En esta practica se realizan experimentos para identificar las proteínas, como la configuración y la identificación por el reactivo BIURET.

1. Materia:
BIOQUIMICA
Maestro:
MARTHA GABRIELA ACEVES MORALES
Trabajo:
REPORTE DE PRÁCTICA
Equipo 6
Aldo Rodrigo Pescador Aguilar
Carlos Samuel Becerra Franco
Darío Abel Baruch Martínez
Elizabeth Flores Gómez
Jorge Miguel Martínez Gonzales
Enrique Ramírez Rivera
Grupo:
6 D
Especialidad:
Laboratorio Clínico
31/5/2017
CETIS 62
PRACTICA No.6
IDENTIFICACION DE PROTEINAS

2. OBJETIVO: Realizar experimentos para identificar las proteínas, como la
configuración y la identificación por el reactivo BIURET.
MARCO TEORICO:
Proteína, cualquiera de los numerosos compuestos orgánicos constituidos por
aminoácidos unidos por enlaces peptídicos que intervienen en diversas funciones
vitales esenciales, como el metabolismo, la contracción muscular o la respuesta
inmunológica. Se descubrieron en 1838 y hoy se sabe que son los componentes
principales de las células y que suponen más del 50% del peso seco de los animales.
El termino proteína deriva del griego proteico, que significa primero.
El plasma sanguíneo normal contiene de 6.5 a 7.5gr de proteínas por 100al. Las
proteínas plasmáticas pueden dividirse en 3 grupos: a) fibrinógenos; b) globulinas; c)
albuminas. Cada una de estas variedades pueden ser precipitadas en bases a su
solubilidad en soluciones salinas, y se logra una separación simple o burda mediante
precipitación salina de dichas proteínas o fuerzas iónicas diferentes.
La precipitación salina con sulfato de amonio es una etapa preliminar útil en muchas
técnicas de aislamiento de proteínas en particular de enzimas. Existen 2 tipos de lograr
esta etapa de purificación o bien sea añadiendo sulfato de amonio sólido, o bien sea
con una solución saturada (100 por 100) neutra del mismo. En el primer caso, existe
ventaja de mantener en un mínimo el aumento de volumen; en cambio la solución
saturada presenta la ventaja de una manipulación más cómoda.
Las moléculas proteicas van desde las largas fibras insolubles que forman el tejido
conectivo y el pelo, hasta los glóbulos compactos solubles, capaces de atravesar la
membrana celular y desencadenar reacciones metabólicas. Tienen un peso molecular
elevado y son específicas de cada especie y de cada uno de sus órganos. Se estima
que el ser humano tiene unas 30.000 proteínas distintas, de las que solo un 2% se ha
descrito con detalle. Las proteínas sirven sobre todo para construir y mantener las
células, aunque su descomposición química también proporciona energía, con un
rendimiento de 4 kilocalorías por gramo, similar al de los hidratos de carbono.
Las enzimas son proteínas, al igual que la insulina y casi todas las demás hormonas,
los anticuerpos del sistema inmunológico y la hemoglobina…

3. REACCIONES COLOREADAS ESPECÍFICAS (BIURET)
MATERIAL
- 1 gradilla
- Pescado, espinaca, levadura,
- Tubos de ensaye

4. - Albúmina, grenetina y caseína
REACTIVOS
- NaOH al 10%
- Sulfato cúprico al 1% en gotero
PROCEDIMIENTO
1. En cada tubo de ensaye colocar 2ml de solución de proteína (diluida al 1%).
2. Añadir a cada tubo 2ml de NaOH al 10% y agitar.

5. 3. Agregar gota a gota solución de sulfato cúprico al 1% hasta la aparición de un
color rosa o violeta (máximo 10 gotas).
4. Reportar a que gota aparece el color.
Proteína Resultado
Pescado Positivo
Espinaca Positivo
Levadura Positivo
Caseína Positivo
Albumina Positivo
Grenetina Positivo

6. REACCION XANTOPROTEICA
MATERIAL REACTIVOS
Tubos de ensaye proteínas
Gradilla NaOH concentrado (gotero)
Baño maría HNO3 concentrado
PROCEDIMIENTO
1. Colocar en cada tubo de ensaye 3ml de proteína.
2. Añadir con cuidado y lentamente 1ml de HNO3 concentrado.
3. Calentar en baño maría por 2min, y enfriar a chorro de agua.
4. Agregar gota a gota solución de NaOH concentrado (máximo 10 gotas) a él vire
de color. Observar y reportar resultados.
COAGULACION POR CALOR
MATERIAL REACTIVOS
16 Tubos de ensaye Tetracloruro de carbono
Gradilla Butanol
Baño maría Proteínas

