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Infecciones por leptospira
- 2. 1886. Dr: alemán Adolf Weil. primera descripción de la infección y forma ictérica de la enfermedad. Leptospiras HISTORIA Del griego leptos: delgado Del latín spira: espiral LEPTOSPIRA
- 3. TAXONOMÍA El género está dividido en 17 especies basadas en estudios de hibridación de ADN Dominio: Bacteria Phylum: Spirochaetes Clase: Spirochaetia Orden: Spirochaetales Familia: Leptospiraceae Género: Leptospira Por sus determinantes antigénicos, está constituido por dos especies: L. interrogans L. biflexa LEPTOSPIRA Patógenas Saprófitas
- 4. LEPTOSPIRA La especificidad de serovar viene conferida por los antígenos O del lipopolisacárido (LPS) Se han identificado serovares utilizando anticuerpos aglutinantes L. interrogans Más de 240 serovares L. biflexa Más de 60 serovares Los serovares homólogos antigénicamente han sido agrupados en serogrupos
- 5. LEPTOSPIRA
- 6. Estructura Espiroquetas delgadas y enroscadas 0,1μm de diámetro y 6 -20 μm de longitud Gancho Flagelo periplasmático Murray, Patrick y col. Microbiología Médica. 7° Edición. 2014. LEPTOSPIRA Las leptospiras son microrganismos helicoidales constituidos por un cuerpo citoplasmático y un axostilo (motilidad) que se disponen en forma espiral. Una membrana envolvente recubre ambas estructuras.
- 7. CARACTERÍSTICAS GENERALES BGN, Aerobios, móviles Temperatura 28-30ºC Medios de cultivo suplementados con vitaminas (B2,B12) No se tiñe con facilidad, pero si con tinción de plata Sensibles a la desecación, calor y frío, pH ácido. pH óptimo 7,2 – 7,4 Murray, Patrick y col. Microbiología Médica. 7° Edición. 2014. LEPTOSPIRA
- 8. LEPTOSPIRA EPIDEMIOLOGÍA Leptopirosis -zoonosis Mayor incidencia en las zonas tropicales (estación lluviosa), especialmente en países en vía de desarrollo
- 10. EPIDEMIOLOGÍA LEPTOSPIRA Transmisión Directo Indirecto Contacto con la orina y tejidos de animales infectados Casos aislados Contacto con agua, suelos o alimentos contaminados Brotes epidémicos Puertas de entrada: Las abrasiones Cortes en la piel vía conjuntiva Después de la inmersión prolongada en el agua.
- 11. EPIDEMIOLOGÍA LEPTOSPIRA Grupos de riesgo Puede adquirirse a través actividades profesionales, recreativas, o exposiciones involuntarias. Pescadores
- 14. FACTORES ASOCIADOS A VIRULENCIA Hemolisina Esfingomielinasa C y H Proteína de unión a la fibronectina para la adherencia e invasión Lipopolisacárido y proteína de la membrana externa Hialuronidasa: Favorece la invasión de los tejidos vasculares No producen exotoxinas. Murray, Patrick y col. Microbiología Médica. 7° Edición. 2014. Bailey & Scott. Diagnóstico Microbiológico. 12ª Edición. 2007 LEPTOSPIRA
- 15. PATOGENIA Túbulos renales Lesiones en piel, mucosa, conjuntiva Torrente sanguíneo L.C.R y riñón Meningitis, disfunsión hepática o renal Contacto con animales LEPTOSPIRA
- 16. Penetración por PE Diseminación hematógena generalizada Barreras hísticas (SNC y humor acuoso) Migración transendotelial Mecanismos autoinmunes (LPS) Producción de toxinas hemolíticas Vasculitis sistémica Hemorragia pulmonar, isquemia renal Necrosis tubular y lesión hepatocelular LEPTOSPIRA PATOGENIA
- 17. El periodo de incubación es de 7 a 26 días, con un promedio de 12 días LEPTOSPIRA En la primera semana, la Leptospira se puede encontrar en sangre y LCR, sin ocasionar síntomas neurológicos. Órgano afectado Efectos Hígado ↑ de los niveles de bilirrubina ↓ de los niveles de albúmina sérica Incremento de los niveles de inmunoglobulina ↓ de los factores dependientes de vitamina K Riñón Hipoxia o el depósito de complejos antígeno-anticuerpo-complemento en los glomérulos Músculo Infiltrado discreto de polimorfonucleares en el tejido muscular ↑ de CK Patogenia Daño en el endotelio de los pequeños vasos
- 18. LEPTOSPIRA
- 19. LEPTOSPIRA MANIFESTACIONES CLÍNICAS Asintomática Sintomática Fase leptospirémica Fase inmune Formas clínicas Anictérica Ictérica Leptospirosis Bifásica
- 20. MANIFESTACIONES CLÍNICAS Periodo de incubación: 5-14 días Forma sistémica autolimitada (90%) Forma grave o enfermedad de Weil (10%) Manifestaciones generales: fiebre aguda, cefalea, inyección conjuntival y mialgias.
