Manejo de tejido mamario

BIOPSIA DE MAMA

• Investigar la posibilidad de carcinoma.
• Tratar un carcinoma ya conocido
• Evaluación de masas palpables
• Lesiones mamográficas no palpables
• Secreción del pezón
• Tratamiento de lesiones inflamatorias

TIPOS DE BIOPSIAS MAMARIAS

• Biopsia por aspiración
con aguja fina
– Fijación en alcohol
(etílico, 96º)
• Biopsias por aguja de
corte (larga y delgada)
– Fijación en formol (10%,
neutro amortiguado)
• Biopsias incisionales
• Biopsias excisionales
• Re-biopsias
– Transoperatorias
– Estudio definitivo

BIOPSIAS CON AGUJA DE CORTE (TRU-CUT)

• Masas palpables, con
o sin guía radiológica
• Guía USG para masas
palpables
• Estereotáxica
• Descripción del
número de cilindros
• Alinearlos en paralelo
y planos
• Cortar tres niveles
histológicos

CARCINOMA DE LA GLANDULA MAMARIA
DIAGNOSTICO
• In situ o invasor

• Factores pronósticos
– Tamaño
– Bordes quirúrgicos
– Receptores hormonales y c-erbB-
2
– Ganglios linfáticos
– Otros (perfiles génicos, Paget,
etc)

DIAGNOSTICO
• Preanalítica
– Imagenología y clínica

• Analítica
– Intraoperatoria y diferida (imágenes, clínica y quirúrgica)

• Post-analítica
– Estudio histopatológico
– Estudio de inmunohistoquímica
– Estudios moleculares

DIAGNOSTICO

• Obtención de la muestra
• Identificación y orientación de la muestra
• Fijación de la muestra
• Envío a estudio anatomopatológico (intraoperatorio y
definitivo)
• Emisión del informe histopatológico
• Archivo de informe y del material estudiado

PATOLOGO
OBJETIVOS GENERALES
• Proveer de un diagnóstico
correcto (origen, tipo biológico,
grado de diferenciación,
extensión local, diseminación a
distancia, variables pronósticas
y respuesta a tratamiento)
• Control microscópico de
respuesta al tratamiento
(bordes)
• Diagnóstico de complicaciones
(naturales y iatrogénicas)

CIRUJANO
OBJETIVOS
• CIRUJANO

• Obtención de la
muestra
• Orientación precisa
de la muestra
• Orientación
topográfica exacta de
los bordes de sección

PATOLOGO
• Manejo del espécimen con toda la información proporcionada
• Orientación topográfica con identificación precisa de los bordes
• Hacer los cortes en correlación con los estudios
imagenológicos de la misma
• Emplear un sistema de análisis anatomopatólogico de la misma
(in situ y extraída)
• Proveer el tejido en condiciones óptimas para todos los tipos de
análisis que se requieran
• Emplear todos los tipos de análisis anatomopatológicos
disponibles para emitir un informe adecuado (histología, IHQ,
biologia molecular, etc)

PATOLOGO
INDICACIONES ESPECIALES
• Mastectomías totales y parciales con lesiones neoplásicas

• Orientación de la muestra e identificación precisa de los bordes
de sección quirúrgica
• Mapeo seriado de la muestra
• Estudio completo, seriado y sistemático de la muestra
• Emisión de un informe anatomopatológico con referencias
topográficas

PATOLOGO
• Mama izquierda

• Fragmento de
6.3x5.0x2.3 cm.
• Bordes quirúrgicos
identificados
• Guía metálica
introducida

PATOLOGO
• Marcaciones de
bordes y estudio
completo
seriado y
sistemático de
la pieza
operatoria

PATOLOGO
• Mama izquierda

• Pieza de 18.5x20.0
cm., con piel de 7.0
cm., pezón y
areola.
• Bordes quirúrgicos
identificados y
marcados

PATOLOGO
• Mama izquierda

• Estudio con cortes
seriados y sistemáticos
de todas las muestras:
en los cuadrantes
laterales y en relación a
la porción profunda de
la muestra con cavidad
cruenta irregular de
2.0x7.0x3.0 cm.

