Genética Forense-ADN

LOGO
Genetica Forense
Mario Ariel Aranda

www.themegallery.com
Contenidos
1 Metodología
2 Filiación
3 Evidencias
4 Otros casos

Forense
• La ciencia forense se basa en la aplicación de
los métodos científicos a los procesos de la
materia que se involucran con un crimen,
aportando datos para resolver casos judiciales.
Existen muchas ramas de la ciencia forense
debido a que las ciencias en general tienen
alguna aplicación en los asuntos públicos y
criminales. Algunas de sus principales áreas
son las siguientes: Química,

Forense
• La Toxicología Forense es una de las
disciplinas científico-técnicas que
constituyen las denominadas Ciencias
Forenses y que sitúa a la Toxicología al
servicio de la justicia. La toxicología
forense requiere resultados analíticos
científicamente indiscutibles y
legalmente defendibles

Estructura del Genoma Humano

• El genoma humano, constituido por
un genoma nuclear (más importante)
y otro genoma mitocondrial.
• El genoma nuclear, dispuesto en forma lineal (genoma humano).
• Constituido por más de 3.000 millones de pares de bases (o
nucleótidos) conteniendo aproximadamente unos 80.000 genes.
• El otro es genoma mitocondrial, ubicado en la matriz mitocondrial.
• La organización de ambos genomas son radicalmente diferentes.
• El genoma mitocondrial está constituido por unos 16.600 pares de bases,
conteniendo 37 genes y con una disposición circular

TIPOS DE ADN
DE COPIA ÚNICA DNA REPETITIVO
75% genoma
Genes de proteínas
Disperso repetitivo Satélite
15% genoma Alfa
SINEs
LINEs
90-500 pb
7000 kb
Minisatélite
Microsatélite
171 pb
20-70 pb
2,3,4 pb

AADDNN ddee ccooppiiaa úúnniiccaa
• Representa entre 50-70% del total de material genético.
• El DNA de copia única, compuesto en pequeña parte
por los genes o secuencias codificantes, y una
mayoría de DNA no codificante.
• Los genes están compuestos por exones e intrones
(zona estructural) y una región reguladora.
• El DNA no codificante incluye los intrones, los cuales
son el DNA que entrecorta los fragmentos codificantes
de los genes (intrones no codifica proteína).

DNA repetitivo oo sseeccuueenncciiaass rreeppeettiiddaass
• El DNA repetitivo son secuencias de DNA que se
repiten muchas veces a lo largo del genoma.
• Representan entre el 20-50% del total de material genético.
• DNA repetitivo es DNA codificante y DNA no codificante.
• El DNA codificante puede estar agrupado en regiones
concretas del DDNNAA ((ccooddiiffiiccaann pprrootteeíínnaass oo RRNNAA)) oo disperso.

AADDNN nnoo ccooddiiffiiccaannttee
• El DNA no codificante también se puede presentar
agrupado o disperso.
• El DNA repetitivo agrupado en tándem es un DNA
que aparece desde varios miles de veces, incluso 2,5
millones de veces (DNA altamente repetitivo).
• Aparecen en regiones heterocromáticas, siempre en
repeticiones y es denominado DNA satélite.

MMiinniissaattéélliitteess
• Compuesta por una unidad básica de secuencia de 6-
25 nucleótidos que se repite en tándem generando
secuencias de entre 100 y 20.000 pares de bases, el
genoma humano contiene aproximadamente unos
30.000 minisatélites.

Microsátelites
•Compuestos por
secuencias básicas de 2-4
nucleótidos, cuya
repetición en tándem
origina secuencias de
menos 150 nucleótidos.
Ej. son dinucleótido CA y
el trinucleótido CAG.
•Los microsatélites son
también polimorfismos
multialélicos, STR
(acrónimo de Short
Tandem Repeats) y
pueden identificarse
mediante PCR..
ADN. Análisis de microsatélites en distintas muestras biológicas de
un mismo animal. Todas las muestras biológicas presentan el mismo
perfil de microsatélites, con lo cual se puede certificar la trazabilidad
del animal en toda la cadena de producción de la carne.

