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Trehalosa
La trehalosa
(a-D-glucopiranosil-(1,1)-a-D-glucopiranósido)
Es un disacárido no reductor formado por dos
moléculas de glucosa, se encuentra presente
en una amplia gama de organismos llevando
a cabo funciones como azúcar de reserva y
como protector ante el estrés abiótico. Pose
amplias aplicaciones biotecnológicas ya que
protege proteínas y membranas biológicas,
lo cual permite que pueda ser usada como
preservador de alimentos, enzimas, vacunas,
células, tejidos y órganos, y como sustituto
de sacarosa en dulcería y panadería.(1)
La trehalosa
 Descrita primero por Wiggers desde 1832
como un azúcar desconocido presente en
el cornezuelo del centeno (hongo
patógeno).
 Después encontrado en los capullos del
escarabajo Larinus Maculata, nombre
común “trehala” Berthelot designa al
disacárido como trehalosa.
 La (a-D-glucopiranosil-(1,1)-a-D-glucopiranósido)
es un disacárido no reductor formado por dos
moléculas de glucosa. El enlace a,a-1,1 conecta
los dos extremos reductores de los residuos de
glucosa (Paiva y Panek 1996) anulando su poder
reductor.
Molécula de trehalosa
Biosíntesis y presencia en los seres
vivos.
 A la fecha se conocen cinco diferentes vías de síntesis de
trehalosa, distribuidas en todos los reinos vivos conocidos.
 Se encuentra en bacterias y hongos y en cantidades
considerables en criptobiontes.
 Identificada en casi todos los insectos sobretodo en la
hemolinfa.
 Se tiene evidencia de su presencia en plantas angiospermas
como tabaco y arroz lo cual hace suponer que se encuentra
en todas las plantas superiores.
Vías de síntesis de trehalosa
Amplia distribución de síntesis en la
naturaleza
 Gracias a la disponibilidad de secuencias de ADN
y proteínas depositadas en el GenBank se han
identificado genes de síntesis de trehalosa en
diferentes especies de bacterias, arquibacterias,
hogos, insectos y plantas.
 La amplia distribución de vías de biosíntesis y
degradación de trehalosa en los tres
superdominios (Bacteria, Arquea y Eucaria)
sugiere que ha sido utilizada por la naturaleza de
manera muy versátil.
Síntesis vía TPS/TPP
 En la naturaleza, la ruta de síntesis aparentemente
preferida, dado que se encuentra ampliamente
distribuida, es aquella que involucra dos
reacciones químicas catalizadas por las enzimas
TPS (Trehalosa 6-Fosfato Sinasa) y TPP
(Trehalosa 6-Fosfato Fosfatasa).
 Elucidada por Leloir en la levadura Sacharomyces
Serevisiae, la cual utiliza estas dos enzimas y los
sustratos son la glucosa-6-fosfato y la UDP-
glucosa.(Cabib y Leloir 1958)
Biosíntesis en bacterias
 La ruta TPS/TPP se encuentra también en bacterias donde
se le conoce como la via OtsA/OtsB. Tambien se hallan en
insectos nematodos y plantas.
 También encontramos la via llamada TreY/TreZ o (MTS/MTH)
que utiliza maltodextrinas como sustrato modificándose un
enlace terminal a(1,4) en el extremo no reductos a un enlace
a (1,1) a través de una transglicosidacion originando una
unidad trehalosil terminal.
 La otra vía encontrada comúnmente en plantas es la TreS o
GT donde el sustrato es el azúcar maltosa donde el enlace a-
(1,4) es modificado a a (1,1)
Vía TreY/TreZ o (MTS/MTH)
Vía TreS o GT(glucosil
transferasa)
Propiedades fisicoquímicas de la
trehalosa
 Se ha demostrado que es capaz de proteger la
estructura y función de las enzimas y la integridad
de las membranas biológicas bajo condiciones de
estrés abiótico extremo.
 En la protección de las proteínas la trehalosa
forma una capsula alrededor de la proteína
protegiendo su estructura terciaria(Lins et al. ,
2004).
Propiedades fisicoquímicas de la
trehalosa
 El hecho de ser un azúcar no reductor previene la
reacción de Maillar en la cual los grupos aldehído
de los azucares reducen a los grupos amino de los
residuos de la proteínas produciendo el típico color
café de la degradación de estas.
