1. Aislamiento Aspergillus niger
Producción de Ácido Cítrico

2. Aspergillus Niger
Es un hongo que produce un moho negro en
vegetales -muy común en la lechuga, el tomate o la
acelga-. Es una de las especies más corrientes del
género Aspergillus.
El Aspergillus es filamentoso (compuesto de cadenas
de células, llamadas hifas, el tipo de hongos opuesto
a las levaduras, que se componen de una sola célula
redonda).

3. Ácido Cítrico
 Es un intermediario en el ciclo de los ácidos
tricarboxilicos (Ciclo de Krebs).
 Las variedades Aspergillus niger han dominado la
producción industrial de este, principalmente porque
su fisiología es mejor conocida y utiliza materias
primas de bajo costo.
 La producción de ácido cítrico requiere de una
operación defectuosa del CAT que permite su
acumulación.

4. Aplicaciones en la producción de:
 Bebidas: Saborizante y regulador del pH; incrementa la
efectividad de los conservantes antimicrobianos.
 Dulces y Conservas: Acidulante y regulador del pH para
lograr una óptima gelificación.
 Caramelos: Acidulante y regulador del pH con el objetivo
de alcanzar la máxima dureza de los geles.
 Verduras procesadas: En combinación con ácido
ascórbico, previene la oxidación.
 Alimentos congelados: Ayuda a la acción de los
antioxidantes; inactiva enzimas previniendo efectos
indeseables; inhibe el deterioro del sabor y color.
 Frutas y hortalizas enlatadas: Disminuye el pH; al actuar
como quelante: previene la oxidación enzimática y la
degradación del color, resalta el sabor.

5. Producción Industria
Para la elaboración del acido cítrico es necesario
tener ciertas condiciones
Este es el principal proceso utilizado es el Proceso
Sumergido, en el que se inocula el medio seguido
por la agitación y aeración vigorosa y controladas
en grandes fermentaciones.
El periodo de fermentación de(3-5 días) a 25-30 ºC.

6. Extracción del Ácido Cítrico
1. El licor crudo es filtrado para eliminar el micelio,
células y otras impurezas.
2. El acido oxalico se precipita al calentar a 80 – 90ºC
en presencia de pequeñas cantidades de cal.
3. El ácido cítrico precipita como citrato de calcio
usando 1 parte de cal hidratada por cada 2 partes
de licor añadido durante un periodo de 1 hora con
un aumento gradual de temperatura hasta 95 ºC.
4. El citrato de calcio precipitado se filtra, se lava con
agua y se acidifica con H2SO4;
5. Se filtra para eliminar el CaSO4.

7. Toma de
muestra a
partir de un
limón con
presencia
de espora
Siembra en Agar
Papa Dextrosa

8. A partir de la primera colonia de sospecha
se
realizaron resiembras en agar PDA y
Czapek. Estos pases se realizaron por
estría simple una vez obtenido crecimiento
con la morfología esperada se realizo
procedió con realizar tinción con azul de
algodón para observar la morfología
microscópica.

9. Conservación del Cultivo
Criopreservación (Glicerol al 10%)
Siembra en un tubo de ensaye con agar nutritivo
previamente inoculado, se vierte una capa de
disolución de agua con glicerina al 15%
Permite la conservación a temperaturas de 4-9ºC
Preservación de esporas en agua destilada
estéril

10. Obtención de Ácido Cítrico
Preparación de Caldo
Nutritvo con sacarosa
al 10% y Esterilizar
Inoculación
del Caldo con
micelio del
cultivo en
placa
Someter a
agitación
vigorosa

11. Lavado y
Filtración
Agregar Hidróxido de
Calcio (Ca (OH)2)
calentando en un baño
termostático entre 80 y
90° C
Retirar el
precipitado
Durante una hora
añadir Ca(OH)2 a
una temperatura
superior a los 90° C
hasta lograr una
solución neutra
•Filtrar, lavar con agua y acidificar con H2SO4 en la misma
cantidad que Ca(OH)2 utilizado anteriormente. Con este
procedimiento se forma un precipitado de CaSO4, el cual debe
ser retirado por filtración. El líquido que se obtiene es el ácido
cítrico
Extraer el
precipitado
que
corresponde
en este caso
al citrato de
calcio

12.  Pruebas Bioquímicas: no aplica
 Pruebas serológicas: No aplica
 TECNICAS ANALITICAS: Concentración de ácido
cítrico por titulación con hidróxido se sodio
 Normatividad: No especificada

13. Bibliografía
 Ministerio De Salud Instituto Nacional De
Salud(Lima).2007. Manual De Procedimientos Y
Técnicas De Laboratorio Para LaIdentificación De Los
PrincipalesHongos Oportunistas Causantes De
Micosis Humana
 Arias,A.L; Piñeros,P.A.2008. Manual De
Procedimientos Y Técnicas De Laboratorio Para La
Identificación De Los Principales Hongos
Oportunistas Causantes De Micosis Humana. Pontifica
Universidad Javeriana
 Alrcon, D.I. Manual De Procedimientos Y Técnicas
De Laboratorio Para La Identificación De Los
Principales Hongos Oportunistas Causantes De
Micosis Humana