Este documento describe una práctica de laboratorio para estudiantes de 4o de ESO sobre la identificación del grupo sanguíneo y el reconocimiento de células de la sangre. Los estudiantes extraerán sangre, determinarán su grupo sanguíneo usando reactivos, y observarán las células de la sangre teñidas al microscopio para identificar eritrocitos, leucocitos y plaquetas. Completarán una hoja de prácticas con dibujos y respuestas a preguntas.
Quiero compartir la información que recopilé, ya que estuve dudando por la variación de las fuentes y afirmaciones. Después de haber verificado que esto es correcto, decidí subirlo para facilitarle la vida a alguien. ¡Espero sirva de ayuda!
Quiero compartir la información que recopilé, ya que estuve dudando por la variación de las fuentes y afirmaciones. Después de haber verificado que esto es correcto, decidí subirlo para facilitarle la vida a alguien. ¡Espero sirva de ayuda!
INTRODUCCIÓN
Para el estudio satisfactorio del frotis sanguíneos, es necesario colorearlos. En la mayoría de los laboratorios los colorantes más empleados para la tinción hematológica se basan en el de Romanowsky constituido fundamentalmente con la mezcla de eosina (ácido) y azul de metileno (básico). Además se han incorporado el empleo de derivados por oxidación del azul de metileno que se conoce con el nombre de azures (A, B, C). Son los azures los responsables de la coloración púrpura o roja de ciertas estructuras.
Tanto la eosina como el azul de metileno son muy sensibles a las variaciones de pH de las diferentes estructuras celulares, de forma que las que tienen carácter básico fijan la eosina mientras que las que poseen propiedades ácidas fijan principalmente el azul de metileno. Esto explica que las estructuras basófilas se tiñan de color azul mientras que los competente acidófilas adquieren un color rosado. La diferente afinidad de ciertas granulaciones citoplasmáticas por dichos colorantes permite clasificar a los leucocitos polimorfonucleares.
TINCIÓN DE WRIGHT
Esta coloración es conocida como policromática debido a que produce varios colores. Es una solución de alcohol metílico de un colorante ácido (eosina) y otro básico (azul de metileno). El alcohol sirve como un fijador del frotis sanguíneo al portaobjetos. El amortiguador, que consiste en una solución tamponada, mantiene el pH del colorante y favorece la mejor absorción por los diferentes componentes celulares.
La tinción de Wright.
Es de gran trascendencia clínica ya que gracias a ella es capaz de identificarse diversas estructuras en una célula así como la morfología y en su caso patología celular no solo de las células del sistema inmunológico sino de todas aquellas que componen la sangre ya sea en un paciente sano o con un estado patológico.
MATERIALES
Colorante Wright
Laminas porta objeto
Laminas cubre objetos
Aceite de inmersión
Agua destilada
Gotero
Rejilla
Materiales extracción de muestra:
• Guantes
• Algodón
• Ligadura
• Jeringa
• Tubo lila con EDTA
• Plumón
• Alcohol
• Capilar
EQUIPO
o Microscopio óptico con luz incorporada.
MUESTRA
Sangre periférica
EXTRACCIÓN DE LA MUESTRA SANGUÍNEA.
• Cuando el paciente esté cómodo echamos un vistazo a sus brazos para decidir un sitio para la punción. El brazo debe ser extendido y lo relajado posible.
• Palpamos la vena para averiguar sus características (tamaño, elasticidad o rigidez, determinar si de desplaza o no) y su curso.
• Limpiamos con alcohol la zona elegida para la punción.
• Colocamos el torniquete, este puede ayudarnos para decidir dónde pincha, pedir al paciente de cerrar el puño para aumentar el volumen de sangre intravenosa (Un tiempo de compresión demasiado largo causa la acumulación de sangre y ciertas sustancias en la vena que pueden alterar el resultado de
INTRODUCCIÓN
Para el estudio satisfactorio del frotis sanguíneos, es necesario colorearlos. En la mayoría de los laboratorios los colorantes más empleados para la tinción hematológica se basan en el de Romanowsky constituido fundamentalmente con la mezcla de eosina (ácido) y azul de metileno (básico). Además se han incorporado el empleo de derivados por oxidación del azul de metileno que se conoce con el nombre de azures (A, B, C). Son los azures los responsables de la coloración púrpura o roja de ciertas estructuras.
