En este trabajo se evalua la participación de Toxoplasma gondii en los casos de abortos y muerte perinatal de diferentes especies productivas, a través de un análisis retrospectivo de las muestras llegadas a nuestro laboratorio durante el período 2000 – 2005
y hacemos una llamada de atención de la problemática y la necesidad del diagnóstico y la prevención de la Toxoplasmosis congénita en el sector veterinario.
Toxoplasmosis gestacional y congénita en los animales de producción. Una mirada al diagnóstico
1. Toxoplasmosis gestacional y congénita en los animales de
producción. Una mirada al diagnóstico.
*Aleida Villa Espinosa
Elena Gracia Curras
Bernardino Moreno Burgos
Publisher in: Albéitar Nº 97, 2006, Pag. 32-36
EXOPOL. Autovacunas y Diagnóstico. Pol.
Río Gállego, 50840 San Mateo de
Gállego, Zaragoza.
2. Introducción
Toxoplasma gondii: es el agente
etiológico de la Toxoplasmosis, una
zoonosis parasitaria mundialmente
extendida que afecta al hombre y a más
de 80 especies animales domésticos y
silvestres, incluidas las aves.
Formas clínicas
de Toxoplasmosis
Toxoplasmosis aguda-adquirida
Toxoplasmosis aguda-adquirida-
reactivada en los animales
inmunocomprometidos.
Toxoplasmosis congénita y ocular
Toxoplasmosis crónica latente
En este trabajo hemos querido poner
énfasis en el diagnóstico de la forma
congénita de Toxoplasmosis, porque
representa una de las principales
causas de aborto y mortalidad
perinatal en la ganadería.
3. Toxoplasmosis congénita
La Toxoplasmosis
congénita se transmite
por vía transplacentaria
cuando la madre sufre
durante la gestación una
infección activa con
diseminación
hematógena del parásito
como consecuencia de
primo-infección o la
reactivación de una
Toxoplasmosis latente.
reactivación
Infección activa
ovinos, bovinos,
porcino, humanos.
Primo infección
durante la gestación
caprinos y conejos
También en gestaciones
repetidas
4. En España existen pocos datos sobre la incidencia de Toxoplasmosis
congénita, en los animales de producción.
La mayoría de los estudios realizados han sido de prevalencias.
El diagnóstico laboratorial se solicita cuando se ha producido el
aborto.
Para diagnosticar la Toxoplasmosis congénita hay que definir el curso
clínico de la infección, valorar la seroconversión durante la gestación o
demostrar la infección activa en la madre o el feto.
5. Objetivos
Evaluar la participación de Toxoplasma gondii en los casos de
abortos y muerte perinatal de diferentes especies
productivas, a través de un análisis retrospectivo de las
muestras llegadas a nuestro laboratorio durante el período
2000 – 2005.
Hacer una llamada de atención de la problemática y la
necesidad del diagnóstico y la prevención de la Toxoplasmosis
congénita en el sector veterinario.
6. Material y Métodos
Tipo de muestras Ovinos Caprinos Bovinos Porcinos Conejos Totales
Sueros de madres con aborto
reciente
356 137 133 27 0 653
Fluidos corporales o sangre de
fetos inmunocompetentes
20 14 12 3 0 46
Fetos y mortinatos (encéfalo y
corazón)
1926 441 58 41 0 2466
Úteros post aborto 0 0 0 0 138 138
Durante el período 2000 - 2005, se recibieron en nuestro laboratorio muestras
provenientes de diversas regiones de España para el diagnóstico de
Toxoplasmosis. Los datos anamnésicos del 97,45% de ellas, estaban referidos
a la clínica de abortos en diferentes especies.
Muestras
7. Serología
Aglutinación directa (AD).
IgG
Titulación de IgG a 10 diluciones en sueros
tratados con 2 Mercapto-Etanol (2ME) y el
antígeno Toxo AD y controles de bioMérieux.
Los sueros fueron considerados positivos a T.
gondii cuando el título de IgG era ≥ 10 UI/ml.
IgM
La detección de IgM con esta técnica, se
consideró positiva cuando la diferencia de los
títulos entre los sueros tratados y no tratados
con 2ME era al menos de 3 (log2).
ELISA.
Empleamos un kit del Instituto Pourquier,
recomendado para la interpretación
cuantitativa de IgG anti T. gondii en sueros de
rumiantes.
Especies Sueros
maternos
IgG + IgM
Sueros
maternos
ELISA
Fluidos
fetales
IgG + IgM
Ovinos 258 98 20
Caprinos 103 34 14
Bovinos 101 32 12
Porcinos 27 NR 3
8. Toxoplasma gondii. Detección de antígeno
Inmunocitoquímica. Inmunoperóxidasa.
