bioquimica practica proteinas

1. CETIS 62
PRACTICA No.6
IDENTIFICACION DE PROTEINAS
LILIANA MARGARITA ALMANZA LOPEZ
6° E LABORATORIO CLINICO
OBJETIVO: Realizar experimentos para identificar las proteínas, como la
configuración y la identificación por el reactivo BIURET.
MARCO TEORICO:
Las proteínas son biomoleculas formadas por cadenas lineales de aminoácidos.
Por sus propiedades físico-químicas, las proteínas se pueden clasificar en proteínas simples
(holoproteidos), formadas solo por aminoácidos o sus derivados; proteínas conjugadas
(heteroproteidos), formadas por aminoácidos acompañados de sustancias diversas, y
proteínas derivadas, sustancias formadas por desnaturalización y desdoblamiento de las
anteriores. Las proteínas son necesarias para la vida, sobre todo por su función plástica
(constituyen el 80 % del protoplasma deshidratado de toda célula), pero también por sus
funciones biorreguladoras (forman parte de las enzimas) y de defensa (los anticuerpos son
proteínas).
Las proteínas desempeñan un papel fundamental para la vida y son las biomoléculas más
versátiles y diversas. Son imprescindibles para el crecimiento del organismo y realizan una
enorme cantidad de funciones diferentes, entre las que destacan:
• Contráctil (actina y miosina)
• Enzimática (Ej.: sacarasa y pepsina)
• Estructural. Esta es la función más importante de una proteína (Ej.: colágeno)
• Homeostática: colaboran en el mantenimiento del pH (ya que actúan como un tampón
químico)
• Inmunológica (anticuerpos)

2. • Producción de costras (Ej.: fibrina)
• Protectora o defensiva (Ej.: trombina y fibrinógeno)
• Transducción de señales (Ej.: rodopsina).
Las proteínas están formadas por aminoácidos. Las proteínas de todos los seres vivos están
determinadas mayoritariamente por su genética (con excepción de algunospéptidos
antimicrobianos de síntesis no ribosomal), es decir, la información genética determina en gran
medida qué proteínas tiene una célula, un tejido y un organismo.
Las proteínas se sintetizan dependiendo de cómo se encuentren regulados los genes que las
codifican. Por lo tanto, son susceptibles a señales o factores externos. El conjunto de las
proteínas expresadas en una circunstancia determinada es denominado proteoma.
REACCIONES COLOREADAS ESPECÍFICAS (BIURET)
MATERIAL
1 gradilla
pescado, espinaca, levadura,
Tubos de ensaye
Albúmina, grenetina y caseína
REACTIVOS
NaOH al 10%
Sulfato cúprico al 1% en gotero
proteína Gota a la que se coloreo
Espinaca No tomo color
Albumina 3
Levadura 5
Caseína 5
Pescado 2
grenetina 7
Observaciones: algunas proteínas no son de fácil dilución como las espinacas y el
pescado que se tienen que diluir de 25-1

3. PROCEDIMIENTO
1. En cada tubo de ensaye colocar 2ml de solución de proteína (diluida al 1%).
2. Añadir a cada tubo 2ml de NaOH al 10% y agitar.
3. Agregar gota a gota solución de sulfato cúprico al 1% hasta la aparición de
un color rosa o violeta (máximo 10 gotas).
4. Reportar a que gota aparece el color.
REACCION XANTOPROTEICA
MATERIAL REACTIVOS
Tubos de ensaye proteínas
Gradilla NaOH concentrado (gotero)
Baño maría HNO3 concentrado

4. PROCEDIMIENTO
1. Colocar en cada tubo de ensaye 3ml de proteína.
2. Añadir con cuidado y lentamente 1ml de HNO3 concentrado.
3. Calentar en baño maría por 2min, y enfriar a chorro de agua.
4. Agregar gota a gota solución de NaOH concentrado (máximo 10 gotas) a él
vire de color. Observar y reportar resultados.
proteína Gotas
pescado 7
grenetina 10
levadura 10
albumina 8
espinaca No cambia de color
Caseína de la leche 9
COAGULACION POR CALOR
MATERIAL REACTIVOS
16 Tubos de ensaye Acido acético al 1%
Gradilla Acetona
Baño maría Éter
Tetracloruro de carbono
Butanol
Proteínas
NaOH concentrado con
gotero
PROCEDIMIENTO
1. Calentar a hervir 5ml de solución de proteína
2. Añadir 2 gotas de acido acético al 1%
3. Colocar en 4 tubos, la solución repartida por igual y agregar de la siguiente
manera:
Tubo1= 1ml acetona
Tubo2= 1ml de éter
Tubo3= 1ml de butanol
Tubo4= 1ml tolueno
4. Agitar fuertemente para tratar de disolver el coagulo. Reportar en tabla.

