Este documento describe varias tecnologías utilizadas para estudiar el ADN, incluyendo la ingeniería genética, que permite manipular y transferir ADN entre organismos usando plasmídos. Explica procesos como el clonaje de genes usando enzimas de restricción, la amplificación de ADN mediante PCR y la secuenciación de ADN. También describe técnicas como la electroforesis para separar y analizar fragmentos de ADN.

1. Tecnologías que se utilizan para el estudio del ADN Andrea Senna

2. Dogma central de la biología molecular

3. Ingenieríagenética 1970 La ingeniería genética es la tecnología de la manipulación y transferencia de ADN de un organismo a otro, que posibilita la creación de nuevas especies, la corrección de defectos genéticos y la fabricación de numerosos compuestos 2011 Técnica para cortar, modificar o insertar genes a una molécula de ADN tramite utilizo de plasmidos

4. Ingenieríagenética VS. Biotecnologia BIOTECNOLOGIA Es una disciplina de la biología. Toda l’aplicacióntecnológica que utilice sistemas biológicos y organismos vivos o sus derivados para la creación o modificación de productos o procesos para usos específicos en Agricoltura, Industria, Medicina y Veterinaria ING. GENETICA Eliminación, inserción o modificación selectiva de genes con utilizo de plasmidosy bacterios

5. Plasmidos Moléculas de ADN extracromosómico circular o linear que se replican y transcriben independientes del ADN cromosómico. Están presentes normalmente en bacterias Los plásmidos sirven como una importante herramienta en laboratorios de bioquímica y ingeniería genetica

6. Clonaje de un gen(Tecnologias de l’ADN Recombinante o Cloning) ENZIMAS DE RESTRICCION (endonucleasas) son “enzimas que reconocen y cortan secuenciaspalindrómicasdel material genético”

7. Clonaje de un gen(Tecnologias de l’ADN Recombinante o Cloning)

8. Clonaje de un gen(Tecnologias de l’ADN Recombinante o Cloning) VIDEO

9. Ejemplo cotidiano (TAK1) EcoR1 pHA (7000bp) EcoR1 pHA-TAK1 (8499bp) BamH1 BamH1 EcoR1 Pflag-TAK1 (5999bp) pFLAG (4500bp) EcoR1 BamH1 BamH1 Duracion: 1 SEMANA

10. Ejemplo cotidiano 2 (HIPK2) Problema 1: el gen es demasiado grande (4000 bp) CMV-HIPK2 (8262bp) Problema 2: demasiados sitios de restriccion internos a la secuencia de el gen! pHA (4500bp) Problema 3: Sitios de restriccion no compatibles con el plasmide receptor! Duracion: ???

11. Ejemplo cotidiano 2 (HIPK2) CMV-HIPK2 (8262bp) Paso 1: Considerar el gen como dos partes Paso 2: Sintetizar la primera parte (1000bp) artificialmente con PCRanadendo un sitio de restricion compatible pHA (4500bp) Paso 3: Cortar la segunda parte con enzima de restriccion e insertar todo en el plasmido receptor Duracion: 1 mes

12. PCR (PolymeraseChainReaction) Técnica de biología molecular que permite de amplificar un fragmento de ADN utilizando la propiedad natural de las polimerasas para replicar fragmentos de ADN

13. PCR (PolymeraseChainReaction) VIDEO

14. Electroforesis Es una tecnica quepermite de separar, identificar y purificarmoléculas o fragmentos de DNA en un suportesolidocomo un gel Las macromoléculasestáncargadaseléctricamente, la cantidad de carica (tamano) determina la velocidad a la que esta se mueve en un campo eléctrico

15. Electroforesis

16. Electroforesis 1) Preparación de los geles de agarosa. 2) Preparacion de las muestras a separar 3) Cargar las muestras de ADN 4) Conexión de la fuente y aplicación del campo eléctrico 5) Avance de la corrida (1h) 6) Fin de la corrida y comparación de tamaño con el marcador Duracion: 1h30’

17. Electroforesis VIDEO

18. Secuenciacion de ADN Esta técnica se emplea para la lectura de la secuencia de bases nitrogenadas de los nucleótidos de una molécula de ADN

20. Cloning

21. PCR

22. Electroforesis

23. Secuenciacionautomatica