• Para la disgregación celular de los órganos
seleccionados se utilizó el sistema
Medimachin - Medicom de 50µm (Becton
Dickinson)
• El reconocimiento específico del parásito se
realizó con el anticuerpo monoclonal (mAb)
anti T. gondii clone GII-9 (Novocastra)
purificado, que reconoce el antígeno
inmunodominante 30 KD de la membrana de
los taquizoítos. El revelado de la reacción
antígeno anticuerpo se hizo con el sistema
ultra sensible multilink de BioGenex).
9. Resultados serológicos de madres que abortaron
0
50
100
150
200
250
Nºdemuestras
Evaluación de IgM anti T. gondii en madres con abortos
recientes.
Negativos 207 85 101
Positivos 51 18 0
Ovinos Caprinos Bovinos
0
10
20
30
40
50
60
70
Nºdemuestras
ELISA. Evaluación de IgG anti T. gondii
en animales abortados.
Negativos 64 25 30
Dudosos 2 0 0
Positivos 28 3 2
Infestación activa 4 6 0
Ovinos Caprinos Bovinos
IgG Aglutinación directa
IgM aglutinación directa ELISA
Frecuencia relativa de los títulos de anticuerpos IgG mediante AD.
-20
0
20
40
60
80
<10 10 20 40 80 160 320 640 1280 2560
UI/ml
Nºdemuestras
Ovinos
Caprinos
Bovinos
Porcinos
10. Status serológico frente a T. gondii
de las hembras que abortaron.
Muestreo serológico sesgado,
quinquenio 2000 – 2005.
Especies Negativo
s
Inmunes Infección
activa
Ovinos 34,8% 33,77% 30,8%
Caprinos 52,55% 25,54% 21,89%
Bovinos 51,8% 44,3% 3,75%
Porcinos 88,8% 11,11% 0%
Total 44,87% 32,29% 22,20%
Negativos:
no reactores
AD: títulos < 10 UI/ml
IgM negativa
ELISA valores E/P <50%
Inmunes:
reactores positivos
a IgG con títulos
medios- bajos
AD: títulos ≥ 10 ≤ 640 UI/ml
ELISA 50 ≥ E/P< 200%
No reactores a IgM
Infección activa:
IgM positiva o IgG con
títulos en AD ≥1280 UI/ml
O ELISA valores E/P ≥ 200%
La seronegatividad de
las madres
permitió descartar
definitivamente
la Toxoplasmosis como
causa del aborto
Los animales
inmunes tenían baja
probabilidad de
sufrir
Toxoplasmosis
congénita
Cuando ocurrió el
aborto, ya la
madre había
seroconvertido. Lo
que le dio valor
predictivo de
Toxoplasmosis
congénita.
11. Resultados. Toxoplasmosis gestacional.
Estudio retrospectivo, quinquenio 2000 – 2005.
Resultados serológicos anti T. gondii en hembras con
infección activa y abortos recientes.
Especies AD
IgM Positiva
AD Título
IgG ≥ 1280 UI/ml
ELISA
E/P≥200%
Total de madres infectadas
durante la gestación
Ovinos 19,76% (51/258) 21,3% (55/258) 4% (4/98) 30,8% (110/356)
Caprinos 17,4% (18/103) 14,5% (15/103) 17,6% (6/34) 28,46% (39/137)
Bovinos 0% (0/101) 4,95% (5/101) 0% (0/32) 3,75% (5/133)
Porcinos NR 0% (0/27) NR 0% (0/27)
12. Resultados
Infección activa de T. gondii en fetos abortados.
0
500
1000
1500
2000
Nºdemuestras
Presencia de antígeno P30 de T. gondii en fetos y mortinatos.
Negativos 1828 418 58 40 135
Positivos 98 23 0 1 3
Ovinos Caprinos Bovinos Porcinos Conejos
Porcentaje de
positivos:
ovinos 5%;
caprinos 5,2%;
porcinos 2,4%;
conejos 2,17%;
bovinos 0%;
La IgM fue
detectada en
más del 50% de
los sueros
fetales ovinos y
caprinos
investigados,
pero no fue
encontrada en la
especie bovina.
0
5
10
15
20
Nºdemuestras
Evaluación de IgM anti T. gondii en fetos y mortinatos.
Positivos 15 10 0
Total 20 14 12
Ovinos Caprinos Bovinos
13. Resultados. Toxoplasmosis congénita.
Estudio retrospectivo, quinquenio 2000 – 2005.
