeno destruyéndolas y
protegiendo a los ácidos grasos insaturados de la oxidación.
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9.  En general las mezclas complejas de lípidos se separan por
diferencia en su polaridad o solubilidad en disolventes
apolares.
 Los lípidos que contienen ácidos grasos en enlace éster o
amida se pueden hidrolizar (saponificar).
 Los lípidos neutros (triacilgliceroles, ceras, pigmentos, etc.) se
extraen fácilmente de los tejidos con éter etílico, cloroformo,
benceno.
 Los lípidos de membrana se extraen mejor con disolventes
orgánicos más polares como etanol o metanol.
 Una solución extractiva muy utilizada es una mezcla de
cloroformo, metanol y agua, inicialmente en proporciones
inmiscibles produciendo una sola fase (1:2:0,8, v/v/v).
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10.  La mezcla compleja de lípidos tisulares aún se puede fraccionar más
mediante procedimientos cromatográficos basados en la diferente
polaridad de cada clase de lípido.
En la cromatografía de adsorción se empaqueta un material polar insoluble,
como el gel de sílice, se aplica la mezcla de lípidos (en solución
clorofórmica) en la parte superior de la columna. Los lípidos polares se fijan
fuertemente al ácido silícico polar mientras que los neutros pasan
directamente a través de la columna y emergen en el primer lavado con
cloroformo.
También se pueden analizar por cromatografía de capa fina y
cromatografía gas-liquido ya que Algunos lípidos son de naturaleza volátil
pero la mayoría han de modificarse previamente para aumentar su
volatilidad.
 Ciertas clases de lípidos son susceptibles de degradación en condiciones
específicas. Por ejemplo, todos los ácidos grasos unidos por enlace éster
en triacilgliceroles, fosfolípidos y ésteres esteriolo se liberan mediante
tratamiento ácido o alcalino suave mientras que un tratamiento algo más
fuerte libera los ácidos grasos unidos por un enlace amida de los
esfingolípidos.
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El α-caroteno
• 38% más potente como
antioxidante que el beta
caroteno.
• Es potenciado cuando se
consume combinado junto
con vitamina E y selenio).
• Presenta menos actividad pro
vitamínica a su vez.
• Lo encontramos en la
zanahoria y la calabaza.

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• Extraer por medio de disolventes orgánicos
los pigmentos naturales de la zanahoria.
• Separar los carotenos de las xantofilas que se
encuentran en las zanahorias.
• Por medio de la técnica de cromatografía
en columna separar los carotenos que
existen en la zanahoria e identificarlos.
Si a una zanahoria se le extraen sus pigmentos naturales que le
dan coloración por medio de disolventes orgánicos y después al
obtener estos se realiza una separación de los pigmentos
constituyentes

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MATERIAL
• Bisturí
• Probeta 10, 50ml
• 3 matraces erlenmeyer 250ml
• 1 agitador de vidrio
• 1 espátula
• Pinzas de 3 dedos
• Soporte universal
• Columna para cromatografía
• Vidrio de reloj
• Pipeta volumétrica 10ml
• 3 vasos de precipitados de 150ml
• Embudo de separación
• Pipeta pasteur
• Vial ámbar
REACTIVOS
• Etanol
• Agua destilada
• Éter de petróleo
• Alúmina
• Acetona
MATERIAL BIOLÓGICO
• 10g de zanahoria.
EQUIPO
• Parrilla de calentamiento
• Rotavapor

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EXTRACCIÓN Y SEPARACIÓN
DE CAROTENOS
Picar 10
gramos de
zanahoria
• Calentar
con 25 ml
de alcohol
al 95%.
Filtrar
• Hacer
lavados
con
alcohol en
porciones
de 5 mL al
residuo.
Calentar la
solución
amarilla
(5 minutos)
• enfriar a T
ambiente
un embudo
de
separación
con 25 ml de
éter de
petróleo.
(Arriba
carotenos y
abajo
xantofilas)
Lavados con
alcohol para
eliminar
xantofilas y
concentrar
el extracto

16. 16 SEPARACIÓN DE CAROTENOS
Disolver 20g
de alúmina
en metanol
hasta
cubrirla
Introducirla en
la columna
para
cromatografía
.
-Introducir la
muestra por
medio de
una pipeta.
-Utilizar como
eluyente éter
de petróleo –
acetona
(95:5)
Recoger las
porciones de
diferentes
colores
obtenidas

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21. 21 Conclusiones
• La extracción con solventes constituye una herramienta útil para obtener
los productos naturales de interés.
• La cromatografía en columna ayuda a una mejor separación de los
compuestos de interés comparado con la extracción por solventes ya
que en una familia de compuestos pueden existir diferencias que
permitan la separación y en este caso se aprovecha la polaridad.
• La zanahoria es un alimento con gran contenido de carotenoides que
pueden ser aislados y separados de una manera practica en
laboratorio.
• Para confirmar la separación de los carotenos nombrados debió
haberse realizado la cromatografía en capa fina para confirmar si en
realidad solo había un componente o existían otros compuestos de
polaridad muy semejante a los carotenos obtenidos.

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[1] Lehninger, A. L. Lípidos En Principios de bioquímica.
Barcelona: Ed. Omega, 2ª ed., 1993. 240-264.
[2] Ascon-Bieto. Y Talon. “Fisiología y Bioquímica vegetal”.
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[3] Bilbao. M. Del R. “Análisis Fitoquímico preliminar”
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[4] Lambert. J.B.; H.F. Shurvert.; D.A. Lightner, R. Graham.
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[5] Silverstein R.M. y F.X Webster. “Spectrometric Identification
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N.Y. 1998.
[6] Acherson.R.M. “An Introduction to the Chemistry of
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