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Bacterias intracelulares obligadas
- 2. Esféricos u ovalados Se observan como cocos Gramnegativos o Gram variables Son inmóviles, no ciliadas Son parásitos intracelulares obligados. Fueron considerada virus inicialmente Poseen una membrana externa y otra interna semejantes a las bacterias Gramnegativas No poseen Peptidoglicano Murray, Patrick y col. Microbiología Médica. 7° Edición. 2014. Ostos O. y Sánchez R. Chlamydia trachomatis: avances y perspectivas. Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca. Bogotá D. C. 2003
- 3. • Hace miles de años (China y Egipto) descripciones sobre Tracoma • (1906) Halbertaedter y Von Prowazek. Isla de java. Coloración de Giemsa cuerpos punteados intracitoplasmáticos en frotis conjuntival de orangutanes. Denominaron inclusiones Arango A. y col. Chlamydia trachomatis: Aspectos microbiológicos, clínicos y epidemiológicos. MVZ-Córdoba 2001; 6:(2), 87-96 • (1930) psittacosis europea Alemania. Bedson evidenció inclusiones parecidas • (1940) Rake y Jones. Linfogranuloma venéreo • (1980) C. trachomatis reconocido como patógeno genital
- 4. •Chlamydophila psittaci •Chlamydophila pneumoniae •Chlamydophila abortus •Chlamydophila felis •Chlamydophila pecorum •Chlamydophila caviae REINO: Bacteria FILO: Chlamydiae ORDEN: Chlamydiales FAMILIA: Chlamydiaceae GÉNERO: Chlamydia Chlamydophila 16S Y 23S •Chlamydia trachomatis •Chamydia muridarum •Chlamydia suis Murray, Patrick y col. Microbiología Médica. 7° Edición. 2014.
- 5. Microorganismo Origen histórico Chlamydia Chlamydis, un manto C. trachomatis Trachomatis, del tracoma o rugoso (la enfermedad conocida como tracoma se caracteriza por la presencia de granulaciones en las superficies conjuntivas que originan inflamación crónica y ceguera) Chlamydophila Chlamydis, un manto; phila, amante (amante del manto; relacionado con chlamydia) C. pneumoniae Pneumoniae, neumonía C. psittaci Psittacus, loro (enfermedad asociada a las aves) Murray, Patrick y col. Microbiología Médica. 7° Edición. 2014.
- 6. No pueden sintetizar ATP, ni reoxidar el NADPH Experimentan un ciclo de crecimiento único con dos estadios Sintetizan sus propias proteínas, ácidos nucleicos y lípidos. Contienen (ADN) y (ARN) Carecen de citocromos Se dividen por fisión binaria Poseen ribosomas procariotas Ostos O. y Sánchez R. Chlamydia trachomatis: avances y perspectivas. Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca. Bogotá D. C. 2003 Murray, Patrick y col. Microbiología Médica. 7° Edición. 2014.
- 7. •Forma infecciosa de la bacteria. •Son inactivos metabólicamente. •Son semejantes a una espora. • No se pueden replicar • Resistentes • Forma no infecciosa •Representan la forma intracelular. •Son activos metabólicamente y se pueden replicar. •Son osmóticamente frágiles debido a la escasez de proteínas 0.2 a 0.4 μm. 0.6 a 1.0 μm. Murray, Patrick y col. Microbiología Médica. 7° Edición. 2014. Ostos O. y Sánchez R. Chlamydia trachomatis: avances y perspectivas. Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca. Bogotá D. C. 2003
- 8. Se divide en tres fases: 1) Penetración de la forma infecciosa (CE) en la célula hospedadora 2) Multiplicación del CR mediante fisión binaria y conversión en CE 3) Liberación de los CE de la célula hospedadora Cercenado E. y Cantón R. Procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012
- 12. IDO: indolamina 2,3 – dioxigenasa Triptófano → quineurina y N-formilquineurina
- 13. PROTEÍNAS DEL PROCESO CELULAR: Proteínas Hsp Hsp60 LIPOPOLISACARIDO (LPS) PROTEINAS DE MEMBRANA EXTERNA MOMP: proteína principal de membrana externa PMPs: proteínas polimórficas de membrana COMC: complejo proteico de membrana externa rico en residuos de cisteína (Omp2) SISTEMA DE SECRECIÓN TIPO III Cercenado E. y Cantón R. Procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012
- 14. Cercenado E. y Cantón R. Procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012
- 15. Cercenado E. y Cantón R. Procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012
- 16. Cercenado E. y Cantón R. Procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012
- 17. Proteínas Hsp Sistema de secreción tipo III Cercenado E. y Cantón R. procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012 TarP Inc CrpA CPAF
- 18. Murray, Patrick y col. Microbiología Médica. 7° Edición. 2014.