- 21. MANIFESTACIONES CLÍNICAS Leptospirosis anictérica Fiebre elevada y cefaleas intensas, nauseas, vómitos, mialgias, exantema macular que dura 3-7 días y que es seguido por el estadio de inmunidad Síntomas asociados con el estadio de inmunidad (aparición de IgM): Variados pero en general mas leves que el estadio septicémico. Céspedez, M. Leptospirosis: Enfermedad Zoonótica Reemergente. Rev Peru Med Exp Salud Publica 22(4), 2005 LEPTOSPIRA Son muy pocos los pacientes que pasan a la segunda fase (fase inmune), donde sólo hay fiebre ligera, la cefalea es intensa, señal de meningitis sin signos neurológicos, y con dolor retro-ocular, mialgias. Puede desarrollarse uveítis a partir de la 2da semana
- 22. MANIFESTACIONES CLÍNICAS LEPTOSPIRA La fase septicémica evoluciona a una enfermedad ictérica grave, con disfunción renal, fenómenos hemorrágicos, alteraciones hemodinámicas cardiacas, pulmonares y del estado de conciencia, asociados a tasas de letalidad que varían de 5 a 20%. En esta forma de la enfermedad, el curso bifásico es raro. Forma ictérica: Enfermedad de Weil
- 23. Forma grave o enfermedad de Weil (10%) Producida por especie L. interrogans cualquiera de sus serovars Presenta: • Ictericia temprana • Deterioro de la función renal • Hemorragias • Colapso vascular • Alteraciones de conciencia • Hiperbilirrubinermia: directa de 20 mg/dl • Aumento marcado de CPK MANIFESTACIONES CLÍNICAS LEPTOSPIRA
- 24. Fase septicémica: fiebre intermitente elevada, derrame conjuntival, mialgias. Duración: 5-7 días con posterior mejoría clínica. Fase inmune: aparece a los 14 días (IgM). Autolimita o Complicaciones** LEPTOSPIRA MANIFESTACIONES CLÍNICAS
- 25. Fase septicémica Hemocultivo LCR* Orina (7 días posterior al inicio) Proteinuria Piuria Con o sin hematuria LEPTOSPIRA MANIFESTACIONES CLÍNICAS
- 26. • Ictericia • Injuria renal • Trastornos del ritmo • Meningitis aséptica • Neumonitis • Hepatoesplenomegalia • Dolor abdominal, • Pancreatitis Fase Inmune LEPTOSPIRA MANIFESTACIONES CLÍNICAS
- 27. LEPTOSPIRA MANIFESTACIONES CLÍNICAS Meningitis Aséptica (80%) • Cefalea o trastorno confusional. • Pleocitosis linfocítica (< 500 cel/mm3). • Proteinorraquia moderada. • Glucorraquia normal. • Complicaciones: GB, Mielitis Transversa, coma, meningoencefalitis
- 28. Alteraciones Hepáticas • La alteración función hepática es deproporcionada a los hallazgos anatomopatológicos. • Bil. directa 80 mg/dl. • Transaminasas no mayores de 200 U/l. ↑ de ALP • Sin necrosis hepatocelular. • Mortalidad aislada infrecuente. LEPTOSPIRA MANIFESTACIONES CLÍNICAS
- 29. Alteraciones Renales • Injuria renal no oligoúrica + ↓K + alt reabsorción de Na. • Injuria renal oligoúrica. • Se acompaña de trombocitopenia sin CID. • Nefritis intersticial aguda. • Glomerulonefritis por CIC. • Necrosis tubular. LEPTOSPIRA MANIFESTACIONES CLÍNICAS Azotemia, oliguria, anuria Orina: piuria, hematuria, cilindros granulosos y hemáticos
- 30. Sx HPG • Puede ocurrir sin insuficiencia hepática ni renal. • Disnea, tos, hemoptisis. • Radiológica: infiltrados alveolares en parches. • Fisiopatología: SDRA + alt intercambio Av-Ar y shock séptico. • Hemorragia intersticial + daño alveolar difuso. LEPTOSPIRA MANIFESTACIONES CLÍNICAS
- 31. Trastornos del ritmo (50%) • Arritmias cardíacas, fibrilación, taquicardia auricular, extrasístoles ventriculares y taquicardia ventricular. • Shock cardiogénico. • Miocarditis intersticial. • Afectación inflamatoria del sistema de conducción. LEPTOSPIRA MANIFESTACIONES CLÍNICAS Miocarditis: arritmias, insuficiencia cardíaca congestiva.
