Este documento discute factores que influyen en la elección de antimicrobianos, incluyendo factores del microorganismo, del huésped y del propio antimicrobiano. También describe métodos comunes para determinar la sensibilidad de microorganismos a antimicrobianos como la concentración inhibitoria mínima y la difusión en discos. Finalmente, aborda perfiles de resistencia bacteriana como MRSA y cómo detectarlos.

1. SENSIBILIDAD
Y
RESISTENCIA BACTERIANA
María Cecilia Yaneth Giovanetti
Bacteriologa, Mestre en Ciencias Biológicas (Microbiología)

2. FACTORES QUE INFLUYEN EN
LA ELECCIÓN DEL ANTIMICROBIANO
FACTORES DEL MICROORGANISMO
Diagnostico etiológico
Sensibilidad
FACTORES DEL HUESPED
Antecedentes
Edad
Estado inmunitario
Localización de la infección
Gestación
Función renal y hepática
Alteraciones Genéticas y metabólicas

3. FACTORES QUE INFLUYEN EN LA
ELECCIÓN DEL ANTIMICROBIANO
FACTORES DEL ANTIMICROBIANO
Espectro
Mecanismo de acción
Mecanismo de resistencia
Farmacocinética
Dosis y vía de administración
Efectos secundarios

4. FARMACOCINÉTICA
Es el estudio de la relación que
existe entre la dosis terapéutica
de un antibiótico y la
concentración del antibiótico en
el plasma y el lugar de la
infección a lo largo del tiempo

5. CUANDO DEBE PROCESARSE
UN ANTIBIOGRAMA ?
• Germen clínicamente importante
• Cuando este germen no tenga un
comportamiento uniforme frente a
la mayoría de los Antibióticos

6. MÉTODOS
MIC – Concentración mínima inhibitoria:
Dilución en caldo o en agar
Difusión con discos: Método Kirby- Bauer
Difusión por Gradiente: Test- E
CMB: Concentración bactericida minima
Calculo de la curva de crecimiento:Vitek
Concentracion Bactericina minima
Detección antibioticos en suero
Detección molecular: gen de resistencia

7. MIC
Método que permite cuantificar la sensibilidad del
microorganismo a diferentes concentraciones del
antibiótico determinando la CONCENTRACIÓN
MINIMA QUE INHIBE el crecimiento bacteriano
Se utiliza para microorganismos de crecimiento
lento, exigentes y anaerobios
Cuando los resultados del ATB por difusión son
de dudosa interpretación
Para evidenciar sinergismo o antagonismo entre
agentes antimicrobianos contra algún
microorganismo en particular

8. MIC – DILUCIÓN EN CALDO

9. MIC- DILUCIÓN EN AGAR
Tomado libro Microbiología Delgado-Ibarren, A, Polanco, A

10. DIFUSIÓN CON DISCOS
Método Kirby-Bauer
Ténica estandarizada para
microorganismos de crecimeinto
rápido: Enterobacterias, Staphylococcus spp.,
Enterococcus spp.
Kirby-Bauer Modificado para
microorganismos exigentes:
Haemophilus influenzae
Neisseria gonorrhoeae
Streptococcus pneumoniae

11. MÉTODO DE KIRBY-BAUER
MEDIO DE CULTIVO: Mueller Hinton
pH: 7,2 - 7,4
Grosor: 4 mm
Cantidad:25-30 ml
PREPARACIÓN DEL INOCULO: Turbidez equivalente
0,5 de la escala de Mac-Farland
ELECCIÓN DE LOS DISCOS DE SENSIBILIDAD

12. CRECIMIENTO DENTRO DEL HALO DE
IHIBICIÓN
Cultivo mixto
Cepa mutante

13. INVACIÓN DE LOS BORDES DE LOS
HALOS DE IHNIBICIÓN
Característico de las especies de Proteus
Cuando se mide el halo debe utilizarse la segunda
zona externa de inhibición del crecimiento

14. ATB ERROR TECNICO
No se debe leer, ni reportar

15. TEST- E Epsilometría
E
256
Método que combina los 192
128
principios de la difusión en 96
64
disco y la dilución en agar en 48
32
24
el estudio de la 16
12
susceptibilidad in vitro. 8
6
4
Esta metodología puede ser 3
2
utilizada en una variedad de 1,5
1,0
.75
microorganismos incluyendo .50
.38
.25
fastidiosos y anaerobios. .19
.125
.094
Corresponde a 20 diluciones .064
.047
dobles seriadas de CIM. .032
.023
.016