PATOLOGO
• Estudio completo,
seriados y sistemático
de la muestra con
orientación topográfica
precisa

CARACTERISTICAS PATOLOGICAS
DIAGNOSTICAS/PRONOSTICAS

• Tipo de espécimen
• Muestreo del ganglio linfático
• Tamaño del espécimen
• Lateralidad
• Invasor:
– Tamaño en milímetros
– Excluir componente intraductal


• Intraductal:
– Dimensión más grande, suma de varios focos
– Calcular volumen
• Tipo histológico
– Ductal (NOS),
– Tipo específico
– Carcinoma intraductal con microinvasión (< 1 mm)
• Carcinoma invasor único o múltiple
– Tamaño agregado


• Grado Histológico
– Calificación histológica de Nottingham
(túbulos,pleomorfismo nuclear, mitosis)
– Graduar todos los subtipos histológicos
– Necrosis
– Carcinoma intraductal: grado nuclear, necrosis
• Extensión de la invasión
• Ganglios linfáticos regionales
– Tamaño de la metástasis más grande
– Invasión extraganglionar
• Metástasis distantes


• Márgenes
• Invasión venosa/linfática
• Invasión perineural
• Microcalcificaciones
• Cavidad de la biopsia (relación a tumor residual)
• Estudios especiales
• Tratamiento previo
– Respuesta completa
– Respuesta parcial
– Mínima respuesta o ausente
– Tejido mamario no neoplásico

PRINCIPIOS DE LA FIJACIÓN CON FORMOL

• La mayoría de los laboratorios usa formol al 10%
que contiene 4% de formaldehído

• Cambios moleculares inducidos por el formol:
– Ocurren después de 24-48 hrs de fijación
– Menos tiempo: interrumpe el proceso de fijación

RETRASO EN LA FIJACIÓN DEL TEJIDO

• Incremento en la
degradación
proteolítica:
Inmunotinción débil o
ausente

• Protéolisis con
frecuencia ocasiona
asociaciones no
específicas con
moléculas no
relacionadas

RETRASO EN LA FIJACIÓN
Solución:

• La fijación debe iniciar tan pronto como el espécimen
se reseca (<30 min)

• Órganos y tumores sólidos deben cortarse para
asegurar su pronta fijación

• Situaciones particulares:
•Tomar un fragmento del espécimen, refrigerar la
pieza

FIJACIÓN DE ESPECÍMENES DE BIOPSIA
• Penetración del
formol rápida
• Después de 100
minutos: se ha
alcanzado una
fijación de la
mitad del
espécimen

FIJACIÓN DE < 24 HORAS

• Inicia en la periferia del
tejido, su interrupción:
– Centro “crudo”

• Solución:
– Cortes delgados de
3mm y fijación al
menos por toda una
noche

FIJACIÓN PROLONGADA

• Inmunotinción débil o ausente
• Daño irreversible de las
epítopes
• Solución:
– Especímenes post-fijados:
– Procesar 3 láminas
duplicando el tiempo de
exposición a las proteasas
– Mayores concentraciones
del anticuerpo
– Mayor tiempo de
incubación pueden ser de
ayuda

ARTIFICIOS POR MALA FIJACIÓN
• Reactividad leve o ausente
• Reactividad cruzada
• Soluciones utilizadas en el proceso de los tejidos:
– Deben cambiarse cada semana (o antes)
– Material de calidad
– El calor de la parafina durante el proceso de
bloqueo tisular no debe ser tan alta (<56º) para
evitar pérdida de epítopes

FIJACIÓN DEL TEJIDO
• El tipo de fijador, el retraso y la duración de la fijación:
– Impacto en la detección de ciertos antígenos
• Retraso en la fijación:
– Pérdida de la inmunoreactividad (receptores de
estrógenos)
• Sobrefijación: menos efecto en la expresión de RE
• ASCO/CAP HER2 (lineamientos):
– No menos de 6 hrs y no más de 48 hrs

• Lo antes posible y en la primera hora después de la
obtención de la muestra
• Formol al 10% (idóneo)
• Cantidad: 4 veces el volumen de la pieza
• No utilizar fijadores basados en alcoholes (2-5/
Pen-Fix): falsos positivos en IH e HIS
• Resección: 24-48 hrs
• Biopsia: 6-8 hrs

• Defectos en la fijación son más críticos que la
sobrefijación
• Muestras pequeñas con fijación de <6 horas no útil
para IH o HIS
• Piezas fijadas <24-48 horas:
– Falsos negativos
• No utilizar cortes almacenados por >6 semanas para
IH o por >6 meses para HIS
• Guardar los tejidos incluidos en parafina (bloques)

APLICACIONES DIAGNOSTICAS DE LA
IHQ EN CA MAMA

 La aplicación de IHQ cada vez más importante
 Aumento notable en el número de anticuerpos
 Notable mejoría en las técnicas de recuperación
antigénica
 Mejor conocimiento de la biología de las
lesiones.

