Wendy Espinel Morales
Diego Fernando Cadena
Enmanuel Ortiz Jiménez
*
    Es una técnica que se utiliza para identificar y
    localizar proteínas con base en su capacidad
    para unirse a anticuerpos específicos.
*

Básicamente se basa en la separación de las
proteínas obtenidas de HIV-1 procedentes del
lisado del cultivo del virus y purificadas por
centrifugación.
Se coloca
Proteína Obtenida
                                 Gel de poliacrilamida


                                             En forma

 ELECTROFORESIS                  Laminas delgadas
                    Se efectúa




   Donde
Proteínas de menor peso   Proteínas de mayor peso
      (p17, p24)




   Migran mas lejos         Se mantienen cerca
                            al lugar de deposito
Después de transferirlo a una tira de nitrocelulosa y
     haber pasado por unos procesos de incubación
         revelara una banda coloreada en las zonas
              correspondientes a los Ac específicos.
Esta prueba generalmente se considera
una prueba sensible para las proteínas
del core y algo menos para las de
envoltura.
Proteínas del VIH2

Localización   Función         VIH-2
Envoltura      Unión           gp 105
               Fusión
Core           Proteína        p24
               mayor           p17
               Proteína
               terminal
Polimerasa     Transcriptasa   p 68/53
               inversa         p 34
               Integrasa
               Ribonucleasa    p 11
               Proteasa
Positivo
  Negativo
Indeterminado
Requiere al menos de dos bandas de
   envoltura, que se considera la más
                           específica.
Se obtiene por la ausencia de bandas.
Aparece algunas bandas pero no
 para considerarse como positivo.
•Reactividad inespecífica
•Infección por HIV-2 u otros retrovirus
•Seroconversión al vih-1
•Hijo de madre seropositiva
•Divergencias genéticas de la cepa del
HIV-1
1. Presencia aislada de p17 se suele
     considerar como negativa y no
      requiere seguimiento ulterior
2. Presencia de una sola banda de la
envoltura es un patrón infrecuente, que
puede observarse en la seroconversión y
        en la infección por hiv-2
3. Patrones gag/pol sin env pueden
deberse también a una seroconversión
      (resultado indeterminado)
A. Principal desventaja es el elevado precio,
   que lo hace inviable como prueba de
   confirmación en algunos países.


B. La variabilidad reaccional que existe en las
   bandas según el tipo de ensayo, el tipo de las
   muestras, las condiciones técnicas y la
   subjetividad de la interpretación de la
   intensidad de las bandas, que siempre
   depende del observador.
Detección de mutaciones puntuales: como delecciones,
inversiones cromosómicas, entre otras.
Diagnostico Prenatal: como enfermedades genéticas de
una forma temprana
Diagnostico de infecciones por virus, bacterias y
parásitos.
Oncogenes
•http://www.bio-rad.com/prd/en/US/CDG/PDP/527f0b18-e467-
      493a-b82a-874027ba390e/GS%20HIV-1%20Western%20Blot

          •http://www.ctv.es/USERS/fpardo/vih4.htm

Western blot

  • 1.
    Wendy Espinel Morales DiegoFernando Cadena Enmanuel Ortiz Jiménez
  • 2.
    * Es una técnica que se utiliza para identificar y localizar proteínas con base en su capacidad para unirse a anticuerpos específicos.
  • 3.
    * Básicamente se basaen la separación de las proteínas obtenidas de HIV-1 procedentes del lisado del cultivo del virus y purificadas por centrifugación.
  • 4.
    Se coloca Proteína Obtenida Gel de poliacrilamida En forma ELECTROFORESIS Laminas delgadas Se efectúa Donde
  • 5.
    Proteínas de menorpeso Proteínas de mayor peso (p17, p24) Migran mas lejos Se mantienen cerca al lugar de deposito
  • 6.
    Después de transferirloa una tira de nitrocelulosa y haber pasado por unos procesos de incubación revelara una banda coloreada en las zonas correspondientes a los Ac específicos.
  • 7.
    Esta prueba generalmentese considera una prueba sensible para las proteínas del core y algo menos para las de envoltura.
  • 9.
    Proteínas del VIH2 Localización Función VIH-2 Envoltura Unión gp 105 Fusión Core Proteína p24 mayor p17 Proteína terminal Polimerasa Transcriptasa p 68/53 inversa p 34 Integrasa Ribonucleasa p 11 Proteasa
  • 10.
  • 11.
    Requiere al menosde dos bandas de envoltura, que se considera la más específica.
  • 12.
    Se obtiene porla ausencia de bandas.
  • 13.
    Aparece algunas bandaspero no para considerarse como positivo.
  • 14.
    •Reactividad inespecífica •Infección porHIV-2 u otros retrovirus •Seroconversión al vih-1 •Hijo de madre seropositiva •Divergencias genéticas de la cepa del HIV-1
  • 15.
    1. Presencia aisladade p17 se suele considerar como negativa y no requiere seguimiento ulterior
  • 16.
    2. Presencia deuna sola banda de la envoltura es un patrón infrecuente, que puede observarse en la seroconversión y en la infección por hiv-2
  • 17.
    3. Patrones gag/polsin env pueden deberse también a una seroconversión (resultado indeterminado)
  • 18.
    A. Principal desventajaes el elevado precio, que lo hace inviable como prueba de confirmación en algunos países. B. La variabilidad reaccional que existe en las bandas según el tipo de ensayo, el tipo de las muestras, las condiciones técnicas y la subjetividad de la interpretación de la intensidad de las bandas, que siempre depende del observador.
  • 19.
    Detección de mutacionespuntuales: como delecciones, inversiones cromosómicas, entre otras. Diagnostico Prenatal: como enfermedades genéticas de una forma temprana Diagnostico de infecciones por virus, bacterias y parásitos. Oncogenes
  • 20.
    •http://www.bio-rad.com/prd/en/US/CDG/PDP/527f0b18-e467- 493a-b82a-874027ba390e/GS%20HIV-1%20Western%20Blot •http://www.ctv.es/USERS/fpardo/vih4.htm