- 32. LEPTOSPIRA MANIFESTACIONES CLÍNICAS Manifestaciones digestivas Nauseas, vómitos, dolor abdominal, diarrea, anorexia. Hemorragia gastrointestinal exteriorizada por hematemesis, melena o enterorragia.
- 33. Enfermedad de Weil † 10% Enfermedad fulminante Mortalidad del 40% Signos de mal pronóstico Edad avanzada (> 40 años) Estado mental alterado Injuria renal aguda Insuficiencia respiratoria Hipotensión y TRC LEPTOSPIRA MANIFESTACIONES CLÍNICAS
- 34. Muestra Centrifugar Lamina y laminilla. Observar al microscopio LEPTOSPIRA DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO Directo Microscopia de campo oscuro Sangre LCR Orina Falsos positivos Fibrillas eritrocíticas o eritrocitos crenados se interpretan equivocadamente como espiroquetas. Eliminar restos celulares
- 35. LEPTOSPIRA DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO Directo El diagnóstico histológico tradicionalmente se basa en la tinción mediante impregnación con plata, pero la tinción inmunohistoquímica tiene mayor sensibilidad y especificidad
- 36. Medio semi-sólido Fletcher: Medio de cultivo liquido conteniendo peptona y extracto de buey enriquecido con un 20% de suero fresco de conejo para el aislamiento, cultivo y mantenimiento de leptospira Medio liquido de Korthof Digestión péptica del tejido animal Cloruro de sodio Bicarbonato de sodio Cloruro de potasio Cloruro de calcio Hidrogenofosfato de monopotasio Hidrogenofosfato disódico PH final (a 25 ° C) LEPTOSPIRA DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO Cultivo Medio Albúmina Sérica Bovina-Tween 80 Líquido o sólido
- 37. Muestras Durante la 1° semana LCR Sangre Orina Fase inmune. 1 mes Orina Fluorouracilo 1500 rpm X 30min Pura y diluida 1/10 Sangre con heparina 500 rpm X 15min Ruptura de los G.R LEPTOSPIRA DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO Cultivo Presencia de Leptospira LCR 0,5 ml a 5 ml
- 38. Cultivos Oscuridad a 30ºC ± 1 6semanas Examinar cada semana LEPTOSPIRA DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO Cultivo 1 o 2 gotas de Muestra 4 tubos de 5ml de medio
- 39. LEPTOSPIRA DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO Serología Microaglutinación Enzimoinmunoanálisis. IgM Inmunofluorescencia indirecta
- 40. LEPTOSPIRA DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO Detección de ácidos nucleicos PCR Hibridación MLST
- 41. Casos leves: no necesitan el uso de antibióticos. Doxiciclina oral Casos moderados: doxiciclina oral. Casos graves: penicilina G (parenteral), ceftriaxona. Pacientes alérgicos: ceftriaxona, tetraciclina TRATAMIENTO
Notas del editor
- Estancia en el planeta por miles de años, Mesopotamia y Egipto Las leptospiras han estado en el planeta por miles de años, encontrándose descripciones probables en Mesopotamia y Egipto, aunque su rol como causantes de enfermedades ha sido identificado en investigaciones relativamente recientes. La publicación del internista alemán Adolf Weil en 1886 es acreditada como la primera descripción detallada de la infección y la forma ictérica de la enfermedad, lleva su nombre. La infección en realidad ha sido conocida y reportada mucho antes, con relatos en la literatura asociando fiebres e ictericia en granjeros, inundaciones y ganado, desde la China e India hasta Europa. Hipócrates postuló sobre ello, así como Galeno y en las campañas Napoleónicas y en viajeros hacia las Américas. Las espiroquetas eran atribuidas como los causantes de un gran rango de enfermedades. Stimpson en 1907, fue el primero en reportar el aislamiento de una leptospira de un paciente humano, describiendo