Yeh LT, Mies C. Application of immunohistochemistry to breast lesions
Arch Pathol and Lab Med 2008;132:349-358

APLICACIONES DIAGNOSTICAS
1.- Lesiones proliferativas
- Hiperplasia ductal usual vs. atípica
- Lesiones papilares
 2.- Evaluación de invasión
- Pseudoinvasión
- Microinvasión
 3.- Lesión lobular vs. ductal
 4.- Identificación de diferentes tipos histológicos
- Carcinoma micropapilar invasor
- Carcinoma de células basales
- Carcinoma metaplásico

APLICACIONES DIAGNOSTICAS
1.- Lesiones proliferativas
- Hiperplasia ductal usual vs. atípica
- Lesiones papilares
 2.- Evaluación de invasión
- Pseudoinvasión
- Microinvasión
 3.- Lesión lobular vs. ductal
 4.- Identificación de diferentes tipos histológicos
- Carcinoma micropapilar invasor
- Carcinoma de células basales
- Carcinoma metaplásico
Enfermedad de Paget
 Predecir la posibilidad de respuesta a bloqueadores estrogénicos u otros
medicamentos
 Estadificación del ganglio centinela
 Carcinoma de mama metastásico

CASO CLINICO

 Mujerde 50 años con microcalcificaciones en la
mamografía.
Se hizo una biopsia por aguja y se diagnosticó como
carcinoma ductal in situ
 Posteriormente se realizó una biopsia excisional
 Areas de la biopsia excisional

Carcinoma ductal in situ en
adenosis vs
Carcinoma ductal infiltrante

EVALUACION DE INVASION

MARCADORES DE CELULAS
MIOEPITELIALES

- PROTEINA p63
- ACTINA DE MUSCULO LISO
- MIOSINA DE MUSCULO LISO DE
CADENAS PESADAS
- PROTEINA S-100
- CALPONINA
- CK 5, 14, 17, CD10

EVALUACION DE CELULAS
MIOEPITELIALES
MARCADOR SENSIBILIDAD ESPECIFICIDAD

Proteína S-100 Buena Baja

Actina de ML Buena Pobre

MMLCP Buena Excelente

Calponina Excelente Muy buena

CKs alto peso Muy buena Pobre
molecular

PROTEINA p63 EN MAMA NORMAL

DUCTO LOBULILLO

CONCLUSIONES
• La inmunotinción para marcadores de CME es muy
útil en la distinción lesiones invasoras de lesiones
benignas e intraductales en casos problemáticos
• Los anticuerpos varían en sensibilidad y
especificidad y los resultados se deben de
interpretar de acuerdo a estas variables
• Si los recursos son limitados, utilizar únicamente
MMLCP y proteína p63

DIAGNOSTICO

CARCINOMA DUCTAL INFILTRANTE

IHQ EN LESIONES PAPILARES

• BENIGNAS
– Papiloma intraductal solitario
– Papiloma intraductal múltiple
– Hiperplasia atípica con papiloma intraductal
• MALIGNAS
– Carcinoma in situ en papiloma
– Carcinoma in situ papilar
– Carcinoma papilar intraquístico
– Carcinoma papilar invasor
– Carcinoma papilar sólido
– Carcinoma invasor en carcinoma papilar intraquístico

LESIONES PAPILARES

MARCADORES DE CELULAS
MIOEPITELIALES

-PROTEINA p63
-ACTINA DE MUSCULO LISO
-MIOSINA DE MUSCULO LISO DE
CADENAS PESADAS
- PROTEINA S-100

Adv Anat Pathol 2007;14:108-119

LESIONES PROLIFERATIVAS BENIGNAS

• Hiperplasia ductal usual
– Heterogeneidad celular
– Patrón arquitectural
– Mezcla de tipos celulares (luminal CKs, basal, mioepitelial
– 34BETAe12 y Citoqueratina 5/6 (células basales y mioepiteliales)
100% positivas
• Hiperplasia ductal atípica o carcinoma intraductal de bajo
grado
– Apariencia monomorfa
– Expresión de un solo tipo de CKs
– Marcadores de un solo tipo (10% fenotipo de células basales)