5. 5. Los tubos que no disolvieron el coagulo, agregar 3 gotas de NaOH
concentrado, y agitar.
6. Observar y anotar diferencias.
resultados acetona éter butanol Tolueno
Albumina insoluble insoluble insoluble insoluble
Espinaca soluble soluble insoluble insoluble
Grenetina soluble soluble insoluble insoluble
Caseína soluble soluble soluble insoluble
Pescado soluble soluble soluble insoluble
Levadura soluble soluble soluble insoluble
OBTENCION DE CASEINA DE LA LECHE
MATERIAL REACTIVOS
2 vasos de precipitados de 250ml leche entera
1 probeta de 100ml HCl 0.2N
1 embudo acetona
2 papel filtro éter
PROCEDIMIENTO
1. Colocar 100ml de leche en un vaso de precipitado
2. Agregar 100ml de agua destilada
3. Con una pipeta añadir HCl 0.2N hasta obtener un pH de 4.8
4. Dejar reposar hasta que el sedimento precipite.
5. Suspender el precipitado en 100ml de agua destilada y dejar reposar.
6. Repetir este lavado 4 veces.
7. Filtrar el precipitado final en un embudo Buchner, colectando en el papel la
proteína.
8. Suspender la caseína en 25ml de agua destilada, agitar para homogeneizar
y filtrar. Repetir 4 veces.
9. Después del último lavado, suspender la proteína en 5ml de éter y 5ml de
acetona, y filtrar.
10.Colocar el polvo obtenido en un desecador con cloruro de calcio y pesar el
polvo 24 horas después.

6. CUESTIONARIO
1. ¿Cómo se manifiesta la desnaturalización de las PROTEINAS?
En la solidificación o separación de sustancias con proteínas
2. ¿Cuál de los tres agentes utilizados tiene mayor poder de
desnaturalización?
Los ácidos son lo que tienen mayor poder de desnaturalizar sustancias y lo
hacen en un tiempo corto
3. ¿Cómo podríamos saber que una sustancia desconocida es una proteína?
Haciendo pruebas como la de biuret que nos ayuda a determinar
concentraciones proteicas
4. Que coloración da la reacción del Biuret?
Morado violentado

7. 5. ¿Una proteína coagulada podría dar la reacción del Biuret?
Sí, porque al desnaturalizarse una proteína, esta cambia su estructura pero
no se rompen los enlaces que la conforman lo que hace esta prueba es
romper los enlaces peptídicos para comprobar la presencia de proteínas
6. Si se realiza la reacción del Biuret sobre un aminoácido como la Glicina ¿es
positiva o negativa? ¿Por qué?
No, porque se necesita tener una cadena de aminoácidos con almenas un
enlace peptídico para que la prueba de positiva. La Glicina no está unida
con otro aminoácido por lo tanto la dará negativa
7. Explica la reacción Xantoproteíca.
Es un método que se puede utilizar para determinar la cantidad de proteína
soluble en una solución, empleando ácido nítrico concentrado. La prueba
da resultado positivo en aquellas proteínas con aminoácidos portadores de
grupos aromáticos, especialmente en presencia de tirosina. Si una vez
realizada la prueba se neutraliza con un álcali vira a un color amarillo
oscuro
CONCLUSIONES:
Las proteínas son materiales polímeros que se encuentran en las células
vivientes. Sirven como materiales estructurales en el cuerpo y son fundamentales
para muchos procesos vitales. Las proteínas son polímeros de aminoácidos y se
producen en las células del cuerpo. Las proteínas de otros animales y de algunas
plantas son un alimento importante, ya que proporcionan los aminoácidos que son
esenciales para el cuerpo en la producción de las proteínas necesarias