16. TEST- E
El E-test es más simple que otros
métodos para obtener una CIM.
Utiliza una tira de plástico que
contiene concentraciones crecientes
de un determinado antibiótico que van
desde 0,016 ug/ml hasta 256 ug/ml/
Esta tira se pone sobre una placa de
agar que ha sido inoculada con el
organismo en estudio

17. TEST- E
Test- E de
S. pneumoniae.
Lectura MIC
Pn G: 0,25 µg/ml

18. SISTEMAS SEMIAUTOMATICOS Y
AUTOMATICOS
 Sistema ViteK
 MicroScan Walkaway
 Sistema Phoenix

19. SISTEMA VITEK

20. MicroScan
 Los paneles realizan a la vez la identificación
y el Antibiograma

21. MicroScan

22. NO DEBE REALIZARSE LAS PRUEBAS PARA
ANTIBIOTICOS O NO SE DEBEN COMUNICAR
LOS RESULTADOS
 Sensibilidad predecible
 Resistencia predecible
 El antibiotico no se acumula en el sitio
de la infección
 Las pruebas in vitro no preciden
confiablemente resistencia

23. SENSIBILIDAD PREDECIBLE
TODOS LOS SITIOS
 S. pyogenes Penicilina
 S. agalactiae Penicilina
ORINA
 S. saprophyticus Nitrofurantoina
Trimetoprim-sulfametoxazol
NO ESTA INDICADA LA EVALUACIÓN

24. El antibiotico no se acumula en
el sitio de la infección
LCR
Cefalosporina 1ª ,2ª ,Clindamicina, macrólidos,
Tetracilinas, Fluoroquinolonas, antibioticos
administrados por la boca
VIAS URINARIAS
Cloranfenicol
Eliminación por vias biliares, no por orina
Norfloxacina y Nitrofurantoina, no se evalua en
sitios distintos de orina, alcanza la
concentración

25. Las pruebas in vitro no preciden
confiablemente resistencia
 Cefalosporinas Enterococcus spp.
L. monocytogenes
Enterococcus :
Aminoglucósidos (dosis bajas)
Trimetoprim
Trimetoprim-sulfametoxazol
RESULTADOS ENGAÑOSOS

26. PERFILES DE RESISTENCIA
BACTERIANA
 B-lactamasa
 BLEE (B_lactamasa de Espectro
extendido)
 MRSA - Oxacilina (1 ug)
 MRSA y S. lugdunensis:
Cefoxitin(30ug)
 MRS(SCN):
Cefoxitin (30ug) y MIC Oxacilina

27. METODOS PARA DETECTAR LAS
B-LACTAMASAS
 Método Acidométrico
 Método Yodométrico
 Cefarosporinas cromógenas (nitrocefin)
Para detectar penicilinasas
Microorganismos: Staphylococcus spp.,
N. gonorrheae, H.influenzae,
M. catarrhalis, Enterococcus, anaerobios

28. METODOS PARA DETECTAR
LAS BLEE
 PRUEBA CONFIRMATORIA CON
SENSIDISCOS: CAZ, CAZ/AC.CLAV
CTX,CTX/AC.CLAV
MICROORGANISMOS:
K. pneumoniae, K. oxytoca y E.coli,
P. mirabilis

29. BLEE
 Resistente a Pn
 Resistente a Cefalosporinas 1ª
2ª
3ª
4ª
 Resistente a Aztreonam
Sensibles:
Carbacepemicos: imipenem, meropenem

30. METODOS PARA DETECTAR
MRSA y MRS
 Sensidiscos Oxacilina 1 µg
 Sensidiscos Cefoxitin 30 µg
 Placa de screen AMH 4%NaCl+6 µg/dl Ox
 MIC (caldo MH con ajuste de cationes) 2%NaCl
 Test E (AMH + 2%NaCl
 PCR y sondas de DNA (detectar gen mecA
Microorganismos:
Staphylococus aureus
Staphylococus coagulasa negativa