MARCADORES DE IHQ Y SU INTERPRETACION
EN LAS LESIONES PAPILARES
TINCION PAPILOMA HDA/CDIS in CDIS PAPILAR CA. PAPILAR
IHQ INTRADUCTAL PAPILOMA ID INTRAQUISTICO

Receptores Minoría variable Población Usualmente Usualmente
Estrógenos de células neoplásica difusamente difusamente
epiteliales difusamente positivas positivas
positivas positiva
CK 5/6 y La mayoría de Población Células Células neoplásicas
34betaE12 las células neoplásica neoplásicas negativas
CK 14 epiteliales negativa negativas
positivas
MML-CP Positivas dentro Positivas en Negativas dentro Negativas dentro
Proteína p63 de las papilas áreas no del espacio del espacio ductal
neoplásicas ductal

Mulligan AM, O´Malley FP. Papillary Lesions of the Breast Adv
Anat Pathol 2007; 14:108-119

CÉLULAS MIOEPITELIALES
PRESENTES EN LAS LESIONES NO; células
PAPILARES ME ausentes
SI
CME AUSENTES EN
ÁREAS DE
Tallos fibrovasculares PROLIFERACIÓN
revestidos por CME EPITELIAL
en toda la lesión
Una sola
población de
Atipia arquitectural células epiteliales
o atipia citológica neoplásicas
Atipia
PAPILOMA de bajo grado en la citológica de
INTRADUCTAL proliferación alto grado
BENIGNO epitelial

NO SI
Carcinoma
papilar
Papiloma < 3 mm. > 3 mm. intraquístico
intraductal benigno (encapsulado)
con HDU

HDA en un CDIS en un
papiloma papiloma

IDENTIFICACION DE TIPOS
TUMORALES

- CA. DUCTAL vs. LOBULILLAR: E-CADERINA Y P120
- CA. DE CELULAS BASALES: CK 5/6, EGFR , TRIPLE
NEGATIVO
- CA. MICROPAPILAR INVASOR: EMA
- CA. METAPLASICO: PROTEINA P63

DIFERENCIACION ENTRE DUCTAL Y
LOBULILLAR

• Ambos inician en la unidad ducto-lobulillar
• Ductal in situ: precursor directo de carcinoma invasor
– Erradicación obligada
• Lobular in situ: no hay evidencia
• Patrón de presentación y diseminación son diferentes
– Ductal: unifocal, metástasis a pulmón y cerebro
– Lobulillar: multifocal, metástasis a serosas, hueso, médula ósea ,
tracto G-I y genital
• Casos con morfología intermedia o ambigua

LOBULILLAR

• E-caderina
• Molécula de adhesión célula a célula q16:22
• Diferenciar entre ca. ductal y lobulillar
• Tinción de membrana citoplásmica
• Expresión de CK de alto peso molecular (CK
903, CK1, 5, 10 y 14)
– Lobulillar: difuso
– Ductal: focal

LOBULILLAR

• 15% de los casos interpretación muy difícil
• p-120 catenina (patron de expresion inverso
a la e-caderina)
• Ca. ductal: patrón de membrana citoplásmica
• Ca. lobulillar: patrón de citoplasma

CARCINOMA MICROPAPILAR INVASOR

• No tallos fibrovasculares
• Estructura tubular en el centro
• No desmoplasia
• EMA
• Altamente predictivo de metástasis a
ganglios linfáticos (95%)
• Planificación de la cirugía

CARCINOMA SIMILAR A LAS CELULAS
BASALES

• Alto grado histológico (Nottingham 9)
• Necrosis geográfica
• Infiltrado linfoide y márgenes empujantes
• Sugerencia del tipo medular atípico
• Disminuye la expresión de e-caderina
• Aumenta la p120 membranosa

CARCINOMA SIMILAR A LAS CELULAS
BASALES

• TRIPLE NEGATIVO (R.E.-, R.P.- c-erbB-2 -)
• CK 5/6, EGFR, proteína p63, CD117 (inmunofenotipo
de células mioepiteliales)
• Aumenta la expresión de VEGF
• Componente in situ con este inmunofenotipo:
– Pronóstico pobre
– Mujeres pre-y post-menopáusicas
– Jóvenes: síndrome de cáncer ovárico-mamario hereditario
– Relacionado a BRCA-1

