Este documento describe un estudio para determinar los niveles de las enzimas pancreáticas amilasa y lipasa en un paciente. Los resultados mostraron niveles elevados de amilasa (1006.68 U/L) y lipasa (643 U/L), lo que indica que el paciente podría estar sufriendo una pancreatitis aguda.

1. UNIVERSIDAD TÉCNICA PARTICULAR DE LOJA
Alejandro Stalin; Encalada Karem; Muñoz Jéssica; Pozo Gabriel
Determinación de Enzimas Pancreáticas.
RESUMEN.
Las enzimas son moléculas esenciales para la buena salud producidas por el cuerpo, a cada
instante millonesde ellastrabajan en el organismo para que podamos respirar, saltar o comer. El
páncreasparticipaenla digestiónyabsorciónde los alimentos mediante la secreción de enzimas
al intestino conocidas como las enzimas pancreáticas, como la lipasa y amilasa.(1)
Los valores referenciales de la lipasa son de 0 a 160 unidades por litro (U/L) (2), mientras que el
rango normal de la amilasa es de 23 a 85 unidades por litro (U/L). Algunos laboratorios dan un
rango de 40 a 140 U/L(3).
PALABRAS CLAVE: Enzimas pancreáticas – Lipasa - Amilasa.
INTRODUCCIÓN.
Dentrodel grupode enzimaspancreáticasse encuentran: lalipasaes una enzima que se usa en el
organismo para disgregar las grasas de los alimentos de manera que se puedan absorber. Su
función principal es catalizar la hidrólisis de triacilglicerol a glicerol y ácidos grasos libres. Las
lipasas se encuentran en gran variedad de seres vivos.
Esta enzima en humanos se encuentra en la leche materna y, es idéntica a la enzima colesterol
esterasa(olipasapancreática no específica), por lo que se supone que el origen es pancreático y
llegaa lasglándulasmamariasatravésde lacirculaciónsanguínea.La funciónprincipal de lalipasa
es la digestión de grasas.
La amilasa,denominadatambién sacarasaoptialina, es un enzima hidrolasa que tiene la función
de catalizar la reacción de hidrólisis de los enlaces 1-4 del componente α-amilasa al digerir
el glucógeno y el almidón para formar azúcares simples, se produce principalmente en
las glándulas salivales (sobre todo en las glándulas parótidas) y en el páncreas. Tiene actividad
enzimática a un pH de 7. Cuando una de estas glándulas se inflama, como en la pancreatitis,
aumenta la producción de amilasa y aparece elevado su nivel en sangre (amilasemia).

2. METODOLOGÍA
DETERMINACION DE AMILASA POR REACCIONES ACOPLADAS
Se mide la actividad de la amilasa con un método cinético enzimático. En la reacción, la amilasa
catalizala hidrólisisdel sustratodefinido(maltotetraosa) amaltosa. La velocidad de formación de
maltosa se mide mediante el uso de tres reacciones relacionadas que catalizadas por la maltosa
fosforilasa (MP), la β-fosfoglucomutasa (PGM), y la glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6PDH),
dan comoresultadolaproducciónde β-dinucleótido de nicotinamida adenina reducido (NADH) a
partir de β-dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD).
La cantidadde CNPformadopuede serdetectadoespectrofotométricamente a 405 nm dando una
medida directa de la actividad de la α-amilasa de la muestra. La reacción no está inhibida por
factores endógenos.
Medir el incremento de la absortividad por minuto durante 1, 2 y 3 minutos ∆A/min. Mezclar y
leer.
DETERMINACION DE LIPASA POR REACCIONES ACOPLADAS
La lipasapancreáticaenpresenciade colipasa,desoxicolato, además de iones calcio, hidroliza el
sustrato1-2-O-dilauryl-rac-glycerol-3-glutáricoacido-(6'-metilresorufina)-ester,segúnlasecuencia
de las siguientesreacciones:1-2-O-dilauryl-rac-glycero-3-glutáricoácido-(6'-metilresorufina)-ester
>1-2-O-dilauril-rac-glycerol +glutáricoacido-6'-metilresorufina ester (no estable) > ácido glutárico
+ Metilresorufina.
R.1 y R.2, ambos reactivos están listos para su uso. Agitar suavemente el R.2 antes de su uso.
Estándar: reconstituir el vial con 1 mL de agua bidestilada. Mezclar y leer.
RESULTADOS
AMILASA
LECTURAS ABSORBANCIAS
1era
lectura a los 30 segundos 0,768
2da
lectura al 1 minuto 1,061
3era
lectura a los 2 minutos 1,306
4ta
lectura a los 3 minutos 1,534
CALCULOS
Diferenciade absorbancias
1,061 - 0,768 = 0, 293
1,306 - 1,061= 0,243
Promedio absorbancias
0,2546

