The document identifies the potassium channel KIR4.1 as the target of autoantibody responses in multiple sclerosis. Through techniques like immunoprecipitation, Western blot, ELISA and immunofluorescence assays on brain lysates and mouse models, the study found that patients with multiple sclerosis have antibodies against the KIR4.1 potassium channel located in glial cells, identifying it as an immune target in the disease.

1. Potassium Chanel KIR4.1 as an Immune Target
in Multiple Sclerosis
Rajneesh Srivastava, Muhammad Aslam, Sudhakar Reddy Kalluri, Lucas
Schirmer, Dorothea Buck, Bernhard Hemmer, et al
Yerlin Andrés Colina Vargas
David Cano Quintero
Medical students UPB
Third semester
Molecular Biology
Teacher: Lina Maria Martinez

2. Introduction
MULTIPLE SCLEROSIS
•Chronic inflammatory demyelinating disease of CNS
•Disease of unknown cause / Autoimmune pathogenesis
•Complex interplay between genetic and environmental
factors
•Autoreactive T cells key
Treatment
 Plasma exchange
 Depletion of B cells

3. Introduction
POTASSIUM CHANNEL
•Transmembrane protein, tetramer
•Allow passage of potassium into and out of the cell
•Membrane potential repolarization
•Resting potential
•Are found in all body cells

4. Introduction
KIR4.1
Type of potassium channel located in glial cells

5. Introduction
Relation
•Patients with multiple sclerosis have antibodies anti KIR4.1
channels
Antibodies Anti
KIR4.1 potassium channel in glial cells
Patients with MS

6. Main Objective
Identify the target of the autoantibody
response in Multiple Sclerosis

7. Metodología
Cohorte
EM Mc Donald 2005
 1 recaída EM
 2 o mas lesiones (MRI)
 Bandas oligoclonales
Grupos control
– Sanos
– Otras enfermedades neurológicas
Ratones
– Corroborar / comparar pruebas
– Efecto del anticuerpo “in vivo”

8. Metodología
INMUNOPRECIPITACIÓN
Antígeno proteico precipitado de una solución usando un anticuerpo
que se une específicamente a esa proteína.

9. Metodología
ELECTROFORESIS
Separación de moléculas según la movilidad de estas en un campo
eléctrico.

10. Metodología
WESTERN BLOT
Técnica analítica usada para detectar proteínas específicas en una
muestra determinada.

11. Metodología
ELISA
(Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay)
Ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas.
Técnica de inmunoensayo en la cual un Ag inmovilizado se detecta
mediante un Ac enlazado a una enzima capaz de generar un producto
detectable como cambio de color.

12. Resultados
• A. Lisado de cerebro humano SDS-PAGE
precipitado IgG de 12 EM–12 OND
• MALDI-TOF para detección Cadena Pesada
KIR4.1
•B. Western blot + 2 Inmunoprecipitaciones
KIR4.1
•C. Western blot IP in Vitro
KIR4.1 como blanco de la IgG en EM

13. Resultados
•B. Inmunofluorescencia
(Izq.)Salvaje -Sup( 100μm)
(Der) Purificado-Inf(50μm)
× SNC si KIR4.1 + AntiC -
• Kir4.1 se expresa en
grandes cantidades en el
cerebro del ratón 10 días
después del nacimiento
•Anti-Kir4.1 +/+ tiñen cell
gliares de salvajes pero no
•A. 2ble Inmunofluorescencia. Anti-KIR4.1+ IgG EM y OND control de los knock-out
(200μm)
No se observo en OND

14. Resultados
Inmunohistoquímica análisis
•Proteína gliar fibrilar ácida(GFAP)
• Buffer de fosfato salino (PBS)
•AntiKIR4.1 – Proteína y no
compite con KIR4.1_IgG
•AntiKIR4.1 = No C9neo
•KIR4.1 se expresa en Astrocitos y
Oligodendrocitos

15. Discussion

16. Discussion

17. Discussion

18. Discussion

19. Conclusions

20. Maps
David Cano Quintero

21. Maps
Yerlin Andrés Colina Vargas