31. Staphylococcus aureus
Oxacilina
1 µg
Método disco
≤ 10
11 - 12 ≥ 13
Informar
Intermedio Informar
Oxacilina Resistente
(Realizar MIC) Oxacilina Sensible

32. Staphylococcus aureus
MIC Oxacilina
( µg/dl)
≤4
≥2
Informar
Informar
Oxacilina Resistente
Oxacilina Sensible

33. Staphylococcus aureus y
S. lugdunensis
Método de difusión
Cefoxitin 30 µg
≤ 21 mm
≥ 22 mm
Informar
Informar
Oxacilina Resistente
Oxacilina Sensible

34. Staphylococcus coagulasa negativa
excepto S. lugdunensis
Método de difusión
Oxacilina
Cefoxitin 30 µg
1 µg
≤ 2417
≤ mm ≥ 25 mm
≥ 18
Informar
Informar Informar
Oxacilina Resistente Informar
Oxacilina Resistente Oxacilina Sensible
Oxacilina Sensible

35. S. lugdunensis
Solo se detecta la S o R
a Meticilina con Cefoxitin
(30 ug ),
no con Oxacilina (1 ug) disco
MIC Oxacilina R ≥ 4 S≤2

36. Staphylococcus coagulasa negativa
excepto S. lugdunensis
MIC Oxacilina
( µg/dl)
≥0.5
≤ 0.25
Informar
Informar
Oxacilina Resistente
Oxacilina Sensible

37. REQUISITOS
 Para detectar Staphylococcus meticilina resistente
debe ser incubado 24 hs completas a T° ≤ 35 ° C
 La lectura debe realizarse con luz transmitida, para
observar las colonias pequeñas dentro de la zona de
inhibición
 La mayoría de los SMR, usualmente son resistente a
varios antibióticos además de los B lactamicos,
aminoglucosidos, macrólidos, clindamicina, tetra
 Ensayo dudoso o intermedio usar prueba screen o
MIC

38. MRS
 Los MRSA, Staphylococus coagulasa
negativa Meticilino resistente(SCN),
deben ser informado como resistentes a
todos los β lactamicos y combinaciones
de β lactamicos con ihibidores de β
lactamasas (ácido clavulanico,
sulbactam, tazobactam)

39. MRSA y MRS
 Resistente a B-lactamicos
 Resistente a Aminoglucosidos (Ak, Gn,Tb, Net)
 Resistentes a Macrolidos (Eri,Clari,diri,azi)
 Resistente a Quinolonas (Cip, , NA, levo, Nor, oflo,
 Resistente a Lincomicinas (cli,
 Resistente a Carbapenemicos (imi, mero, erta, dori)
 Resistente a Fenicoles (cl)

40. Resistente a β lactamicos
 Penicilinas
Penicilina
Aminopenicilina(Amx, Amp,)
Ureidopenicilina (pip, azlocilina,mezlocilina)
Carboxipenicilina (Car, Ticar)
Penicilinas estables a las penicilinasas (Ox, Met,naf,diclo,clox)
β lactamicos / combinación con inhibidores de β lactamasa
(Amx/ac.clav, Amp/Sulb, Pip/Taz, Tir/ac. Clav)
 Cefalosporinas
1ª generación (Cef, cefra, cefapirin,cefazolin,
2ª generación (Cefuroxime, Fox, cefamandole,cefonicid,
3ª generación (CAZ, CTX,ceftriaxona, ceftizoxime,cefoperazona
4ª generación (Cefepima,cefpiroma)

41. Clinical and Laboratory Standards Intitute
CLSI
 “ El control de calidad de las pruebas de
susceptibilidad con cepas ATCC no
garantiza la presición de los resultados
en cepas aisladas de pacientes: es
importante revisar los resultados
obtenidos frente a cada antimicrobiano
antes de informar”

43. Qué hacer frente a resultados “raros”?
 Evaluar contaminación de la prueba
 Uso de placa, discos, tarjeta, panel
inadecuado o defectuoso
 Confirmar identificación de la cepa
 Repetir pruebas de susceptibilidad
 Buscar errores de trascripción
 Buscar antecedentes de pruebas similares
confirmadas del paciente
 Enviar cepas a Laboratorio de Referencia

46. Puedes cambiar
tu vida
cambiando
solo tu
manera de
pensar