la concentración del organismo en los túbulos renales. Stimpson le dio al nuevo microorganismo el nombre de Spirocheta interrogans debido a la morfología del organismo en forma de signo de interrogación. La Primera Guerra Mundial incrementó las investigaciones, por razón de las condiciones de atrincheramiento que causaba un incremento inusual de la infección. Los representantes de ambos frentes de batalla hicieron descubrimientos importantes sobre el organismo, sus serotipos y el papel que juegan en las infecciones, y el tratamiento efectivo del mismo. El reservorio natural fue descubierto en las ratas en Ecuador y México entre los años 1818 y 1819.5 La mayoría del conocimiento de la patología y la epidemiología actual fue definida antes de 1940, de modo que la investigación en el presente está enfocada a la secuencia del ADN y los procesos celulares internos que le confiere al organismo su virulencia, inmunidad y el mejoramiento en el desarrollo de medidas profilácticas.
- L.biflexa. Es una espiroqueta saprófita de vida libre sin capacidad patogénica Paper leptospirasa08
- Revisar Mandell y paper leptospirasa08
- Paper leptospira SPV El axostilo consiste en dos filamentos axiales que se insertan en la extremidad del cuerpo citoplasmático, por medio de botones terminales. Esta organela es la encargada de la motilidad de la leptospira. Es una bacteria muy fina, de 6 a 20 μm de largo, pero cultivos ocasionales pueden contener células mucho más largas. La amplitud helicoidal es de aproximadamente 0,1 a 0,15 μm, y la longitud de onda es de aproximadamente 0,5 μm (Levett, 2001). Al microscopio de campo oscuro puede observarse que una de las extremidades termina en gancho.
- Aerobios, móviles Temperatura óptima de crecimiento 28-30ºC
- Papers 08 y SPV Infección renal crónica en los animales portadores.
- Paper leptospira 08 El contacto indirecto es importante para los obreros de desagüe, mineros, militares, los limpiadores de tanque sépticos, criadores de peces, guardabosques, obreros de canales, agricultores que se dedican al cultivo de arroz, plátanos, caña de azúcar y otros
- Mandell
- Paper 08
- Paper leptospirasa 08 La fiebre es de carácter remitente alcanzando 40 ºC o más. Con cierta frecuencia se observa un exantema macular de pocas horas de duración, en el tronco. Se puede presentar confusión mental, tos, dolor toráxico o hemoptisis y exantema petequial en el paladar. La evolución de estos casos es usualmente satisfactoria en un periodo de cuatro a diez días.
- la fase inmune se puede caracterizar por cualquiera (o todos) de los siguientes síntomas y signos: ictericia, insuficiencia renal, arritmias cardíacas, síntomas pulmonares, meningitis aséptica, derrame conjuntival con o sin hemorragia, fotofobia, dolor ocular, dolormuscular a la palpación, adenopatías y hepatoesplenomegalia (v. tabla 240-2). El dolor abdominal no es infrecuente, y puede ser un indicador de pancreatitis.
- LCR: pleocitosis linfocitaria (<500 linfocitos/µl), hiperproteinorraquiay glucorraquia nomal. Pueden producirse con poca frecuencia complicaciones neurológicas graves como coma, meningoencefalitis, hemiplejía, mielitis transversa y síndrome de Guillain-Barré
- La azotemia (o azoemia) es una condición clínica caracterizada por los niveles anormalmente altos de compuestos nitrogenados en la sangre, tales como la urea, creatinina, desperdicios del metabolismo celular, y varios otros compuestos ricos en nitrógeno. Está principalmente relacionada con problemas renales, lo cual impide la correcta filtración y depuración de la sangre.
