El documento presenta información sobre diferentes técnicas analíticas utilizadas en el diagnóstico de infecciones, incluyendo métodos directos para detectar el agente causal y métodos indirectos para detectar la respuesta inmune. Define conceptos clave como sensibilidad, especificidad, valor predictivo, estándar de oro y periodo de ventana. Además, describe diversas metodologías inmunológicas como ELISA, IFI, western blot e inmunocromatografía y los principios de su funcionamiento. Finalmente, enfatiza la importancia del control de cal

2. Técnica Analítica
• Conjunto de procedimientos o recursos
que se usan en un arte, en una ciencia o
en una actividad determinada, del cual
resulta una medida de un analito de
interés

3. Standard de oro
• La validez de una nueva prueba diagnóstica
puede ser estudiada con la sensibilidad y la
especificidad de la misma. Para ello debemos
tener una prueba de referencia (patrón de oro
o gold-standard) que debe ser la mejor
disponible hasta el momento y que asumimos
que clasifica siempre correctamente a los
pacientes sanos y enfermos.
• Nuestro “gold-standard” puede ser una única
prueba o bien incluir una combinación de
pruebas y procedimientos diagnósticos

4. Precisión
• “Es la diferencia entre los resultados
obtenidos en repetidos análisis de la
misma muestra.
Independientemente del verdadero valor
de la sustancia medida”.
• Expresa la reproducibilidad. El desvío
estándar (S) mide el alejamiento de los
datos del valor medio.

5. Precisión

7. Exactitud
“Cercanía de los valores obtenidos con un
método al valor más probable”

10. Sensibilidad
• “Probabilidad de que un individuo enfermo
obtenga un resultados positivo con la
metodología empleada”
V positivos
Sensibilidad = x 100
V positivos + F negativos
Falso Negativo: Muestra con resultado negativo cuando su verdadero estado
es positivo.

11. Especificidad
• Probabilidad de que un individuo sano
obtenga un resultados negativo con la
metodología empleada”
V negativos
Especificidad = X 100
V negativos + F positivos
Falso Positivo: Muestra que da un resultado positivo cuando su verdadero
estado es negativo.

12. Valor predictivo positivo (VPP)
• “Probabilidad de que un individuo con un
resultado positivo realmente se encuentre
enfermo”
VPP=
FP + VP
VP
Todos los positivos

13. Valor Predictivo Negativo (VPN)
• “Probabilidad de que un individuo con un
resultado negativo realmente se
encuentre sano”
VPN =
VN
VN + FN Todos los Negativos

14. “El valor predictivo positivo varia en función de la
tasa de Prevalencia de la enfermedad”
PREVALENCIA
“Número de personas enfermas en un momento dado,
en relación con el total de la población o número de
personas”
INCIDENCIA
“Número de casos nuevos en un momento dado, en
relación con el total de la población o número de
personas”

15. Punto de corte o Cut off
• Es el valor por sobre el cual se considera
positivo o negativo el resultado de un test
• Define la Sensibilidad y Especificidad de
una prueba

18. Resumen

20. ESTANDARIZACIÓN DE LA PRUEBA DE ELISA
PARA EL INMUNODIAGNÓSTICO DE
HIDATIDOSIS HUMANA EMPLEANDO
ANTÍGENOS DE PRODUCCIÓN LOCAL
La evaluación de la técnica de ELISA empleando extractos totales de líquido
hidatídico mostró una sensibilidad del 100% (A /A +C); especificidad del 96 %
(D/B +D); valor predictivo positivo del 94 % (A / A + B) y un valor predictivo
negativo del 100% (D/C + D).

21. Técnicas analíticas

22. Diagnostico de infecciones
Identifican el
agente etiológico
frotis
Detectan la respuesta
inmune, Ac
Serología

23. Métodos directos
-Cultivo del agente involucrado.
Bacterias, Virus, Hongos y parásitos.
• Muchas especies son aún no cultivables
o su cultivo es lento y/o muy complejo.
-Detección del agente o de sus componentes.
• Tinciones específicas e inespecíficas.
• Detección de antígenos.
• Detección/amplificación de ácidos nucléicos.