3. 1,306 – 1,534 = 0,228
VALOR DE AMILASA = 0,246 * 3954 = 1006,68 U/L
LIPASA
BLANCO
LECTURAS ABSORBANCIAS
1era
lectura 0,289
2da
lectura 0,295
3era
lectura 0.303
PATRON
LECTURAS ABSORBANCIAS
1era
lectura 0,373
2da
lectura 0,404
3era
lectura 0,444
MUESTRA
LECTURAS ABSORBANCIAS
1era
lectura 0,805
2da
lectura 1,133
3era
lectura 1,451
CALCULOS
𝑀𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎− 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜
𝑃𝑎𝑡𝑟𝑜𝑛 − 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜
𝑥 58
0,323 − 0,007
0,0355 − 0,007
𝑥 58
11,09 𝑥 58 = 𝟔𝟒𝟑,𝟐𝟐 𝑼/𝑳
DISCUSION:
De acuerdocon RuizReyesyRuizArguelleslosvalores normales de amilasa van hasta 90 U/L y los
de lipasavan de 10 – 28 U/L. Los valoresobtenidosennuestrapractica fueronamilasaigual 1006,
68 U/L, y de lipasa fue de 643 U/L. Estos valores nos indica que el paciente padece de una
pancreatitisaguda lo cual debe ser correlacionado con la clínica para confirmar el diagnóstico. La
determinaciónsimultáneade estasdospruebastienenunaespecificidaddiagnosticadel 97% para
pancreatitis (Ruiz Reyes y Ruiz Arguelles, 2010).
PROMEDIO BLANCO
0,007
PROMEDIO PATRON
0,0355
PROMEDIO MUESTRA
0,323

4. CONCLUSIÓN:
Se concluye que los valores obtenidos en este procedimiento (amilasa=1006,68 U/L; lipasa=643
U/L) son mayores a los valores normales en una persona sana, lo que nos demuestra que este
paciente podría padecer un bloqueo del intestino, una pancreatitis u otras enfermedades
relacionadas.Ademásestapruebatiene untiempode lectura por lo que se recomendaría realizar
de acuerdo al procedimiento, ya que si se pasa en el tiempo puede dar lecturas equivocas y dar
falsos positivos.
BIBLIOGRAFIA:
1. SALUD. Las enzimasdigestivasypancréatica.Datosconsultados:05/07/2014.
http://www.saberalternativo.es/spa/salud.asp?var1=&var2=Las%20enzimas%20digestivas
%20y%20pancre%E1ticas&nar1=1&nar2=788
2. Medline Plus.Informaciónsobre susalud.Exámende Lipasa.Datosconsultados:
05/07/2014. http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003465.htm
3. Medline Plus.Informaciónsobre susalud.Exámende Amilasa.Datosconsultados:
05/07/2014. http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003464.htm
4. Ruiz Reyes, G., Ruiz Arguelles, A., (2010).determinaciones enzimáticas de utilidad
diagnóstica. Fundamentos de interpretación clínica de los exámenes de laboratorio. 2da
Edición. México. Editorial Panamericana.