- 20. Se ha clasificado 18 serotipos: A, B, Ba, C, D,E, F, G, H, I, Ia, J, K, L1, L2, L2a, L3, L3a Basada en el análisis de la proteína principal de la membrana externa MOMP Núñez María y col. Microbiología Médica. 2° Edición. 1998.
- 21. SUBDIVIDIDA EN 3 BIOVARIANTES Tracoma Conjuntivitis de inclusión e infecciones genitales Linfogranuloma venéreo (LGV) SEROVARIANTES SEGÚN ENFERMEDAD: A, B, Ba, C D, E, F, G, H, I, J, K L1, L2, L3 •Conjuntivitis neonatales •Conjuntivitis de inclusión •Infecciones urogenitales Tracoma LGV Cercenado E. y Cantón R. procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012
- 22. Tracoma Epidemiología Endémico en más de 50 países, especialmente en áreas rurales de África Aproximadamente 600 millones de personas afectadas 150 millones de personas con déficit visuales La transmisión relacionada con las bajas condiciones higiénicas Transmisión por contacto directo con fómites, contacto con ojos o a través de moscas Los niños y mujeres son los más afectados en las zonas endémicas Cercenado E. y Cantón R. procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012
- 23. TRACOMA A, B, Ba, C Fase aguda Período de incubación: 5 a 12 días Conjuntivitis folicular (párpado superior) Descarga mucoide o mínimamente acuosa Incremento de respuesta inflamatoria (edema del párpado) Fase crónica Cicatrices en la conjuntiva Deformar el párpado. Las pestañas entran en contacto con el globo ocular → abrasión (triquiasis) Pérdida de la visión, ceguera. Cercenado E. y Cantón R. procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012
- 24. Linfogranuloma venéreo Infección de transmisión sexual que invade tejidos linfoides Endémico en África, India, Sudamérica o el Caribe Más frecuente en el varón que en la hembra 6:20 especialmente en promiscuos En Estados Unidos y Europa es más frecuente entre homosexuales Los pacientes generalmente están afectados con sífilis Epidemiología Núñez María y col. Microbiología Médica. 2° Edición. 1998. Cercenado E. y Cantón R. procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012
- 25. LINFOGRANULOMA VENÉREO 2da fase: •Inflamación de ganglios inguinales. •Bubones dolorosos de gran tamaño. •Fiebre, escalofríos, mialgias, cefaleas. Fase crónica: •Ulceras genitales. •Elefantiasis genital. •Infertilidad. 1era fase: •Lesión en el lugar de infección. •Puede pasar inadvertida. •Ausencia de dolor L1, L2, L3 Cercenado E. y Cantón R. procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012
- 26. Conjuntivitis de oclusión e infecciones genitales Epidemiología Principal causa de infección de transmisión sexual en el mundo Afecta principalmente a mujeres entre 15 y 24 años El 60 % de los casos son asintomáticos 10 y 20 % de infecciones en cérvix evolucionan hacia enfermedad inflamatoria pélvica, embarazos ectópicos e infertilidad Los cuadros de conjuntivitis están asociados a niños menores de 2 años Cercenado E. y Cantón R. procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012
- 27. INFECCIONES UROGENITALES: •Asintomáticas (80 % mujeres). •Cervicitis, endometritis, •Flujo vaginal anormal. •Esterilidad o embarazos ectópicos. •Asintomáticas (25-30% hombres). •Uretritis. • Ardor al orinar. •Suele detectarse luego de un tratamiento contra gonococo. D, E, F, G, H, I, J, K Cercenado E. y Cantón R. procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012
- 28. CONJUNTIVITIS DE INCLUSIÓN EN LOS ADULTOS CONJUNTIVITIS NEONATAL NEUMONÍA DEL LACTANTE D, E, F, G, H, I, J, K Cercenado E. y Cantón R. procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012
- 30. •Raspados conjuntivales. •Raspados endocervicales. •Raspados rectales. •Raspados uretrales. •Exudados faríngeos. •Biopsias y suero. MUESTRAS: Invasivas: No invasivas: • 1ra porción de la orina Cercenado E. y Cantón R. procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012
- 31. DIAGNOSTICO DE LABORATORIO Detección directa en muestras clínicas Detección morfología de inclusiones Coloración de Giemsa o de Giménez Cercenado E. y Cantón R. procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012 Washigton C. Winn y col. Koneman Diagnóstico microbiológico Texto y Atlas color. 5° Edición. 2004.