Cancer Res 66:4636-4644, 2006
Breast Cancer Res 9: , 2007
Am J Clin Pathol 125:512-528, 2006

INTERPRETACION DE RECEPTORES DE
ESTROGENOS Y PROGESTERONA
• Interpretar solamente el porcentaje
– Bajo (1 al 9%)
– Alto (> 10%)
– Negativo (0)
• ALLRED SCORE (% e intensidad)
• Ca ductal in situ: sí se deben de estudiar

• Tratamiento bloqueador de estrógenos
– < 10% + : Respuesta evidente
– 1-9% + : respuesta incompleta
– 0 (-) : sin respuesta

ENFERMEDAD DE PAGET

• Primario de la mama
• Melanoma maligno
• Carcinoma in situ de células escamosas
(enfermedad de Bowen)
• CK 7 y HER-2/neu (80-90%)

ENFERMEDAD DE PAGET DE LA MAMA

MARCADORES DE MAMA
-CITOQUERATINA 7
-HER-2/neu

CK 7 C-erbB-2

METASTASIS DE PRIMARIO MAMARIO
DESCONOCIDO

• CK 7
• CK 20
• GCDFP-15
• Mamoglobina (A y B)
• Receptores de estrógenos
• Receptores de progesterona
• Sitio: pulmón (TTF-1), colon (CDX-2)

CK 7

GCDFP-15 MAMOGLOBINA

GANGLIO CENTINELA

• Primer ganglio linfático que recibe el drenaje
linfático de un sitio específico

• Identificado por un colorante azul o radiomarcado
con detector de partículas gamma

• El colorante azul o agente radioactivo es inyectado
en la mama previo a la cirugia

GANGLIO CENTINELA

• Mama: usualmente en axila inferior
– axila superior, pared toracica lateral, cadena mamaria interna o ganglios
supraclaviculares
• Uno a tres ganglios
• Morbilidad menor a la de la disección axilar completa
• Proporciona información pronóstica y de estadificación
similar a la disección
• Frecuencia de falsos negativos
• Frecuencia de recurrencia axilar similar a la de la
disección
• Ha aumentado la frecuencia de detección de
micrometástasis

GANGLIO LINFATICO
CENTINELA

• Individuales, marcados adecuadamente, disecados
• Ocasionalmente, se envían varios en un paquete de tejido
adiposo
• Se cortan en rebanadas delgadas (0.2 cm) e incluyen en su
totalidad
• Uso de IHQ detecta micrometástasis (grupos aislados)
• IHQ detecta micrometástasis de 0.2 a 2 mm: significado
clínico controvertido
• Documentación cuidadosa y extensión de la enfermedad es
obligatoria, sobretodo si se usa IHQ

GANGLIO CENTINELA

GANGLIO CENTINELA

PANCITOQUERATINAS

GANGLIO CENTINELA
• Pancitoqueratinas AE1/AE3
• Solo AE1 o CK 8 no es recomendable
• Positividad a CK: no todos son metástasis
• Células neoplásicas aisladas < 2 mm
– (N0) (i+)
– Disección axilar

» Yeh IT, Arch Pathol Lab Med. 2008; 132:349-358

MARCADORES BIOLOGICOS DE PRONOSTICO
EN CANCER DE MAMA

 Marcadores morfológicos de pronóstico
 Estado de los receptores hormonales
 Oncoproteínas (c-erbB-2 y proteína p53)
 Indice de proliferación celular
 Angiogénesis

 Yeh TI, Mies C. Arch Pathol Lab Med 2008; 132:349-358

CARACTERISTICAS PATOLOGICAS DE
VALOR PRONOSTICO

 Tamaño del tumor
 Estado de los ganglios linfáticos
 Tipo histológico del tumor
 Grado nuclear
 Actividad mitósica

INMUNOHISTOQUIMICA

PERFIL MAMARIO

 RECEPTORES HORMONALES
Estrogenos, Progesterona
 c-erB-2 (HER-2/neu)
 Ki-67
 PROTEINA p53
 CD34 o CD31
FACTOR DE CRECIMIENTO ENDOTELIAL
VASCULAR

