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ElLaboratorioenelDiagnósticodela
Viruela delMono
InstitutoNacionaldeSalud
Lic. TM Johnny David Lucho
Amado Centro Nacional de Salud
Publica - INS
• En base a factores clínicos y epidemiológicos
• A cualquier persona que cumpla con la definición de caso
probable de viruela símica se le debe ofrecer la prueba.
• El tipo de muestra recomendado para confirmación, es el
material de lesión cutánea, con hisopos de exudado de
lesión, piel de más de una lesión o costras de lesión.
• La confirmación de laboratorio es mediante biología
molecular
PCR y NAAT
• Todas las manipulaciones de muestra de casos
sospechosos, probables o confirmados de viruela del mono
deben llevarse a cabo de acuerdo con un enfoque basado
en el riesgo.
Puntos clave para la indicación de la
prueba
• Virus ADN de doble cadena
• Genero Orthopoxvirus
• Familia Poxviridae
• Causan enfermedades en humanos y
animales
• Detección inicial en monos. Tambien se
encuentra
n
principalmente en roedores. Su reservorio es
indeterminado
• Presentacion tipica:
• Periodo prodrómico febril seguido por exantema
clásico lesiones induradas y umbilicadas. En
cabeza, cara y progresa a las extremidades y el
tronco
• Lesiones: máculas, pápulas, vesículas, pústulas y
costras. Tambien heridas o úlceras en boca y área
genital
Viruela del Mono -
MPXV
Característica deresistencia
• Poxviridae tiene extraordinaria
resistencia al secado. >tolerancia a
temperatura y al pH en comparación
con otros virus envueltos.
• Persistencia ambiental: materiales de
pacientes infectados (p. ej., costras
dérmicas) o fómites (p. ej., ropa de
cama) permanecen infecciosos
durante meses.
• Pero, son sensibles a los
desinfectantes comunes, algo
menos a desinfectantes orgánicos,
debido contenido reducido de lípidos
en la envoltura.
RAPID RISK ASSESSMENT Monkeypox multi-country outbreak 23 May 2022. ECDC
Environmental resistance, disinfection, and sterilization of poxviruses Friedrich v.
Rheinbaben
• Debe cumplirse procedimientos
estandarizados para la obtención
de la muestra.
• Cumplir adecuadamente con el
procedimiento de colocarse y
quitarse el EPP
• Usar precauciones estándares y
evitar la generación de aerosoles
infecciosos
• Desinfectante Lejía 0.5%,
amonio cuaternario o alcohol
Características generales para la obtención, envió y almacenamiento
de muestras
Precauciones
“Prevenir la
diseminación de
microorganismos
entre el paciente,
personal
hospitalario,
visitantes y
equipos”
•Precauciones de transmisión por contacto
•Precauciones de transmisión aérea
•Precauciones de transmisión por gotas
Transmisión
• A través del contacto directo con llagas
infecciosas, costras o fluidoscorporales.
• Por secreciones respiratorias durante el
contacto cara a cara, prolongado.
• Contacto íntimo entre personas, relaciones
sexuales, besarse, abrazarse o tocarse
partes del cuerpo con llagas.
 Materiales e insumos
o Tubos para extracción de sangre al vacío sin anticoagulante o con gel separador
o Hisopos de dacrón o poliéster
o Medio de transporte viral
o Agujas para sistema al vacio
o Capuchón (Holder)
o Ligadura
o Algodón
o Alcohol al 70%
o Venditas adhesivas o esparadrapo
o Hoja de bisturí o aguja hipodérmica
o Caja para desecho de punzocortantes
o Campo quirúrgico descartable
o Envases para transporte por triple embalaje.
o Refrigerante
EPP, Materiales e
Insumos
 Considerar los siguientes EEP:
o Mandil, gorro y cubre calzados
descartables
o Guantes (02 pares),
o Protector facial o lentes protectores,
o Respiradores N95 o equivalente,
Obtención de
muestra
Obtención de
muestra
• La vacunación reciente puede interferir
con las pruebas serológicas.
