El documento describe los cromosomas, incluyendo su estructura, clasificación, número y métodos para su análisis como el cariotipo, bandeo cromosómico, hibridación in situ fluorescente (FISH) y citometría de flujo. Los cromosomas son estructuras que contienen los genes y facilitan la reproducción celular. El ser humano tiene 46 cromosomas en total.

1. CROMOSOMAS
Dra. Fedra N. Prieto M.

2. Un examen de la historia de la Genética y su relación
con los fenómenos sociales, aporta varias
lecciones, entre ellas que los planteamientos de los
genetistas son rápidamente asimilados por el público y
pueden ser trasladados a la vida social, a veces con
consecuencias negativas; sobre todo si los
genetistas, atrapados por el entusiasmo de los éxitos de
la Biología Molecular, contribuyen a dar un punto de
vista no balanceado sobre el rol de la Genética en la
aparición de las enfermedades. Los genetistas tienen un
papel clave y una responsabilidad, en asegurar que los
progresos en este campo, no sean usados para hacer
daño, sino para el beneficio del hombre.

3. CROMOSOMAS
• Son estructuras filamentosas situadas en el
nucleo celular.
• Etimologia chroma= color y Soma=cuerpo.
• Estan constituidos por genes
• Son los vehiculos que facilitan la reproduccion
y la perpetuacion de la especie.

4. ESTRUCTURA

5. CLASIFICACION
• MORFOLOGIA
• Metacentrico
• Submetacentrico
• Acrocentrico (satelites nucleolo)
• LONGITUD
• Grandes
• Medianos
• Pequenos

6. CLASIFICACION
• Por la posición del centromero

7. SUBDIVISION
• A=1–3
• B=4–5
• C = 6 – 12 + X
• D = 13 – 15
• E = 16 – 18
• F = 19 – 20
• G = 21 – 22 + Y

8. NUMERO
• El numero de cromosomas se relaciona con la
especie. Asi por ejemplo:
• Gusano intestinal = 2 cromosomas
• Crustaceo = 1500 – 1600 cromosomas
• Mono Titi = 46 cromosomas
• Chimpance = 48 cromosomas
• Hombre = 46 cromosomas

9. NUMERO
• 46 Cromosomas en su totalidad
• 44 cromosomas autologos
• 2 cromosomas sexuales
• Los Gametos (0vulo y espermatozoide)
• 23 Cromosomas en su totalidad
• 22 cromosomas autologos
• 1 cromosoma sexual
• En 1956 Tijo y Levan determinaron 46
cromosomas el numero de cromosomas para la
especie humana.

10. CROMOSOMAS SEXUALES
• Son los cromosomas X - Y que juegan un
papel crucial en la determinacion del sexo.
• CROMOSOMA X.- Se lo denomino asi por la
incertidumbre respecto a su funcion.
• CROMOSOMA Y.- Es mucho mas pequeno que
el cromosoma X y contiene unicamente unos
cuantos genes de importancia funcional

11. METODOS PARA EL ANALISIS
CROMOSOMICO
• Objetivo: Se busca analizar la constitucion
cromosomica de un individuo.
• CARIOTIPO.- fotomicrografia de los
cromosomas individualizados y ordenados en
forma estandarizada. O tambien constitucion
cromosomica de un individuo.

12. CARIOTIPO

13. PREPARACION DE LOS CROMOSOMAS
• Se requieren celulas vivas nucleadas, por lo
general se utilizan linfocitos de circulacion
periferica. O bien celulas de la piel, medula
osea, vellosidades corionicas o amniocitos.

14. PREPARACION DE CROMOSOMAS
1.- Aislar linfocitos.
2.- Cultivo con fitohemaglutinina. 37⁰C 3 dias.
3.- Colchicina.
4.- Solucion Hipotonica.
5.- Montar, fijar y secar.

15. BANDEO CROMOSOMICO
• Bandeo G.- Giemsa.

16. BANDEO CROMOSOMICO
- Bandeo Q – Quinacrina

17. BANDEO CROMOSOMICO
- Bandeo R – Reverso

18. BANDEO CROMOSOMICO
- Bandeo C – Heterocromatina Centromerica

19. BANDEO CROMOSOMICO
- Bandeo de alta resolución

20. ANALISIS CROMOSOMICO
- Contar numero de cromosomas en un numero
especifico de células (extensiones de
metafases). 10 a 15 células.
- Análisis del Patrón de Bandas de cada
cromosoma individual en esas células.3 a 5
extensiones de metafases.
- Mosaicismos, 30 o mas células.