 La capacidad de la trehalosa para proteger las
membranas durante la deshidratación es producto
de su interacción con estas para mantener el
estado fluido y prevenir contra la fusión la
separación de fases y el rompimiento de las
membranas.(Crowe et al., 1984)
Protección de membrana
Usos biotecnológicos de la trehalosa
Las propiedades de la trehalosa la han vuelto un apreciado
producto biotecnológico con diversas aplicaciones.
A nivel comercial dos procesos se han desarrollado para la
síntesis del disacárido:
 La compañía japonesa Hayashibara ha desarrollado un
proceso de producción enzimática basado en el uso de almidón
como sustrato emplendo las enzimas malto-oligosil trehalosa
sintasa (MTS) y la malto-oligosil trehalosa hidrolasa (MTH),
provenientes de la Arthobacter ramosus
 Este método bajo de $700/kg a $5/kg con un 98% de pureza y
apto para el consumo humano y otros usos industriales (Shiraldi
et al., 2002).
Usos más comunes y prometedores de la
trehalosa
 Protector de la actividad enzimática.
 Estabilizador y protector de moléculas
complejas
 Aditivos de diversos alimentos
 Sustituto de azúcar
 Preservador de células tejidos y órganos
 Osmoprotector de plantas ornamentales
 Uso en la industria de cosméticos
 Usos médicos y nutriceuticos
Trehalosa (Hayashibara)
Productos alimenticios y cosmética
 Protector natural de la Hayashibara - Para el
cuidado de la piel y del cabello
 Para La Supresión De Los Olores
 Sustituto o complemento de sacarosa en
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Procesos en reactor batch
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Estos se realizan con enzimas en solución.
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maíz pretratado.
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MTS/MTH aisladas de la Brevibacterium
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desramificacion del almidón.
GT y a-amilasa de Sulfolobus
solfataricus KM1
 En este proceso son usadas la Glucosil
transferasa (GT) y la a-amilasa aisladas de
Sulfolobus solfataricus KM1.
 Se usa como sustrato una variedad de
maltooligosacaridos de grados de
polimerizacion de 3-7
 Los rendimientos alcanzados son de 36 a
60% de trehalosa.
 Los rendimientos fueron mejorados al
incorporar una amilasa con un grado de
polimerización alto(17). Alcanzando 80% de
trehalosa.
Bioprocesos por
inmovilización
 La trehalosa fosforilaza obtenida de Schizophyllum
commune BT2115 y la almidon fosforilaza obtenida
de Corynebacterium callunae DSM 20147 fueron
purificadas.
 Las enzimas se inmovilizaron por adsorción en un
empaque y este fue colocado en un reactor .
 En este proceso la materia prima es el almidón.
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Trehalosa sintasa de la basidiomycete
Grifola frondosa
 Este proceso utiliza la Trehalosa
sintasa de la basidiomycete Grifola
frondosa la cual es capas de formar
trehalosa tomando como sustrato la α-
D-glucosa 1-fosfatphate and D-
glucosa.
 En combinación se usa la sacarosa
fosforilasa
 La producción mediante este método
fue reportado en 18 mmMol /h para un
rendimiento final de 90%.
Referencias
 J. O. Mascorro-Gallardo/ N Avonce/ G Iturriaga.
Biotecnología de la trehalosa en las plantas. Revista
Chapingo. Serie horticultura. Año/vol. 11 numero 002
Universidad Autónoma Chapingo.
 Lins R. D. PEREIRA C. S. HUNENBERGER, P. H. 2004
Trehalose-protein interaccion in aqueus solution. Proteins 55;
177-186.
 CROWE, J.; L. CHAMPMAN, D. 1984. preservation of
membranes in enhtdrobiotic organism. The role of the
trehlose <Science 223: 209-217.