Secuencia de trabajo

Electroforesis capilar

Electroferograma

Diagrama
Obtención de la muestra
Pruebas presuntivas
Lisis celular
Purificación-Concentración
Cuantificacion
EEssqquueemmaa
ddee TTrraabbaajjoo

Diagrama
LLiissiiss
PPuurriiffiiccaacciióónn-- CCoonncceennttrraacciióónn
CCuuaannttiiffiiccaacciioonn
EExxttrraacccciióónn ddee
AADDNN

Diagrama
Amplificación Separación Analisis
AAdddd YYoouurr TTeexxtt AAdddd YYoouurr TTeexxtt AAdddd YYoouurr TTeexxtt

Toma correcta de la muestra
Buenos
resultados
Documentar
Conservar
Recolectar
Embalar

Toma correcta de la muestra
• Acta de conformidad
• Cadena de custodia

Toma de Muestras
Muestras
Análisis de ADN
Filiación
Sangre entera
Hisopado bucal
Evidencias
Uñas
Manchas

Muestras de evidencia

Pruebas presuntivas
• Identificar el tipo de fluido presente en
una evidencia: Sangre, saliva o semen
• Ayuda a una correcta extracción
• Principio: inmunocromatografia

Lisis
Sangre-saliva depositado en hisopo o papel de filtro:
Lisis con TEC-SDS y PK calor ON
Material Cadavérico tejido blando:
Igual al anterior
Material cadaverico Huesos- Dientes:
Desmineralizacion con qeulantes de Ca2+; lisis con TEC-SDS y PK calor
ON
Pelos con o sin Bulbo
TEC-SDS y PK calor ON
Sangre depositada en FTA:
Lavado con reactivo especial + lavado con agua
Secado a T ambiente
ADN queda adherido al papel

Lisis diferencial
Evidencias: mezcla de tipos celulares:
Realizar lisis diferencial para separar dos tipos celulares: células
lábiles de células resistentes
Paso 1: separación de células lábiles, digestión: incubación 4 hs.
Bajo estas condiciones las cabezas de espermatozoides y uñas
son resistentes. Centrifugar a 13000rpm durante 10 min,
Sobrenadante FRACCION A
Paso 2: Precipitado del paso anterior ( espermatozoides-uñas)
Digestión agregando agente reductor DTT que permite
desnaturalizar las protaminas y la queratina. Incubar ON:
FRACCION B

Concentración
Purificación con solventes orgánicos:
• Precipitación con NaCl + etanol
• Precipitación con acetato de amonio
• Centricon/ Amicon

Cuantificación del ADN
concentración Presencia de inhibidores
Cromosoma Y
AND humano o no
Evitar gastos
Hay o no AND?
Cuantificar

Amplificación de STRs

PCR multiplex

Resultado-Perfil genetico

Análisis de casos

Vínculos de paternidad

Padres alegados

Índice de paternidad
LR=
X
Y
X: Probabilidad de que dos individuos
compartan información genética por que están
relacionados genéticamente
Y: Probabilidad de compartir información
genética por Azar (frecuencia poblacional de la
variante alélicas)
IP=
P(A)
f a

Índice de paternidad
Padre Hijo madre
AA AC BC
Padre Hijo madre
AD AC BC
IP=
1
f(A)
IP=
0,5
f(A)
IPt: multiplicar todos los resultados parciales
Ej: IP= 1x106
IP= 136 PP=
IP
IP + 1

Como se calcula??
Padre Hijo madre
30/31 31/32 31/32
IP= 0,5
f (31) + f ( 32)

Resumen
• Calculo del IP total (multiplicar el Ip obtenido
para cada sistema)
• IP 11.353.604 significa de que hay una
probabilidad de que una persona por cada 11
millones comparta todos los marcadores
genéticos sin ser el padre biológico
• Calcular la probabilidad de Paternidad (PP)
PP 99,9999911% que sea el padre biologico

Casos Forenses

Victima- sospechosos y evidencia

Genética forense
LR=
Hipótesis del fiscal
Hipótesis de la defensa
Dado que la hipótesis de la fiscalía es que el
sospechoso dejo la evidencia, entonces =1
La hipótesis alternativa puede ser calculada a partir de
la frecuencia esperada en la población del genotipo
observado en la evidencia

Genética forense
• Índice de Identidad (II)
II= X
Y
II= 1
Y
Y: P2 Para genotipo homocigota
Y: 2pq Para genotipo heterocigota

Conclusiones
• Si el perfil genético del sospechosos no
presenta identidad con la evidencia ,
entonces no ha contribuido a la
evidencia
• Si el perfil genético del sospechosos
presenta identidad con la evidencia,
entonces calcular LR

Genética Forense-ADN

Recomendados

Recomendados

Más contenido relacionado

La actualidad más candente

La actualidad más candente (20)

Destacado

Destacado (20)

Similar a Genética Forense-ADN

Similar a Genética Forense-ADN (20)

Más de Ariel Aranda

Más de Ariel Aranda (20)

Último

Último (20)

Genética Forense-ADN