21. ANALISIS CROMOSOMICO
- IDIOGRAMA = cariotipo ideal estilizado .
Muestra los cromosomas ordenados en pares
y en orden descendente según el tamaño.

22. IDIOGRAMA

23. CITOGENETICA MOLECULAR
• HIBRIDACION IN SITU FLUORESCENTE (FISH)
Fluorescent in situ hibridization
Es una técnica de marcaje de cromosomas
mediante la cual los cromosomas son
hibridados con sondas que emiten
fluorescencia y que gracias a ello permiten la
visualización, distinción y estudio de los
cromosomas así como de las anomalías que
puedan presentar.

24. FISH
• Usa segmentos de una única hebra de ADN que
son tintados, o etiquetados, con una sustancia
fluorescente que puede ligarse a un cromosoma
específico; estos segmentos de ADN son llamados
sondas.
• Los cromosomas que son usualmente utilizados
con FISH son los 13, 18, 21, X e Y; sin
embargo, como son posibles marcados
adicionales del cromosoma, otros cromosomas
pueden ser visualizados con esta técnica.

25. FISH

26. TECNICA FISH
• Desnaturalización del DNA para separar la doble
hélice.
• Añadir la sonda de interés (fragmento de ADN
marcado fluorescentemente).
• Las sondas hibridan a regiones específicas.
• Se tiñen los núcleos con un color de contraste
inespecífico.
• Las sondas de DNA pueden marcarse con
moléculas fluorescentes (método directo) o no
fluorescentes que se detectan con anticuerpos
fluorescentes (método indirecto).

27. TECNICA FISH

28. TECNICA FISH
• La técnica FISH puede realizarse a los cromosomas en
metafase o en interfase.
• En metafase se utiliza para detectar microdeleciones
específicas, translocaciones o para identificar material
extra de origen desconocido. Los tipos de sondas
usadas son cósmidos, satélites alfas y sondas
completas (painting probes).
• En interfase se emplea sobre todo para la detección de
aneuploidias o grandes delecciones, duplicaciones o
translocaciones en células fetales o tumorales.

29. FISH EN METAFASE
• Los cósmidos son secuencias únicas que hibridan con
fragmentos pequeños. Se emplean en estudios de
microdeleciones.
• Las sondas satélites están formadas por secuencias
altamente repetidas que se encuentran cerca de lo
centrómeros. En la mayoría de los casos son específicas
de cada cromosoma. Se usan para determinar
aneuploidias o para identificar el origen de
cromosomas marcadores.
• Las sondas completas consisten en la suma de varias
sondas que hibridan en distintas zonas del cromosoma

30. OTRAS TECNICAS FISH
• FISH múltiple, FISH en hebra y FISH inverso.
• FISH multiple (pintar cromosomas) Mezcla de
sondas de diferentes partes de un
cromosoma, el cromosoma entero fluorece.
• FISH inverso (pintar a la inversa) Este tipo
tendrá la peculiaridad de ser el ADN problema
el que se marque.

31. FISH MULTIPLE

32. CITOMETRIA DE FLUJO
• La citometría de flujo es una técnica de
análisis celular que implica medir las
características de dispersión de luz y
fluorescencia que poseen las células conforme
se las hace pasar a través de un rayo de luz.

33. CITOMETRIA DE FLUJO
• Debido a las diferencias en tamaño y composición
del ADN, los cromosomas se unen a diversas
cantidades de colorantes fluorescentes, algunas
de las cuales son especificas para secuencias G-C
(gen rico) y otras para secuencias A-T (gen
pobre).
• Esta propiedad de uniones diferentes permite
que los cromosomas se puedan separar mediante
el proceso de citometria de flujo o separacion
celular activada por fluorescencia (FACS)

34. FACS
• Fluorescent activated cell sorting
• Consiste en teñir los cromosomas metafasicos
con un colorante de ADN fluorescente.
• Los cromosomas se proyectan como finas gotas a
través de un haz de laser que los excitan hasta
que fluorescen.
• Un fotomultiplicador mide la intensidad de la
fluorescencia y un ordenador analiza los
resultados, elaborando un histograma con el
tamaño cromosómico: CARIOTIPO DE FLUJO

35. CITOMETRIA DE FLUJO