- 32. Determinación Antigénica: DIAGNOSTICO DE LABORATORIO Tinción de Inmunofluorescencia Directa. Enzimoinmunoensayos (EIA). Anticuerpos frente MOMP o LPS. Cercenado E. y Cantón R. procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012
- 33. DIAGNOSTICO DE LABORATORIO •Las líneas celulares óptimas son: HeLa 229 y McCoy. Cultivo: •Solo se detectan las bacterias vivas •Alta especificidad. Sensibilidad (75-80%) Cercenado E. y Cantón R. procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012
- 34. •Falta de discriminación entre los diferentes serovariantes (D-K y L1-L3) •Detección en muestras oculares, cervicales, uretrales, semen y orina. TAANs (técnicas de amplificación de ácidos nucleícos): DIAGNOSTICO DE LABORATORIO •Elevada sensibilidad y especificidad. Cercenado E. y Cantón R. procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012
- 35. DIAGNOSTICO DE LABORATORIO Ventajas y desventajas de las técnicas de diagnóstico descritas para C. trachomatis y los tipos de muestras adecuadas en cada caso Cercenado E. y Cantón R. procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012
- 38. Psitacosis: Enfermedad humana causada por C. psittaci contraída por contacto con aves o por infección de pájaros psitácidos (loros, pericos, cacatúas, entere otros). Ornitosis: Infección con agentes similares en todos los tipos de aves domesticas y pájaros que viven en libertad. Murray, Patrick y col. Microbiología Médica. 7° Edición. 2014.
- 40. Epidemiología Distribución geográfica: Mundial Frecuente en personas relacionadas con aves Es difícil de diagnosticar Mayor riesgo en: Veterinarios Cuidadores de zoológicos Trabajadores de tiendas de mascotas Empleados de plantas de procesamiento de las aves de corral Murray, Patrick y col. Microbiología Médica. 7° Edición. 2014.
- 41. Transmisión: Vías de entrada: Respiratoria Mucosas Parenteral Inhalación Contacto directo con aves infectadas Transmisión persona a persona (rara) Instituto Nacional de Seguridad e Higiene en el Trabajo. Chlamydia psittaci. Cepas aviares. Bdatabio. Fichas de agentes biológicos
- 42. Patogenia Aparato respiratorio Células reticuloendoteliales Multiplicación de los microorganismos Necrosis focal Diseminación hematógena Murray, Patrick y col. Microbiología Médica. 7° Edición. 2014.
- 43. Manifestaciones clínicas Período de incubación 5 a 14 Días Enfermedad de inicio súbito que adopta la modalidad de influenza o neumonía. Suele presentar malestar, fiebre, escalofríos, anorexia, dolor faríngeo, cefalea intensa. Murray, Patrick y col. Microbiología Médica. 7° Edición. 2014.
- 44. Síntomas pulmonares como: tos no productiva, crepitantes y consolidación. Gastrointestinales: nauseas, vómitos , diarreas Sistémicos: Carditis, hepatomegalia, esplenomegalia y queratoconjuntivitis folicular Murray, Patrick y col. Microbiología Médica. 7° Edición. 2014.