 Chiraldi C. I. Lernia y M. de la Rosa 2002. Trehalosa
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La trehalosa

  • 2. La trehalosa (a-D-glucopiranosil-(1,1)-a-D-glucopiranósido) Es un disacárido no reductor formado por dos moléculas de glucosa, se encuentra presente en una amplia gama de organismos llevando a cabo funciones como azúcar de reserva y como protector ante el estrés abiótico. Pose amplias aplicaciones biotecnológicas ya que protege proteínas y membranas biológicas, lo cual permite que pueda ser usada como preservador de alimentos, enzimas, vacunas, células, tejidos y órganos, y como sustituto de sacarosa en dulcería y panadería.(1)
  • 3. La trehalosa  Descrita primero por Wiggers desde 1832 como un azúcar desconocido presente en el cornezuelo del centeno (hongo patógeno).  Después encontrado en los capullos del escarabajo Larinus Maculata, nombre común “trehala” Berthelot designa al disacárido como trehalosa.
  • 4.  La (a-D-glucopiranosil-(1,1)-a-D-glucopiranósido) es un disacárido no reductor formado por dos moléculas de glucosa. El enlace a,a-1,1 conecta los dos extremos reductores de los residuos de glucosa (Paiva y Panek 1996) anulando su poder reductor.
  • 6. Biosíntesis y presencia en los seres vivos.  A la fecha se conocen cinco diferentes vías de síntesis de trehalosa, distribuidas en todos los reinos vivos conocidos.  Se encuentra en bacterias y hongos y en cantidades considerables en criptobiontes.  Identificada en casi todos los insectos sobretodo en la hemolinfa.  Se tiene evidencia de su presencia en plantas angiospermas como tabaco y arroz lo cual hace suponer que se encuentra en todas las plantas superiores.
  • 7. Vías de síntesis de trehalosa
  • 8. Amplia distribución de síntesis en la naturaleza  Gracias a la disponibilidad de secuencias de ADN y proteínas depositadas en el GenBank se han identificado genes de síntesis de trehalosa en diferentes especies de bacterias, arquibacterias, hogos, insectos y plantas.  La amplia distribución de vías de biosíntesis y degradación de trehalosa en los tres superdominios (Bacteria, Arquea y Eucaria) sugiere que ha sido utilizada por la naturaleza de manera muy versátil.
  • 9. Síntesis vía TPS/TPP  En la naturaleza, la ruta de síntesis aparentemente preferida, dado que se encuentra ampliamente distribuida, es aquella que involucra dos reacciones químicas catalizadas por las enzimas TPS (Trehalosa 6-Fosfato Sinasa) y TPP (Trehalosa 6-Fosfato Fosfatasa).  Elucidada por Leloir en la levadura Sacharomyces Serevisiae, la cual utiliza estas dos enzimas y los sustratos son la glucosa-6-fosfato y la UDP- glucosa.(Cabib y Leloir 1958)
  • 10.
  • 11. Biosíntesis en bacterias  La ruta TPS/TPP se encuentra también en bacterias donde se le conoce como la via OtsA/OtsB. Tambien se hallan en insectos nematodos y plantas.  También encontramos la via llamada TreY/TreZ o (MTS/MTH) que utiliza maltodextrinas como sustrato modificándose un enlace terminal a(1,4) en el extremo no reductos a un enlace a (1,1) a través de una transglicosidacion originando una unidad trehalosil terminal.  La otra vía encontrada comúnmente en plantas es la TreS o GT donde el sustrato es el azúcar maltosa donde el enlace a- (1,4) es modificado a a (1,1)
  • 12. Vía TreY/TreZ o (MTS/MTH)
  • 13. Vía TreS o GT(glucosil transferasa)
  • 14. Propiedades fisicoquímicas de la trehalosa  Se ha demostrado que es capaz de proteger la estructura y función de las enzimas y la integridad de las membranas biológicas bajo condiciones de estrés abiótico extremo.  En la protección de las proteínas la trehalosa forma una capsula alrededor de la proteína protegiendo su estructura terciaria(Lins et al. , 2004).
  • 15. Propiedades fisicoquímicas de la trehalosa  El hecho de ser un azúcar no reductor previene la reacción de Maillar en la cual los grupos aldehído de los azucares reducen a los grupos amino de los residuos de la proteínas produciendo el típico color café de la degradación de estas.  La capacidad de la trehalosa para proteger las membranas durante la deshidratación es producto de su interacción con estas para mantener el estado fluido y prevenir contra la fusión la separación de fases y el rompimiento de las membranas.(Crowe et al., 1984)
  • 17. Usos biotecnológicos de la trehalosa Las propiedades de la trehalosa la han vuelto un apreciado producto biotecnológico con diversas aplicaciones. A nivel comercial dos procesos se han desarrollado para la síntesis del disacárido:  La compañía japonesa Hayashibara ha desarrollado un proceso de producción enzimática basado en el uso de almidón como sustrato emplendo las enzimas malto-oligosil trehalosa sintasa (MTS) y la malto-oligosil trehalosa hidrolasa (MTH), provenientes de la Arthobacter ramosus  Este método bajo de $700/kg a $5/kg con un 98% de pureza y apto para el consumo humano y otros usos industriales (Shiraldi et al., 2002).
