La electroforesis es un método que utiliza una corriente eléctrica para separar biomoléculas de acuerdo a su tamaño y carga eléctrica a través de un gel. Las moléculas ionizadas son atraídas hacia el polo opuesto debido al campo eléctrico. El gel reduce el movimiento de las moléculas para evitar que se ensanchen las bandas durante la migración. Existen diferentes métodos como la electroforesis en gel de poliacrilamida, en geles de gradiente, capilar y bidimensional.

1. Electroforesis Lee Bojórquez Juan Francisco Madrid Ruiz Daniela Morales Carrasco Reyes Moreno Quiroz Mayra Orozco Avilés Rebeca Ramírez Lee Leslie Jennifer

2. método en el que se utiliza una corriente eléctrica controlada con la finalidad de separar biomoléculas según su tamaño y carga eléctrica a través de una matriz gelatinosa.

3. Moléculas ionizadas Campo eléctrico Atracción hacia el polo opuesto Moléculas positivas Cátodo- Moléculas negativas Ánodo+

4. FUERZAS ADICIONALES Dificulta el movimiento Fricción con el disolvente temperatura Difusión Movimiento Browniano Moléculas no migran de forma homogénea Se forma un frente

5. Para reducir la anchura del frente… Se reduce el movimiento de las moléculas empleando un medio que oponga mas resistencia a dicho movimiento G E L la migración electroforética de las moléculas será mas lenta, pero el ensanchamiento del frente se vera reducido también Polímero soluble de muy alto peso molecular que atrapa moléculas de agua y forma un tamiz que dificulta el movimiento de los solutos

6. Métodos electroforéticos zonales Se aplican pequeñas cantidades de la disolución de proteínas a un soporte sólido, que se impregna con una solución tampón Son útiles para lograr la separación de mezclas complejas Como soporte han sido utilizados papel (celulosa), almidón, poliacrilamida, agarosa y acetato de celulosa

7. Equipamiento Fuente de poder Soporte & dos electrodos Cubeta vertical u horizontal

9. Electroforesis en gel de poliacrilamida Polimerización de acrilamida Químicamente inerte Estabilidad mecánica Forma geles transparentes Permiten buena visualización No iónicos Control del tamaño del poro neurotoxicidad

10. Electroforesis en geles de gradientes Tamaño decreciente del poro la proteína migra hasta alcanzar una zona donde el tamaño de poro impida cualquier avance al alcanzarse el limite del poro no se produce una migración apreciable aunque no se detiene completamente concentra las bandas en regiones mas estrechas Incrementa el rango de pesos moleculares que se pueden resolver en un mismo gel

13. Fundida a 20 a 30 kv en un campo de 400 a 500 v/cm

14. El capilar de silica fundida permite el pasaje de la luz UVElectroforesis Capilar

15. Es posible separar cationes, aniones, proteínas, macromoléculas y sustancias no cargadas en forma simultanea.

16. Region del anodo es acida y catodo es alcalina isoelectroenfoque

17. Sustancias en PH inferior a su punto isoeléctrico cargadas (+) cátodo Sustancias en PH alto a su punto isoeléctrico cargadas (-) ánodo

18. Electroforesis bidimensional

19. Fuentes de error