Tanto la eosina como el azul de metileno son muy sensibles a las variaciones de pH de las diferentes estructuras celulares, de forma que las que tienen carácter básico fijan la eosina mientras que las que poseen propiedades ácidas fijan principalmente el azul de metileno. Esto explica que las estructuras basófilas se tiñan de color azul mientras que los competente acidófilas adquieren un color rosado. La diferente afinidad de ciertas granulaciones citoplasmáticas por dichos colorantes permite clasificar a los leucocitos polimorfonucleares.
TINCIÓN DE WRIGHT
Esta coloración es conocida como policromática debido a que produce varios colores. Es una solución de alcohol metílico de un colorante ácido (eosina) y otro básico (azul de metileno). El alcohol sirve como un fijador del frotis sanguíneo al portaobjetos. El amortiguador, que consiste en una solución tamponada, mantiene el pH del colorante y favorece la mejor absorción por los diferentes componentes celulares.
La tinción de Wright.
Es de gran trascendencia clínica ya que gracias a ella es capaz de identificarse diversas estructuras en una célula así como la morfología y en su caso patología celular no solo de las células del sistema inmunológico sino de todas aquellas que componen la sangre ya sea en un paciente sano o con un estado patológico.
MATERIALES
Colorante Wright
Laminas porta objeto
Laminas cubre objetos
Aceite de inmersión
Agua destilada
Gotero
Rejilla
Materiales extracción de muestra:
• Guantes
• Algodón
• Ligadura
• Jeringa
• Tubo lila con EDTA
• Plumón
• Alcohol
• Capilar
EQUIPO
o Microscopio óptico con luz incorporada.
MUESTRA
Sangre periférica
EXTRACCIÓN DE LA MUESTRA SANGUÍNEA.
• Cuando el paciente esté cómodo echamos un vistazo a sus brazos para decidir un sitio para la punción. El brazo debe ser extendido y lo relajado posible.
• Palpamos la vena para averiguar sus características (tamaño, elasticidad o rigidez, determinar si de desplaza o no) y su curso.
• Limpiamos con alcohol la zona elegida para la punción.
• Colocamos el torniquete, este puede ayudarnos para decidir dónde pincha, pedir al paciente de cerrar el puño para aumentar el volumen de sangre intravenosa (Un tiempo de compresión demasiado largo causa la acumulación de sangre y ciertas sustancias en la vena que pueden alterar el resultado de
Instrucciones del procedimiento para la oferta y la gestión conjunta del proceso de admisión a los centros públicos de primer ciclo de educación infantil de Pamplona para el curso 2024-2025.
1. I.E.S. Rayuela - Departamento de Biología y Geología.
Práctica nº 3 de Biología de 4º de ESO
Identificación del grupo sanguíneo y reconocimiento de células de la
sangre.
Objetivos
❍ Conocimiento de técnicas de análisis de grupos sanguíneos
❍ Reconocimiento de los diferentes tipos de células sanguineas.
Material
- Microscopio - Portaobjetos - Cubreobjetos - Alfiler - Etanol
- Cuentagotas - Colorante Wright - Agua destilada
- Reactivos de determinación de grupo sanguíneo
Desarrollo
Extracción de sangre
En esta práctica se realizará por una parte un análisis de grupos sanguíneos y por otra se observarán
las células de la sangre. Para ello hay que extraer sangre con ayuda de una lanceta diseñada para ello. La
herida no es dolorosa. Es muy importante no intercambiar la lanceta ni utilizarala para varios
individuos. Hay enfermedades graves que se contagian por la sangre.
● Limpiar la yema de un dedo y frotarla con algodón empapado en alcohol
● Con la lanceta bien desinfectada hacer una punción
● Apretar el dedo y depositar cuatro gotas de sangre en cuatro portaobjetos bien limpios, (tres gotas
en tres portaobjetos para el análisis del grupo sanguíneo y una para la observación de las células)
Realizar rápidamente las dos prácticas sin dejar coagular la sangre.
Identificación del grupo sanguíneo
En la especie humana existen varios genes diferentes implicados en la compatibilidad o
incompatibilidad de las transfusiones de sangre. Los dos grupos principales se conocen como ABO y Rh.
El sistema ABO es consecuencia de la presencia de una proteína en la cubierta de los glóbulos
rojos. Para esta proteína se conocen dos formas inmunológicamente diferentes la forma A y la forma B. Las
dos formas tienen igual importancia inmunológica. Los grupos sanguíneos A, B y AB se refieren al tipo de
proteínas que presenten los glóbulos rojos; en el caso de que no se presente esta proteína se incluye a
estos individuos en el grupo sanguíneo 0.