• La detección de anticuerpos en plasma o
suero no debe usarse sola para el
diagnóstico de la viruela del simio
• Muestras como orina, semen, hisopado rectal
y/o genital, no están destinados a fines de
diagnóstico de rutina y solo para
investigación
Otras consideraciones para la obtención de
muestras
• Los muestras deben almacenarse refrigerados
o congelados en el transcurso de una hora
después de obtención o congelarse posterior a
7 días de obtenida la muestra.
• Deben evitarse los ciclos repetidos de
congelación y descongelación porque pueden
reducir la calidad de las muestras.
• No es recomendable el cultivo del virus
Manejo de muestras
RECOMENDACIONES
Reducir el riesgo de infección de las personas, a
través del cumplimiento de las precauciones
estándar, de contacto y por gotas: lavado de
manos, uso de mascarilla, ventilación de
ambientes, desinfección de superficies, así como
el aislamiento de los casos sospechosos,
probables o confirmados por 21 días (desde la
fecha de inicio de síntomas) o hasta la resolución
del exantema vesicular
CONTROL DE RIESGOS. SEGURIDAD Y SALUD EN
EL TRABAJO
Uso adecuado delEPP
Uso adecuado del EPI de acuerdo al trabajoa
realizar
Guante
1
Guante
2
Uso adecuado del EPP de acuerdo al trabajoa
realizar
Uso adecuado del EPI de acuerdo al trabajoa
realizar
Hisopos
•Deben ser hisopos de fibras sintéticas
(rayón, poliester)
•NO se debe usar hisopos de alginato de
Calcio o algodón, ni hisopos con
mangos/palo de madera porque puede
inhibir algunas pruebas de laboratorio
Materiales para la muestra
Medio de Transporte Viral
(MTV)
Medio de cultivo celular
Solución salina
Infusión Triptosa-fosfato
Caldo infusión de ternera
Proteína (albúmina bovina o gelatina)
Antibióticos
Antimicóticos
Preparación para laobtención
• Campo quirúrgico
• Bolsa o lugar para materiales a
desinfectar: ligadura, capuchón.
• Esparadrapo y algodón o venditas
• Caja punzocortante expuesto
• Bolsa de residuos
• Envase secundario con soporte o
gradilla
• Alcohol, alcohol –gel
• Materiales para la obtención de las
muestras
 Desinfecte la lesión utilizando algodón con alcohol 70% y
deje secar.
 Use un bisturí desechable (o una aguja hipodérmica
estéril) para abrir la parte superior de la vesícula o pústula
(no enviar el bisturí o la aguja).
 El líquido de la lesión se puede recoger mediante un
hisopo. (use un hisopo estéril de poliéster o dacrón) y frote
vigorosamente la base de la lesión.
 Coloque los hisopos en un tubo que contenga 2-3 ml de
medio de transporte viral, inmediatamente después de
cada proceso; finalmente, cerrarlo y conservarlo de 2 a
8ºC
 Conserve la piel esfacelada de la lesión y/o costras en
otro tubo con medio de transporte viral.
Obtención de muestra de Hisopado de fluido/Fluido de
lesión
Conservación de las muestras
• Las muestras deben ser conservadas en cadena de frío ( 2 - 8° C),
enviar al laboratorio de preferencia dentro de las 24 horas. > 7 días
congelación.
El traslado de muestras deben usar un triple envase:
• Envase primario, depósito donde se coloca la muestra (medio de
transporte viral).
• Envase secundario, recipiente para proteger la muestra del envase
primario.