- 46. Diagnóstico indirecto Serología Fijación del complemento Microinmunofluorescencia Enzimoinmunoensayo Cercenado E. y Cantón R. procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012
- 47. Diagnóstico directo Cultivo de línea celulares Muestras Frotis de exudado faríngeos Esputos Aspirados bronquial y endotraqueal Líquido de lavado bronqueoalveolar Biopsias de tejido pulmonar Transporte Medio SPG (sucrose/ phosphate/ glutamate Cercenado E. y Cantón R. procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012 Líneas celulares más utilizadas: Células McCoy Células HeLa 229 Células BHK-21
- 48. Microscopia mediante tinción Ziehl-neelsen modificado May Grünwald-Giemsa Diagnóstico directo Cercenado E. y Cantón R. procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012
- 49. Técnicas de detección de antígenos Inmunofluorescencia directa ELISA Técnicas inmunohistoquímicas Técnicas de amplificación de ácidos nucleicos (TAAN) Diagnóstico directo Cercenado E. y Cantón R. procedimientos en microbiología clínica. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. Y especies relacionadas. Seimc 2012
Notas del editor
- Murray Clhamydia trachomatis: avances y perspectivas
- Reordenamiento taxonómico a partir de 2002. Leer avances y prospectivas, seimc y Murray
- murray
- Murray Clhamydia trachomatis: avances y perspectivas
- Los CR frágiles y con replicación activa permanecen protegidos dentro de la célula huésped mientras que los CR estables y rígidos pueden sobrevivir en el ambiente extracelular durante el paso de célula a célula. En los CE se encuentra DNA y RNA. La mayor parte de DNA se encuentra en el nucleoide central electrodenso y la mayor parte del RNA está en los ribosomas. Presentan antígenos especie-específicos y antígenos serotipo-específicos, que inducen la fagocitosis, no tienen actividad metabólica, no se pueden replicar y son infectivos. Los cuerpos reticulados (CR) son el resultado de la diferenciación de los CE al ser fagocitados, tienen un morfología bacilar, están desprovistos del nucleoide denso y su mayor tamaño es de 600 a 1000 nm, no son infecciosos. Se tiñen de azul con el colorante de Giemsa, son capaces de replicarse, tienen actividad metabólica y el ADN está disperso. Murray y Clhamydia trachomatis, avances y perspectivas
- Seimc. Procedimientos en microbiología clínica 1) Penetración de la forma infecciosa o cuerpo elemental. El CE esta perfectamente adaptado al medio extracelular ya que su membrana externa contiene una gran cantidad de proteínas muy ricas en aminoácidos azufrados, como cisteína. La proteína más abundante es MOMP (del término inglés major outer membrane protein), codificada por el gen ompA, aunque también se encuentran otras dos proteínas de membrana externa (Omp2 y Omp3), que forman numerosos puentes disulfuro y son las responsables de la rigidez y escasa permeabilidad de CE. Sin embargo el CE es incapaz de replicarse por división, requiriendo la penetración al interior de la célula eucariota para continuar su ciclo biológico. La adhesión de las bacterias a la célula hospedadora es necesaria como un paso previo a la fagocitosis. Estas bacterias son fagocitadas, con más facilidad que otras bacterias como Escherichia coli, sugiriendo un proceso específico. No se conocen bien los receptores específicos de la célula huésped ni de la bacteria implicados en este proceso, pero se sugiere que los distintos serovares pueden emplear diferentes y quizás múltiples estrategias de adhesión (MOMP, PMPs, TarP…). C. trachomatis patotipos LGV y C. psittaci tienen más afinidad por macrófagos, mientras que C. pneumoniae y los patotipos de tracoma de C. trachomatis tienen más afinidad hacia células epiteliales de mucosas. 2) Multiplicación del CR mediante fisión binaria. Una vez en el interior del fagosoma, comienza un proceso de reorganización o diferenciación del CE a CR. Los primeros cambios tras la formación del fagosoma, son el inicio de la síntesis proteica y la transformación de la MOMP de su forma trimérica a monomérica, con lo que aparecen poros de un tamaño adecuado para el paso de ATP y nutrientes. Tras estos sucesos iniciales, a las 12 horas postinfección, todas las bacterias intracelulares están en forma de CR. Los CR se dividen por fisión binaria sin una aparente septación. Durante esta etapa se produce un crecimiento exponencial dentro del fagosoma hasta 100-1000 bacterias, con un tiempo de duplicación de 2-3 h que dura ∼12 a 20 horas (aunque algunos patotipos como los implicados en el LGV tienen una velocidad de crecimiento mayor). A la conclusión de este ciclo de crecimiento, comienza una nueva reorganización de los CR a CE para formar una inclusión madura. La reorganización no es un proceso sincrónico, es decir que coexisten CR en reproducción junto a CE maduros. 3) Liberación de los CE de la célula hospedadora. El mecanismo de liberación no se conoce aún con exactitud. Generalmente los CE son detectados en el medio extracelular tras la lisis de la célula hospedadora, lisis que se produce como consecuencia de la liberación tardía de enzimas lisosomales así como por la acción de una proteasa de origen clamidial. Además, en estudios ultraestructurales sobre cultivos celulares infectados con C. trachomatis, se ha descrito un mecanismo de liberación del microorganismo semejante a la exocitosis, lo que también ocurre in vivo en infecciones intestinales por C. pecorum. El proceso global del ciclo de desarrollo biológico es de 48-72h. Parece ser que, al menos en condiciones in vitro, factores como el IFN-γ, ciertos antibióticos como los β-lactámicos (pese a ser bacterias gramnegativas carentes de peptidoglicano) y factores nutricionales esenciales como el triptófano inducen la aparición de unos cuerpos reticulares anormales, también denominados formas aberrantes (FA) en los que la actividad metabólica disminuye y el organismo suele ser resistente al tratamiento antibiótico. El efecto de estos factores inductores de las FA es reversible, ya que cuando son aclarados del medio, las FA pasan a CE normales. Las FA permanecen en el interior de la célula como agente infeccioso latente o persistente y se ha asociado la presencia de FA con procesos crónicos infecciosos y no infecciosos.