El factor Rh corresponde a una proteína del plasma. La presencia de esta proteína es Rh+ y la
ausencia Rh-
La determinación del grupo sanguíneo se efectua enfrentando los hematíes problema con reactivos
de especificidad conocirda anti-A, anti-B y anti-D. La aglutinación o no de los hematíes ensayados frente a
cada uno de los reactivos es indicativa de la presencia o ausencia de los correspondientes antígenos.
Procedimiento
● Extraer sangre como se apunta en el apartado anterior
● Poner 3 gotas en tres portaobjetos. Una en cada uno de ellos
● Verter uno de los reactivos sobre cada gota de sangre
● Mezclar bien la sangre con el reactivo formando un círculo de unos 2 cm de diámetro
● Mover el portaobjetos lentamente con movimientos basculantes durante 2 minutos
● Observar la aparición o no de aglutinación
La reacción es positiva si se produce aglutinación. Suele tardar pocos segundos
La reacción es negativa si no se observa aglutinación al cabo de dos minutos en reposo.
2. Grupo ABO Aglutinación Factor Rh Aglutinación
Grupo A reactivo anti-A Rh + Reactivo anti-D
Grupo B reactivo anti-B Rh - No aglutina anti-D
Grupo AB reactivos anti-A y anti-B
Grupo 0 Ni anti-A ni anti-B
Por ejemplo Aglutina anti-A . No aglutina anti-B . Si aglutina anti-D : Grupo Sanguíneo A+
Observación de células sanguíneas
En la sangre se pueden observar varios tipos celulares. Su cantidad y proporción pueden ser
indicativos de diversas enfermedades o alteraciones.
● Hacer un frotis de la gota de sangre con otro porta. El frotis se hace extiendiendo la sangre de forma
rápida y contínua arrastrando un porta sobre el que contiene la sangre con un ángulo de inclinación
de unos 45º . Esta operació se realiza para extender la sangre que, de otro modo coagularía en
grandes masas inpidiendo la observación.
● Dejar secar al aire
● Teñir la preparación cubriéndola con varias gotas de colorante Wright. Mantenerla con el tinte
durante 2 minutos
● Añadir a continuación tantas gotas de agua destilada como las que se pusieron de colorante.
Mantener la preparación con esta mezcla durante 3 minutos
● Lavar con agua destilada vertiéndola gota a gota durante medio minuto
● Dejar secar al aire
● Poner un cubreobjetos y observar al microscopio.
Las células sanguíneas aparecer teñidas del siguiente modo:
– Núcleos celulares en azul
– Eritrocitos en rojo claro.
– Citoplasmas de los granulocitos granulados (rojo en eosinófilos, azul intenso en basófilos y violáceo en
neutrófilos).
– Citoplasma de los linfocitos y monocitos en azul claro
– Plaquetas en azul claro
Hoja de prácticas
● Hacer un esquema del protocolo seguido para la determinación del grupo sanguíneo
● Anotar los resultados delos reactivos e indicar el grupo sanguíneo
● Hacer un esquema de los pasos seguidos para la observación de células sanguíneas
● Hacer un dibujo del aspecto general de la preparacióm indicando el aumneto
● Hacer dibujos detallados de los diferentes tipos de células sanguíneas observados
● Responder a las preguntas de la hoja de prácticas.
Notas
– Los esquemas a los que se refieren los puntos anteriores son una serie de dibujos esquemáticos
muy claros de la secuencia de acciones seguida en cada caso, acompañados de un texto explicativo
resumido.
– Los dibujos de las preparaciones y las células deben ser claros y de tamaño grande para que se
aprecien todas las estructuras observadas. Hay que intentar que sean lo más fieles posibles al original
sin inventarse nada.
– Se colorearán como aparecen en la preparación
– Se anotará el número de aumentos con los que se ha observado la preparación
3. Departamento de Biología y Geología – Hoja de Prácticas
Práctica nº 3 de 4º de ESO: Identificación del grupo sanguíneo
Nombre y apellidos Curso Fecha
Esquma del protocolo seguido para el análisis del grupo sanguíneo
Resultado
Anti -A: Anti -B: Anti- D:
Grupo Sanguíneo
4. Reconocimiento de células de la sangre.
Esquema preparación sangre Aspecto general de la preparación de sangre
Aumento
Tipos celulares
Tipo celular
Aumento
Tipo celular
Aumento
Tipo celular
Aumento
Tipo celular
Aumento
¿Qué características distinguen a los eritrocitos
de las otras células sanguíneas?
¿Por qué tiene estas características?
¿Que tipos de leucocitos has observado?
¿Cuales son más abundantes?