  • 18. Usos más comunes y prometedores de la trehalosa  Protector de la actividad enzimática.  Estabilizador y protector de moléculas complejas  Aditivos de diversos alimentos  Sustituto de azúcar  Preservador de células tejidos y órganos  Osmoprotector de plantas ornamentales  Uso en la industria de cosméticos  Usos médicos y nutriceuticos
  • 19. Trehalosa (Hayashibara) Productos alimenticios y cosmética  Protector natural de la Hayashibara - Para el cuidado de la piel y del cabello  Para La Supresión De Los Olores  Sustituto o complemento de sacarosa en panadería, chocolates, productos de frutas, productos congelados, bebidas, bebidas alcohólicas.
  • 20. Procesos en reactor batch (Chiraldi C. 2002) Estos se realizan con enzimas en solución. Las enzimas utilizadas son la MTS y MTH que son aisladas de la Arthrobacter Q36. En este proceso se usa como sustrato almidón de maíz pretratado. La temperatura del proceso se lleva a 40 °C, la solucion resultante contiene 66% de trehalosa (p/p) y una pequeña cantidad de oligosacaridos reducidos.
  • 21. Síntesis a través de MTS y MTH de la Brevibacterium helvolum En este proceso se utilizan las enzimas MTS/MTH aisladas de la Brevibacterium helvolum. En este proceso se lleva a acabo con el acoplamiento de las enzimas de síntesis con un a-amilasa la cual ayuda en la desramificacion del almidón.
  • 22. GT y a-amilasa de Sulfolobus solfataricus KM1  En este proceso son usadas la Glucosil transferasa (GT) y la a-amilasa aisladas de Sulfolobus solfataricus KM1.  Se usa como sustrato una variedad de maltooligosacaridos de grados de polimerizacion de 3-7  Los rendimientos alcanzados son de 36 a 60% de trehalosa.  Los rendimientos fueron mejorados al incorporar una amilasa con un grado de polimerización alto(17). Alcanzando 80% de trehalosa.
  • 23. Bioprocesos por inmovilización  La trehalosa fosforilaza obtenida de Schizophyllum commune BT2115 y la almidon fosforilaza obtenida de Corynebacterium callunae DSM 20147 fueron purificadas.  Las enzimas se inmovilizaron por adsorción en un empaque y este fue colocado en un reactor .  En este proceso la materia prima es el almidón. Los sustratos son los sustratos son maltodextrinas, glucosa y fosfatos.  La produccion fue reportada constante en un valor de 2.6 g/l *h en un procesos continuo de 72 horas.
  • 24. Trehalosa sintasa de la basidiomycete Grifola frondosa  Este proceso utiliza la Trehalosa sintasa de la basidiomycete Grifola frondosa la cual es capas de formar trehalosa tomando como sustrato la α- D-glucosa 1-fosfatphate and D- glucosa.  En combinación se usa la sacarosa fosforilasa  La producción mediante este método fue reportado en 18 mmMol /h para un rendimiento final de 90%.
  • 25.
  • 26. Referencias  J. O. Mascorro-Gallardo/ N Avonce/ G Iturriaga. Biotecnología de la trehalosa en las plantas. Revista Chapingo. Serie horticultura. Año/vol. 11 numero 002 Universidad Autónoma Chapingo.  Lins R. D. PEREIRA C. S. HUNENBERGER, P. H. 2004 Trehalose-protein interaccion in aqueus solution. Proteins 55; 177-186.  CROWE, J.; L. CHAMPMAN, D. 1984. preservation of membranes in enhtdrobiotic organism. The role of the trehlose <Science 223: 209-217.  Chiraldi C. I. Lernia y M. de la Rosa 2002. Trehalosa production: Exploting novel Aproaches. Trens en bytechnology. 20 (10) 420-425.