7. NaOH concentrado con gotero
Ácido acético al 1%
Acetona
Éter

8. PROCEDIMIENTO
1. Calentar a hervir 5ml de solución de proteína
2. Añadir 2 gotas de ácido acético al 1%
3. Colocar en 4 tubos, la solución repartida por igual y agregar de la siguiente
manera:
Tubo1= 1ml acetona
Tubo2= 1ml de éter
Tubo3= 1ml de butanol
Tubo4= 1ml tolueno
4. Agitar fuertemente para tratar de disolver el coagulo. Reportar en tabla.
5. Los tubos que no disolvieron el coagulo, agregar 3 gotas de NaOH
concentrado, y agitar.
6. Observar y anotar diferencias.
Resultados
Proteína Acetona Éter Butanol Tolueno
Espinacas Soluble Soluble Soluble Soluble
Levadura Soluble Soluble Soluble Soluble
Grenetina Soluble Soluble Soluble Soluble
Pescado Soluble Soluble Soluble Soluble
Albumina No Soluble No Soluble No Soluble No Soluble
Leche Soluble Soluble Soluble Soluble

9. OBTENCION DE CASEINA DE LA LECHE
MATERIAL REACTIVOS
2 vasos de precipitados de 250ml leche entera
1 probeta de 100ml éter
1 embudo acetona
2 papel filtro HCl 0.2N
PROCEDIMIENTO
1. Colocar 100ml de leche en un vaso de precipitado
2. Agregar 100ml de agua destilada
3. Con una pipeta añadir HCl 0.2N hasta obtener un pH de 4.8
4. Dejar reposar hasta que el sedimento precipite.

10. 5. Suspender el precipitado en 100ml de agua destilada y dejar reposar.
6. Repetir este lavado 4 veces.
7. Filtrar el precipitado final en un embudo Buchner, colectando en el papel la
proteína.
8. Suspender la caseína en 25ml de agua destilada, agitar para homogeneizar y
filtrar. Repetir 4 veces.
9. Después del último lavado, suspender la proteína en 5ml de éter y 5ml de
acetona, y filtrar.
10.Colocar el polvo obtenido en un desecador con cloruro de calcio y pesar el
polvo 24 horas después.
RESULTADOS Y OBSERVACIONES
Pudimos obtener la proteína de la leche (caseína) parcialmente debido a la falta de
tiempo.
Observaciones:
En esta práctica nos faltó algo de organización pues al final se nos terminó el tiempo
y no logramos terminar la práctica a tiempo.
Es muy importante nuestra capacidad de precisión y atención, ya que las pruebas se
realizan por método cuantitativo y es importante poner atención al momento de poner
las gotas de reactivo y así observar en que tiempo aparecen las coloraciones.

11. CUESTIONARIO
1. ¿Cómo se manifiesta la desnaturalización de las PROTEINAS?
La desnaturalización de proteínas es la perdida de las estructuras de orden
superior (secundaria, terciaria y cuaternaria) quedando la cadena polipeptidica
reducida a un polímero estadístico sin ninguna estructura tridimensional fija.
Provoca efectos como:
o Perdida de las propiedades biológicas.
o Disminuye considerablemente su solubilidad.
o Cambio de las propiedades hidrodinámicas: aumento de viscosidad y
disminución del coeficiente de fusión
2. ¿Cuál de los tres agentes utilizados tiene mayor poder de desnaturalización?
El ácido clorhídrico ya que tiene mayor pérdida de conformación nativa por ser
un ácido y provocar cambios en sus propiedades.
3. ¿Cómo podríamos saber que una sustancia desconocida es una proteína?
Por medio de la prueba de Biuret, ya que esta se usa para detectar proteínas.
4. Que coloración da la reacción del Biuret?
Se puede observar una coloración violeta de la cual su intensidad dependerá
de la concentración de proteínas.
5. ¿Una proteína coagulada podría dar la reacción del Biuret?
Sí, eso se debe a que el reactivo reacciona con cualquier proteína liquida o
sólida.
6. Si se realiza la reacción del Biuret sobre un aminoácido como la Glicina ¿es
positiva o negativa? ¿Por qué?
Si se analiza solo un aminoácido la reacción seria negativa pues no hay ningún
enlace peptídico ya que este se da entre dos aminoácidos.
7. Explica la reacción Xantoproteíca.
La reacción xantoproteica es un método que se puede utilizar para determinar
la presencia de proteínas solubles en una solución, empleando ácido nítrico
concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas proteínas con
aminoácidos portadores de grupos aromáticos, especialmente en presencia de

12. tirosina. Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un álcali, se torna color
amarillo oscuro.
CONCLUSIONES
Las proteínas constituyen una de las moléculas más importantes en el organismo ya
que cumplen muchas funciones. Las proteínas están constituidas por aminoácidos y
debido a esto los métodos que llevamos acabó en esta ocasión se basan en el
reconocimiento de los aminoácidos.
Se puede concluir que a pesar de las dificultades que se nos presentaron pudimos
completar la práctica adecuadamente.