24. Métodos indirectos
-Detección / Cuantificación de anticuerpos
específicos.
-Detección / Cuantificación de anticuerpos
inespecíficos.
-Permiten identificar el estado con respecto
a la infección (Virgen, Pasada, Aguda y
Crónica), su monitoreo y pronóstico.
Portación.

25. A quien y para que?
• Para realizar un diagnóstico correcto, los
resultados obtenidos en el laboratorio de
bioquímica clínica deben ser analizados
dentro de un contexto clínico y
epidemiológico.

26. Condiciones y tipo de muestra
• Para la toma de una muestra de sangre es
conveniente que el paciente tenga un
ayuno de ocho horas.
• Suero tomar la muestra por punción venosa
y colocarla en un tubo seco, sin anticoagulante.
Separación posterior. Se pueden utilizar tubos
con gel o partículas aceleradoras de la
coagulación.

27. DETERMINACION
INMUNOLOGICA
“Todo procedimiento inmunológico en la
muestra de un paciente es una instancia
única que requiere un criterio científico
riguroso, por lo tanto es necesario que los
niveles de precisión, sensibilidad y
especificidad sean los adecuados”

29. Periodo de ventana
• Lapso entre el momento de la infección y
la aparición de los primeros marcadores
que se detectan en el laboratorio

30. Directo o indirecto?

31. Respuesta inmune

32. Inmunoglobulinas-Isotipos

33. Perfil de las inmunoglobulinas

34. ELISAS

35. Elisas

36. IFI

38. IFI para Trichinelosis

39. IFI para Toxoplasma

40. Western Blots

43. Inmunocromatografias

45. Hemaglutinacion

47. DE TAMIZAJE O SCREENING
• Permiten discriminar a los pacientes
sanos de los presuntamente enfermos.
“ALTA SENSIBILIDAD Y ADECUADA
ESPECIFICIDAD”
Ej Tamizaje de HIV

48. DIAGNÓSTICAS
• Permiten confirmar el diagnóstico de los
pacientes enfermos.
“ALTA O ADECUADA SENSIBILIDAD
PERO CON ALTA ESPECIFICIDAD”
Ej: WB para HIV

49. Metodología
• Manual
• Semiautomática
• Automática

50. Comprobar
• Linealidad Calibradores
• Valores de referencia Verificación
• Controles Comerciales o “in house”
• Programas externos

51. COEFICIENTE DE VARIACIÓN
• Variación relativa de los datos respecto
del valor medio
CV % =
S
X
X 100

52. Errores
• Analíticos
-Sistemáticos
-Aleatorios
• Pre analíticos
• Post analíticos

53. • UMBRAL DE SIGNIFICACIÓN :Valor por
debajo del cual no posee significación
clínica.
• CONTROL DE CALIDAD INTERNO:
Evalúa los errores casuales y sistemáticos
que se producen dentro del laboratorio.
REPRODUCIBILIDAD

54. CONTROL DE CALIDAD
EXTERNO
• Son programas donde se comparan los
resultados emitidos por los laboratorios
participantes.
EXACTITUD

55. Caso clínico:
• Llega al Laboratorio de guardia una
muestra para testeo de VDRL del servicio
de maternidad.
• Mujer que hace dos día a luz una niña
• El resultado de la VDRL dio: Reactivo
• La mujer que solo fue al hospital para
tener su bebe, admite que nunca se
realizo ningún control durante la gestación
• Se decide realizar la VDRL
semicuantitativa

56. VDRL de la madre
Resultado:
Reactiva

57. VDRL Semicuantitativa
1/2 1/4 1/8
Titulo: 8 dil.

58. • Por las causas mas que evidentes se
solicita la punción del recién nacido para
obtener LCR, para ello se realiza un
hemograma el cual da normal.
• Recepción de dos tubos conteniendo LCR
del neonato, el primero es remitido
inmediatamente al área de Bacteriología y el
segundo es procesado
• Se realiza un estudio Fisicoquímico y VDRL

59. Resultado
• VDRL en LCR: Negativa
• Fisicoquímico:
 Aspecto: ligeramente
hemorrágico y
xantocromico
 Células: 13 x mm3
 Predominio:
mononuclear
 Proteínas 40 mg/dl
 Glucosa +