El pronóstico de carcinoma, se determina por la diseminación sanguínea de las células tumorales circulantes (CTC) y la consecuencia de un subconjunto desconocido en gran parte de estas células ("células iniciadoras de metástasis") en metástasis abiertas en su nuevo microambiente

1. BIOPSIA LIQUIDA
SANDRO CASAVILCA ZAMBRANO
PATÓLOGO ONCÓLOGO. JEFE DE BIOBANCO
INSTITUTO NACIONAL DE ENFERMEDADES NEOPLÁSICAS

2. Introducción
• Definición de Biopsia Líquida:
• Caracterización molecular del tumor para guiar el tratamiento :
• Cada vez más frecuente.
• Gran impacto en el desenlace de la enfermedad.
"La extracción de células o tejidos para su examen por un patólogo"
(National Cancer Institute, NIH, Bethesda, MD)

3. Biopsia Líquida
Generalidades
El proceso de metástasis o invasión
involucra diferentes eventos:
1. Intravasión
o ingreso de
las células
tumorales a
los vasos
sanguíneos
en la sangre
periférica;
2.
Extravasión
de los vasos
sanguíneos a
los tejidos;
3.
Proliferación
tumoral; y
4.
Angiogénesis
en los
tejidos.
El tumor primario no es estático,
cambia constantemente en el
tiempo y con los tratamientos.

4. • El pronóstico de carcinoma, se determina por la diseminación sanguínea de las células
tumorales circulantes (CTC) y la consecuencia de un subconjunto desconocido en gran
parte de estas células ("células iniciadoras de metástasis") en metástasis abiertas en su
nuevo microambiente.
Biopsia Líquida
Generalidades

5. • Introducido para el análisis de CTC Y
ADNct.
• Aunque este término es adecuado para los
CTC, parece algo engañoso cuando se
aplica al ADNct
• Componente celular fragmentado liberado
principalmente por células tumorales muertas.
Biopsia Líquida
Generalidades
Cell-free DNA (cf-DNA)
Circulating Tumor DNA
(ctDNA)
Circulating Tumor Cells
(CTCs)
Exosomes
Micro-RNAs
Other

6. MECANISMOS POR LOS CUALES EL ADN PUEDE
ENTRAR EN LA CIRCULACIÓN
• MECANISMOS PASIVOS
• Sugiere que las células apoptóticas y necróticas liberan ADN
nuclear y mitocondrial en la circulación en el proceso de
destrucción celular.
• en condiciones fisiológicas normales, los fagocitos
infiltrantes limpian los restos apoptóticos y necróticos.
• dentro de una masa tumoral, lleva a una acumulación
de desechos celulares, incluido ADN, que luego se
libera a la sangre.
• MECANISMOS ACTIVOS
• La liberación activa de ADN en estudios con líneas celulares
cultivadas de diferentes orígenes se cree que implica la
liberación espontánea de fragmentos de ADN en la
circulación.
• Múltiples hipótesis
• posibilidad de que las células cancerosas liberen ADN
oncogénico para influir la transformación de células
susceptibles en sitios distantes.

7. Biopsia Líquida
Generalidades

8. Biopsia Líquida
Generalidades
Células Circulantes Tumorales y DNAct
- CTC y DNAct se encuentran a muy bajas
concentraciones en sangre periferica – log
- Aumenta concentración en condiciones
de enfermedad avanzada
- Tecnicas de enriquecimiento
- 7.5ml – 5 CTC
- 1 ml suero – 0.1-2ng DNA
- Identificación / detección
- Marcador

9. La detección y la caracterización molecular de las células tumorales
circulantes (CTC), son una de las áreas más activas de la
investigación traslacional en cáncer, con estudios clínicos que
incluyeron CTC como biomarcador.
El análisis de alteraciones genéticas ligadas a
tumores se usa cada vez más con fines de
diagnóstico, pronóstico y tratamiento
Permite rastrear sistemáticamente la
evolución genómica de la enfermedad
Biopsia Líquida
Aplicaciones en investigación

10. Estimar el riesgo de recaída metastásica o progresión metastásica
(información pronóstica)
Estratificación y monitoreo en tiempo real de las terapias
Identificación de objetivos terapéuticos y los mecanismos de resistencia
La comprensión del desarrollo de metástasis en pacientes con cáncer
Biopsia Líquida
Objetivos de la investigación sobre las CTC:

11. • Los enfoques digitales basados en
PCR se han actualizado con técnicas
que usan:
• Secuenciación de próxima generación
(NGS)
• Técnicas con capacidad de detección
de una única mutación puntual.
Biopsia Líquida
Aberraciones genéticas asociadas a tumores

12. • Los cambios de metilación presentes
en el genoma tumoral también están
presentes en los fragmentos de ADN
detectados en la circulación.
• Metil-beaming
• PCR específica de metilación
• Transferencia de energía de
resonancia de fluorescencia basada
en quantumdot (QD-FRET)
Biopsia Líquida
Técnicas y sensibilidad diagnóstica

13. • El micro ARN circulante (cmiARN) en sangre de pacientes con cáncer por su
potencial como biomarcadores mínimamente invasivos.
• miARNs específicos en sangre como biomarcadores de diagnóstico / pronóstico; sin
embargo, las metodologías no están validadas o estandarizadas en todos los
laboratorios.
Biopsia Líquida
Técnicas y sensibilidad diagnóstica
A pesar de la reciente reducción en el costo de microarrays y NGS, y su precisión
computacional mejorada, rt-qPCR sigue siendo el método más utilizado para
validar los resultados de microarrays y NGS, probablemente porque exhibe la
mayor sensibilidad y especificidad relativas

14. Biopsia Líquida
Generalidades

15. SCIENCE
TRANSLATIONAL
MEDICINE, 2018
VOL 10; ISSUE 433

16. El CMTN es un tipo de tumor altamente agresivo y
prevalente en la población peruana, posee
diferencias biológicas notables en comparación con
otros subtipos de CM, concretamente posee una
respuesta limitada a QT, alto riesgo de desarrollar
metástasis, una corta sobrevida y no tiene
tratamiento específico.
Biopsia Líquida
Cáncer de mama triple negativo

17. ...y sin embargo, actualmente las aproximaciones disponibles son las
imágenes médicas, biopsias y cirugias para determinar la patología del
mismo, debido a lo mismo, la información que se obtiene no es exacta para
cada momento de la enfermedad.

18. BiopsiaPACIENTE
NUEVA
QTN
CIRUGÍA
Sangre
periférica
Dx
Sangre
periférica
Dx
QTN
QT/RT
Sangre
periférica
Sangre
periférica
CIRUGÍA
QT/RT
Sangre
periférica
Sangre
periférica
Biopsia
Progresión
ProgresiónEvolución
Imagenes
Evolución
Biopsia Líquida
Cáncer de mama triple negativo

19. Biopsia Líquida
Cáncer de mama triple negativo

20. Biopsia Líquida
Cáncer de mama triple negativo

21. • La medicina personalizada para
pacientes con cáncer tiene como
objetivo adaptar las mejores opciones
de tratamiento para el individuo en el
momento del diagnóstico y durante el
tratamiento.
Biopsia Líquida
Aplicaciones de la biopsia liquida

22. BIBLIOGRAFIA
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68.

23. GRACIAS