• Tercer Contenedor , recipiente cooler o caja de tecnopor donde se
coloca cojines de hielo para conservar la muestra en cadena de
frío ( 2 - 8°).C)
Conservación y transporte de muestras
NTS Nº153-MINSA/2019/INS: “Norma Técnica de Salud sobre Preparación,
Embalaje y Documentación para el Transporte Seguro de Sustancias”
TripleEnvase
+ +
Embalaje yetiquetado
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• El triple envase constará de:
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  • 1. ElLaboratorioenelDiagnósticodela Viruela delMono InstitutoNacionaldeSalud Lic. TM Johnny David Lucho Amado Centro Nacional de Salud Publica - INS
  • 2. • En base a factores clínicos y epidemiológicos • A cualquier persona que cumpla con la definición de caso probable de viruela símica se le debe ofrecer la prueba. • El tipo de muestra recomendado para confirmación, es el material de lesión cutánea, con hisopos de exudado de lesión, piel de más de una lesión o costras de lesión. • La confirmación de laboratorio es mediante biología molecular PCR y NAAT • Todas las manipulaciones de muestra de casos sospechosos, probables o confirmados de viruela del mono deben llevarse a cabo de acuerdo con un enfoque basado en el riesgo. Puntos clave para la indicación de la prueba
  • 3. • Virus ADN de doble cadena • Genero Orthopoxvirus • Familia Poxviridae • Causan enfermedades en humanos y animales • Detección inicial en monos. Tambien se encuentra n principalmente en roedores. Su reservorio es indeterminado • Presentacion tipica: • Periodo prodrómico febril seguido por exantema clásico lesiones induradas y umbilicadas. En cabeza, cara y progresa a las extremidades y el tronco • Lesiones: máculas, pápulas, vesículas, pústulas y costras. Tambien heridas o úlceras en boca y área genital Viruela del Mono - MPXV
  • 4.
  • 5. Característica deresistencia • Poxviridae tiene extraordinaria resistencia al secado. >tolerancia a temperatura y al pH en comparación con otros virus envueltos. • Persistencia ambiental: materiales de pacientes infectados (p. ej., costras dérmicas) o fómites (p. ej., ropa de cama) permanecen infecciosos durante meses. • Pero, son sensibles a los desinfectantes comunes, algo menos a desinfectantes orgánicos, debido contenido reducido de lípidos en la envoltura. RAPID RISK ASSESSMENT Monkeypox multi-country outbreak 23 May 2022. ECDC Environmental resistance, disinfection, and sterilization of poxviruses Friedrich v. Rheinbaben
  • 6. • Debe cumplirse procedimientos estandarizados para la obtención de la muestra. • Cumplir adecuadamente con el procedimiento de colocarse y quitarse el EPP • Usar precauciones estándares y evitar la generación de aerosoles infecciosos • Desinfectante Lejía 0.5%, amonio cuaternario o alcohol Características generales para la obtención, envió y almacenamiento de muestras
  • 7. Precauciones “Prevenir la diseminación de microorganismos entre el paciente, personal hospitalario, visitantes y equipos” •Precauciones de transmisión por contacto •Precauciones de transmisión aérea •Precauciones de transmisión por gotas
  • 8. Transmisión • A través del contacto directo con llagas infecciosas, costras o fluidoscorporales. • Por secreciones respiratorias durante el contacto cara a cara, prolongado. • Contacto íntimo entre personas, relaciones sexuales, besarse, abrazarse o tocarse partes del cuerpo con llagas.
  • 9.  Materiales e insumos o Tubos para extracción de sangre al vacío sin anticoagulante o con gel separador o Hisopos de dacrón o poliéster o Medio de transporte viral o Agujas para sistema al vacio o Capuchón (Holder) o Ligadura o Algodón o Alcohol al 70% o Venditas adhesivas o esparadrapo o Hoja de bisturí o aguja hipodérmica o Caja para desecho de punzocortantes o Campo quirúrgico descartable o Envases para transporte por triple embalaje. o Refrigerante EPP, Materiales e Insumos  Considerar los siguientes EEP: o Mandil, gorro y cubre calzados descartables o Guantes (02 pares), o Protector facial o lentes protectores, o Respiradores N95 o equivalente,
  • 12. • La vacunación reciente puede interferir con las pruebas serológicas. • La detección de anticuerpos en plasma o suero no debe usarse sola para el diagnóstico de la viruela del simio • Muestras como orina, semen, hisopado rectal y/o genital, no están destinados a fines de diagnóstico de rutina y solo para investigación Otras consideraciones para la obtención de muestras
  • 13. • Los muestras deben almacenarse refrigerados o congelados en el transcurso de una hora después de obtención o congelarse posterior a 7 días de obtenida la muestra. • Deben evitarse los ciclos repetidos de congelación y descongelación porque pueden reducir la calidad de las muestras. • No es recomendable el cultivo del virus Manejo de muestras
  • 14. RECOMENDACIONES Reducir el riesgo de infección de las personas, a través del cumplimiento de las precauciones estándar, de contacto y por gotas: lavado de manos, uso de mascarilla, ventilación de ambientes, desinfección de superficies, así como el aislamiento de los casos sospechosos, probables o confirmados por 21 días (desde la fecha de inicio de síntomas) o hasta la resolución del exantema vesicular CONTROL DE RIESGOS. SEGURIDAD Y SALUD EN EL TRABAJO
  • 16. Uso adecuado del EPI de acuerdo al trabajoa realizar
  • 18.