5,6% (150/ 2650)4,8% (125/ 2604)
Total
2,17% (3/ 138)2,17% (3/ 138)
NRConejos
2,43% (1/ 41)2,43% (1/ 41)
NRPorcinos
0% (0/ 70)0% (0/ 58)0% (0/ 12)
Bovinos
7,25% (33/ 455)
5,21% (23 / 441)
71,42% (10/ 14)Caprinos
5,8% (113/ 1946)5% (98/ 1926)75% (15/ 20)
Ovinos
Toxoplasmosis
congénita.
Total de
Positivos
Detección
de P30
T. gondii
Reactores
IgM
Especies
T. gondii. Infección de fetos y mortinatos.
5,6% (150/ 2650)4,8% (125/ 2604)
Total
2,17% (3/ 138)2,17% (3/ 138)
NRConejos
2,43% (1/ 41)2,43% (1/ 41)
NRPorcinos
0% (0/ 70)0% (0/ 58)0% (0/ 12)
Bovinos
7,25% (33/ 455)
5,21% (23 / 441)
71,42% (10/ 14)Caprinos
5,8% (113/ 1946)5% (98/ 1926)75% (15/ 20)
Ovinos
Toxoplasmosis
congénita.
Total de
Positivos
Detección
de P30
T. gondii
Reactores
IgM
Especies
T. gondii. Infección de fetos y mortinatos.
14. Discusión
Los animales seronegativos.
Vigilancia epidemiológica. En
nuestros resultados 44,87% de los
investigados
Animales inmunes: Mantienen
infecciones latentes, raramente
sufren Toxoplasmosis congénita,
pero sus carnes son fuentes de
infección para el hombre y otros
animales. En nuestros resultados
32, 29% de los investigados.
Infección activa. Toxoplasmosis
congénita, pérdidas económicas y
nuevas fuentes de infección. Si los
animales son medicados cuando
seroconvierten durante la
gestación, posiblemente no
abortan.
En nuestros resultados
Toxoplasmosis gestacional: 22,20%
Toxoplasmosis congénita 4,90%
15. Recomendaciones
ELISA multiparámetricos para IgG, IgM, IgA, IgE.
ELISA de avidez de IgG o IgM.
Standard internacionales para una correcta interpretación diagnóstica.
Antígenos para aglutinación directa.
Poner en el mercado medios diagnóstico para esta entidad que permitan
abarcar al mayor número de especies de animales de producción, así como
evaluar el curso clínico de la infección.
Notas del editor
Para la madre, la enfermedad suele ser leve y puede no ser evidente. La infestación del feto puede ocasionar problemas severos. .Cuando los quistes estallan las infecciones latentes son reactivadas con síntomas de septicemias generalizada, la sangre transporta en forma continua y en cantidades elevadas una toxina teratogénica Para la madre la infestación puede no ser evidente, pero para el feto puede tener fatales consecuencias
El mayor número de reactores a la IgM, fue encontrado en los ovinos y caprinos. No encontramos reactores positivos con infección activa en la especie bovina
Las granjas con problemas de aborto por T. gondii muestran altas prevalencias, lo que es indicativo de alta exposición a los ooquistes del parásito. Los datos de la seroprevalencia no discrimina si la infección es aguda o crónica. El diagnóstico de la Toxoplasmosis congénita es difícil en ausencia del screnning pre natal. Los animales que viven en áreas endémicas se infectan por general antes de la primera gestación y entonces están inmune en el momento de la concepción. En estos rebaños los títulos de anticuerpos IgG no muestran diferencias significativas en la distribución. Nuestros resultados: Nivel heterogéneo de títulos entre las madres abortadas de diferentes procedencias: Las especies ovina y caprina (30,8% – 28,46% respectivamente) fueron las más comprometidas, lo que significa que son focos de alta incidencia de abortos y mortalidad perinatal por T. gondii . En la especie bovina encontramos el 3,75% con títulos muy altos de IgG, Las granjas con problemas de aborto por T. gondii muestran altas prevalencias, lo que es indicativo de alta exposición a los ooquistes del parásito. Los datos de la seroprevalencia no discrimina si la infección es aguda o crónica. El diagnóstico de la Toxoplasmosis congénita es difícil en ausencia del screnning pre natal. Los animales que viven en áreas endémicas se infectan por general antes de la primera gestación y entonces están inmune en el momento de la concepción. En estos rebaños los títulos de anticuerpos IgG no muestran diferencias significativas en la distribución. Nuestros resultados: Nivel heterogéneo de títulos entre las madres abortadas de diferentes procedencias: Las especies ovina y caprina (30,8% – 28,46% respectivamente) fueron las más comprometidas, lo que significa que son focos de alta incidencia de abortos y mortalidad perinatal por T. gondii . En la especie bovina encontramos el 3,75% con títulos muy altos de IgG,