- Leer paper cap 16 clamidias, rickettsias … Sobre la patogenia y ciclo evolutivo
- Respuesta Inmune Innata y Adaptativa frente a las células infectadas por especies de La familia Chlamydaceae. Rol central del IFN-γ en tratar de limitar la infección. Ls linfocitos T antígenos-clamidaceas específicos, generados por la respuesta adaptativa Th1 podrían limitar o resolver la infección ya se observa el tráfico de los CD4T que producen INF-γ y TNF- hacia el sitio de la infección pudiendo inhibir la replicación bacteriana intracelular, así como están presentes los anticuerpos IgG en el mismo sitio para neutralizar los CE antes de ser endocitados. Paper clamydia y clamydophila
- La respuesta generada contra estas bacterias que persisten a pesar de la inflamación induce la estimulación de fibroblastos que conlleva a la síntesis de colágeno y liberación de metaloproteasas, entre otros factores, con el resultado de fibrosis y cicatrizaciones características de las patologías generadas por las especies de la familia Chlamydaceae .
- La activación de la IDO. Su está asociada a la inducción de infecciones persistentes y crónicas por diferentes mecanismo. En el caso de la familia Chlamydaceae el principal mecanismo IDO-dependiente es la depleción de triptófano. Estas bacterias son triptófano-auxótrofas y ante la depleción disminuyen la actividad transcripcional de genes de manera de mantener la viabilidad pero no la multiplicación y el tráfico de las vesículas dentro de la célula huésped. En la vesícula de inclusión los CR muestran aberrantes. El reclutamiento de células Treg, entre otros factores, disminuye la respuesta inflamatoria y las bacterias vuelven a multiplicarse y a ser infectivas.
- Seimc procedimentos microbiológicos
- C. Pneuminiae y C. psittaci tienen 21 PMPs C. Trachomatis tiene 9 PMPs
- Proteína Hsp: proteína de choque térmico TarP: translocated actin recruiting phosphoprotein. Relacionadas con la invasión Inc: localizadas en las membranas de las inclusiones clamidiales. 7 en C. trachomatis (IncA-G), 3 C. pneumoniae y C. psittaci (IncA-C) en C. psittaci papel importante en impedir la fusión del lisosoma una vez que el CE ha sido fagocitado CrpA activa linfocitos TCD8 CPAF: chlamydial protease-like activity factor. Puede degradar los factores implicados en la transcripción del hospedador necesarios para la presentación de antígenos por parte de los complejos MCH-I y MCH-II
- Seimc y guia text clamidias (sin nombre)
- Leer patogenia del libro azul
- Libro azul, seimc y paper text clamidia
- Conjuntivitis neonatal: 5 a 12 días después del nacimiento Inflamación en la conjuntiva con exudado claro o mucopurulento. Neumonía Eosinofilia, IgM En recién nacidos con pocos días de nacidos puede ser severa y relacionarse con aparición de apneas.
- Seimc en todos los dx Leer koneman
- koneman
- Paper de chlamydia psittaci
- Murray
- Murray
- Murray
- Fijación de complemento: Medida indirecta de Ac que no dan reacciones visibles. Se basan en que la unión Ag-Ac y formación del inmunocomplejo activa el complemento y produce complejos que lesionan membranas celulares (eritrocitos y otras células). Exige que todos los reactivos estén bien cuantificados y usar controles de cada uno. Son pruebas que se realizan en dos fases: 1. Se incuba el suero problema con el Ag y el complemento. 2. Se añade un sistema indicador, como eritrocitos de oveja recubiertos de Ac específicos (hemolisinas). Si se lisan los eritrocitos indica que hay complemento libre que no se fijó en la 1ª reacción y, por tanto, no hay Ac en el suero. Ej: diagnóstico serológico de brucelosis y perineumonía contagiosa bovina (micoplasma), coccidioidomicosis, histoplasmosis, etc.
- Coloración de Giménez utiliza colorante principal fucsina fenicada y como colorante de contraste el verde malaquita o el azul de metileno, realizando la decoloración con ácido débil diluido (ácido acético p cítrico).