RECEPTORES HORMONALES
 Estrógenos y progesterona
 Factores de transcripción
 Enlazan y median los efectos celulares de
hormonas circulantes
 Localizacion: núcleo
 Acinos mamarios normales
 Intensidad y distribucion heterogénea, en tejido
normal
Santeusanio G. y cols., AIMM 8:275-284, 2000
Ferrero PM. Y cols. AIIMM 9:267-275, 2001

MARCADORES PRONOSTICOS Y
PREDICTIVOS

 Marcador pronóstico: factor independiente de pronóstico en
la evolución clínica
 Marcador predictivo: predice independiente la respuesta a
una terapia particular
 RE y RP: marcadores pronósticos débiles de evolución
clínica
 FUERTES MARCADORES PREDICTIVOS de respuesta
basado en tamoxifen
 Resistencia endócrina y progresión
 Diversidad clínica y biológica
Santeusanio G. y cols., AIMM 8:275-284, 2000
Ferrero PM. Y cols. AIIMM 9:267-275, 2001


LOS RECEPTORES DE ESTROGENOS INDUCEN Y
REGULAN A LOS RECEPTORES DE PROGESTERONA

EXPRESION COORDINADA
DE AMBAS HORMONAS

FIDELIDAD DEL EJE RE / RP

INMUNOHISTOQUIMICA
RECEPTORES DE ESTROGENOS

 FACTORES PREANALITICOS
 Fijación
 Tiempo mínimo necesario para resultados consistentes
 6 a 8 horas
 Recuperación
 Tipo de espécimen (trucut, resección)
 Es recomendable hacerlo en la biopsia por trucut (más casos
positivos 0-38%)

 Gown A, USCAP 2008
 Am J Clin Pathol 2003; 120:86-90
 J Clin Pathol 2007;60:299-302

INMUNOHISTOQUIMICA
RECEPTORES DE ESTROGENOS

 CALIFICACION, UMBRALES Y CUANTIFICACION
 Solamente positivos o negativos (cuál es el límite para
llamarlos “ positivos” ?)
 Cuantitativo (variable continua)


INTERPRETACION DE LOS

 SOLAMENTE POSITIVO O NEGATIVO (cuál es el
límite para llamarlo “positivo”?)
 Cuantitativo (variable continua)

 Am J Clin Pathol 2005;123:16-20

CLARAMENTE POSITIVOS

TODAVIA CLARAMENTE POSITIVOS

TODAVIA POSITIVOS?

PUNTOS DIAGNOSTICOS CLAVE

 Heterogeneidad en intensidad y distribución
 Cualquier tinción nuclear se considera
positivo (aún 1%, consenso del NIH en el
2000)
 Resultados falsos negativos: especímenes
de resección, trucut y baaf
 Valor predictivo a terapia hormonal

RECEPTORES HORMONALES NEGATIVOS
SIGNIFICADO CLINICO

 Comportamiento clínico agresivo

 Sin respuesta a terapia hormonal

 Repetir el análisis en tumores subsecuentes

Ferrero PM y cols. AIMM 9:267-275, 2001
Pertschuk LP. Cancer 66: 1663-1670, 1990

EVALUACION DEL HER-2/neu
POR INMUNOHISTOQUIMICA

 185-Kd, miembro de la familia del receptor de la tirosina cinasa
 Involucrado en varias vías regulatorias (proliferación, supervivencia, invasión y
movilidad celular)
 50% de homología molecular con el receptor del factor de crecimiento epidérmico
(HER-1)
 Producto del gen c-erbB-2 (cromosoma 17)
 Amplificación en varios adenocarcinomas

EVALUACION DEL HER-2/neu
POR INMUNOHISTOQUIMICA

 Predictor de pronóstico (marcador independiente de evolución clínica adversa)
Ganglios linfáticos metastásicos positivos: supervivencia libre de enfermedad más
corta
 Predictor de respuesta negativa a la quimioterapia (CMF)=
 Predictor de respuesta pósitiva a la quimioterapia (antraciclinas)
 Predictor de resistencia al tamoxifen
 Predictor de respuesta al trastuzumab (Herceptin)

Arch Pathol Lab Med 2007;131:1843

LO NUEVO EN LOS
LINEAMIENTOS
 Definición de los resultados positivos, negativos y
equívocos
 Requisitos de validación de la prueba
 Requisitos de fijación del tejido
 Criterios de rechazo
 Participación en pruebas de control de calidad
externos