- Síndrome de hemorragia pulmonar grave SHPG
- En más del 50% de los pacientes a los que se realiza monitorización cardíaca continua se pueden observar arritmias cardíacas, como fibrilación, flúter y taquicardia auricular, e irritabilidad cardíaca, que incluye extrasístoles ventriculares y taquicardia ventricular66. La fibrilación auricular se asocia a enfermedad más grave67. Puede producirse súbitamente colapso cardiovascular con shock, que puede ser mortal si no se administra un tratamiento de soporte intensivo.
- Paper leptospiras SPV
- Mandell el riesgo de muerte aumentaba con la edad, especialmente en adultos de 40 años de edad o mayores. Se ha encontrado que la alteración del estado mental es el principal factor predictivo de muerte. Otros signos de mal pronóstico son insuficiencia renal aguda (oliguria, hiperpotasemia, creatinina sérica >3,0 mg/dl), insuficiencia respiratoria (disnea, crepitantes pulmonares, infiltrados en la radiografía de tórax), hipotensión y arritmias.
- Tween 80. Fuente de ácidos grasos de cadena larga Medio de Korthof. La leptospirosis es una enfermedad febril aguda causada por miembros del género Leptospira. El cultivo directo de sangre es el La forma más confiable de detectar Leptospira durante la primera semana de enfermedad. Después de la primera semana de enfermedad y durante varios meses, a partir de entonces, las leptospiras pueden aislarse mediante cultivo directo de muestras de orina sin diluir. Por autopsia, las leptospiras pueden aislarse de tejidos renales y hepáticos, así como de sangre y orina. Leptospira Medium Base, Korthof, Modified está formulado como descrito por Korthof para el cultivo y mantenimiento de especies de Leptospira. La digestión péptica del tejido animal proporciona aminoácidos y otras sustancias nitrogenadas para apoyar el crecimiento bacteriano. Hemoglobina La solución y el suero sanguíneo inactivado proporcionan fuentes adicionales de nutrientes a las Leptospiras. El suministro de sales es esencial nutrientes para el crecimiento de los organismos. Los fosfatos forman un sistema de amortiguación mientras que el cloruro de sodio mantiene el equilibrio osmótico y también proporciona iones esenciales. Todos los cultivos se incuban a temperatura ambiente en la oscuridad durante hasta 6 semanas. Los organismos crecen debajo de la superficie. Material recolectados a unos pocos centímetros debajo de la superficie de los cultivos de caldo deben examinarse semanalmente para detectar la presencia de crecimiento usando una preparación húmeda directa bajo iluminación de campo oscuro. Letpospires exhibirá sacacorchos como motilidad. Examine el crecimiento de los tubos cada 5-7 días. El crecimiento ocurre como un área anillada (disco) 1-3 cm debajo de la superficie del medio. La ausencia de un área de crecimiento anillada no significa necesariamente que las leptospiras no estén presentes. Eliminar una pequeña cantidad de crecimiento del área del disco y examinar microscópicamente (la tinción de Gram no es satisfactoria). Las microcolonias se pueden arreglar con metanol y manchado con la mancha de Giemsa para mostrar formas de varilla
- Las muestras se deben recoger en condiciones asépticas en recipientes estériles y sin conservantes, y se deben procesar poco tiempo después de la obtención; se obtienen los mejores resultados cuando el retraso es menor de 1 hora, porque las leptospiras no sobreviven bien en entornos ácidos
- El método de análisis estándar de referencia es la prueba de aglutinación microscópica (MAT), en la que se hacen reaccionar antígenos vivos que representan diferentes serogrupos de leptospiras con muestras de suero, y después se examinan mediante microscopia de campo oscuro para detectar aglutinación9. Se trata de una prueba compleja de mantener, realizar e interpretar, y su uso está restringido a algunos laboratorios de referencia. (Mandell)
- determina la capacidad del suero del paciente de aglutinar las leptospiras vivas, utilizando mezclas de antígenos leptospira)