  • 19. Uso adecuado del EPP de acuerdo al trabajoa realizar
  • 20. Uso adecuado del EPI de acuerdo al trabajoa realizar
  • 21. Hisopos •Deben ser hisopos de fibras sintéticas (rayón, poliester) •NO se debe usar hisopos de alginato de Calcio o algodón, ni hisopos con mangos/palo de madera porque puede inhibir algunas pruebas de laboratorio Materiales para la muestra Medio de Transporte Viral (MTV) Medio de cultivo celular Solución salina Infusión Triptosa-fosfato Caldo infusión de ternera Proteína (albúmina bovina o gelatina) Antibióticos Antimicóticos
  • 22. Preparación para laobtención • Campo quirúrgico • Bolsa o lugar para materiales a desinfectar: ligadura, capuchón. • Esparadrapo y algodón o venditas • Caja punzocortante expuesto • Bolsa de residuos • Envase secundario con soporte o gradilla • Alcohol, alcohol –gel • Materiales para la obtención de las muestras
  • 23.
  • 24.  Desinfecte la lesión utilizando algodón con alcohol 70% y deje secar.  Use un bisturí desechable (o una aguja hipodérmica estéril) para abrir la parte superior de la vesícula o pústula (no enviar el bisturí o la aguja).  El líquido de la lesión se puede recoger mediante un hisopo. (use un hisopo estéril de poliéster o dacrón) y frote vigorosamente la base de la lesión.  Coloque los hisopos en un tubo que contenga 2-3 ml de medio de transporte viral, inmediatamente después de cada proceso; finalmente, cerrarlo y conservarlo de 2 a 8ºC  Conserve la piel esfacelada de la lesión y/o costras en otro tubo con medio de transporte viral. Obtención de muestra de Hisopado de fluido/Fluido de lesión
  • 25. Conservación de las muestras • Las muestras deben ser conservadas en cadena de frío ( 2 - 8° C), enviar al laboratorio de preferencia dentro de las 24 horas. > 7 días congelación. El traslado de muestras deben usar un triple envase: • Envase primario, depósito donde se coloca la muestra (medio de transporte viral). • Envase secundario, recipiente para proteger la muestra del envase primario. • Tercer Contenedor , recipiente cooler o caja de tecnopor donde se coloca cojines de hielo para conservar la muestra en cadena de frío ( 2 - 8°).C) Conservación y transporte de muestras NTS Nº153-MINSA/2019/INS: “Norma Técnica de Salud sobre Preparación, Embalaje y Documentación para el Transporte Seguro de Sustancias”
  • 27. Embalaje yetiquetado BIOLOGICALSUBSTANCE CATEGORYB UN 3373 • El triple envase constará de: 1.Recipiente primario : se envolverá con un material absorbente por si hubiera un derrame accidental. 2. Embalaje secundario 3. Embalaje exterior rígido: Se identificará con el símbolo correspondiente y con la designación oficial de transporte: “Sustancia biológica de categoríaB” UN 3373 BIOLOGICAL S U BSTANCE CAT EGORY B
  • 28. Ficha