ONCOPROTEINA HER-2/neu
INTERPRETACION DAKO HERCEPTEST

 NEGATIVO 0: no células positivas
 NEGATIVO 1+: menos del 10% de las
células con anillo delgado
 POSITIVO 2+: 10% o más de las células con
anillo delgado
 POSITIVO 3+: 30% o más con anillo grueso

ASCO-CAP
Arch Pathol Lab Med 2007

SISTEMA DE SCORING DEL HER-2 POR FISH
SISTEMA HER-2/CROMOSOMA 17

< 1.8: no amplificado
> 2.2: amplificado
 Entre 1.8 y 2.2: equívoco

2.2 a 5: baja amplificación
> 5: alta amplificación

Arch Pathol Lab Med 2007;131:1843

AMPLIFICACION DEL GEN c-erbB-2

 10 a 34% de los ca. mamarios (10-52%)
 Ganglios linfáticos metastásicos
 Tamaño mayor de 2 cm.
 Grado histológico y nuclear altos
 Receptores hormonales negativos
 Positivos: ca intraductal de alto gradop (comedocarcinoma), grado III,
apócrino
 Negativos: mucinoso, lobulillar, papilar, grado I
Rosenthal SI. AIMM 10:40-46, 2002

ONCOPROTEINA c-erbB-2
METODOS DE VALORACION

 INMUNOHISTOQUIMICA: DAKO HERCEPTEST
 MOLECULAR: HIBRIDACION IN SITU FLUORESCENTE (FISH)
 MOLECULAR: HIBRIDACION IN SITU CROMOGENICA

 CASOS PROBLEMA: POSITIVO 2+

Acs G y cols. 11:222-229, 2003
Anderson J y cols. AIMM 12:14-20, 2004

ONCOPROTEINA HER-2/neu
IHQ vs. FISH O CISH

 FISH DETECTA AMPLIFICACION DE GENES (METODO MOLECULAR)
 IHQ DETECTA SOBREEXPRESION DEL PRODUCTO DEL GEN
 FISH E IHQ: CORTES HISTOLOGICOS EN PARAFINA Y ASPIRADOS
 CONTROVERSIA EN PORCENTAJE DE FALSOS POSITIVOS POR IHQ


HIBRIDACION IN SITU CROMOGENICA vs.
FLUORESCENTE
FLUORESCENTE • CROMOGENICA

• Aprobado por la FDA • Aun no aprobado por la
FDA
• Muy costoso • Mucho mas barato
• Mayor tiempo, 3 a 4 dias • Tiempo: 1 a 2 dias

• Lectura inmediata, tarda de • Lectura no inmediata, tarda
2 a 3 dias el mismo tiempo que la
IHQ

Mod Pathol 18:1015-1021, 2005

INTERPRETACION DE LA HIBRIDACION IN
SITU CROMOGENICA PARA HER-2
POSITIVO AMPLIFICACION ALTA: más de 10 señales intranucleares por
núcleo en más del 50% de las células.
AMPLIFICACION BAJA: más de 5 a 10 señales intranucleares
por núcleo en más del 50% de las células.
NEGATIVO POLISOMIA DEL CROMOSOMA 17: 3 a 5 señales
intranucleares en más del 50% de los núcleos
DIPLOIDE: 1 a 2 señales en más del 50% de los núcleos

CISH POSITIVO A
AMPLIFICACION
ALTA
DEL GEN

POLISOMIA DEL
CROMOSOMA 17

CISH NEGATIVO A
AMPLIFICACION DEL GEN

IHQ HIS FLUORESCENTE HIS CROMOGENICA
Formol-congelado Igual Igual
Alcohol Requiere
entrenamiento
especializado para
realización e
interpretación
No caro Muy caro No caro
Susceptible de
automatización
Microscopio óptico Microscopio Microscopio óptico
fluorescente

MUCHAS GRACIAS POR
SU ATENCION

Manejo de tejido mamario

Recomendados

Recomendados

Más contenido relacionado

La actualidad más candente

La actualidad más candente (20)

Destacado

Destacado (20)

Similar a Manejo de tejido mamario

Similar a Manejo de tejido mamario (20)

Más de Centro Oncologico Estatal ISSEMyM

Más de Centro Oncologico Estatal ISSEMyM (8)

Último

Último (20)

Manejo de tejido mamario