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![Método Cromatografía gaseosa
(CG-FID)
Método Head-space
[EtOH] gas ~ área del
pico
Muestra Biológica +
ClNa
Equilibrio a 37ºC durante 30 minutos
1- Metanol 5- t-butanol (St.I.)
2- Etanol 6- Metil etil cetona
3- Acetona 7- 2-butanol
4- Isopropanol
Método sensible
y especifico](https://image.slidesharecdn.com/etanol-metanol-140917161637-phpapp01/85/Etanol-metanol-39-320.jpg)
Subido porAriel Aranda
Etanol metanol
Este documento trata sobre los venenos volátiles como el etanol y el metanol. Explica las características, efectos y métodos de análisis de estos compuestos. Describe las vías de absorción, metabolismo y eliminación del etanol y cómo puede causar intoxicación aguda o crónica. También cubre los efectos teratogénicos del etanol y el síndrome de alcoholismo fetal. Finalmente, analiza las propiedades, intoxicación y tratamiento del metanol.
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- 3. Análisis Cualitativo Aislamiento Cuantificación Presencia o ausencia del analito positivo Negativo Pruebas suplementarias o se descarta la presencia del toxico
- 4.
- 5. Ensayos físicos •Aspecto • Olor • pH Acidosis Metabólica
- 6. Ensayos Químicos CarácterReductor Compuesto Reductor Alcoholes, + aldehídos y cetonas - Valor Analítico
- 7. Ensayos Químicos cualitativos Acción sobre el Diamino plata Propiedad Oxidante
- 8. Ensayos Químicos cualitativos Aldehídos, cloroformo, fenol y paraldehido Alcoholes + -
- 9. Identificación de Formaldehído Reacción con ácido Cromotrópico en sulfúrico 75%
- 10. Etanol Sinonimia: alcohol,alcohol etílico, etanol Características fisicoquímicas * Líquido incoloro * Punto de ebullición: 78,5 ºC * Densidad : 0,8 g/ml (20ºC) * Miscible con agua y algunos solventes orgánicos Usos más comunes * Disolvente * Antiséptico Fuentes del tóxico * Bebidas alcohólicas * Alcohol medicinal * Perfumes * Cosméticos * Antisépticos * Gotas óticas
- 11. Administración-Absorción • Absorción: Vía inhalatoria Digestiva Parenteral Rectal
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- 13. Factores que afectanla Absorción gástrica • Ayuno A mayor contenido graso, mas lento es la absorción • Tipo de graduación alcohólica: Gasificada Cerveza Whisky • Sexo ADH mas activa en Hombres que en Mujeres • Edad Desarrollo del metabolismo • Integridad de la mucosa gástrica Mayor absorción en mucosa dañada
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- 17. Metabolismo-Hepático Crónico Recordarque el ROH es inductor de su propio metabolismo Mayor cantidad de ROH puede ser metabolizado
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- 19. Excreción * Orina:5-10% como ETOH * Saliva * Sudor * Bilis * Aire espirado : correlación con la concentración en sangre * Leche materna * Atraviesa Barrera Placentaria * Eliminación: 30 ml en 3 horas
- 20. Relación entre elaire espirado y el contenido en sangre de alcohol Aparece en sangre 5-10 min desaparece de la sangre: 8-10 hs Pico máximo: 30-90 min
- 21. Calculo retrospectivo CCO= CC1 + β x t Donde: CCO: concentración en el momento del accidente CC1: concentración en el momento de la toma de muestra t: tiempo desde el accidente y la toma de la muestra Β: Factor de Widmark: 0,12 – 0.15 g/dl/hs
- 22. Adicción • Incluye: Compulsión Deseo de consumo Tolerancia Efectos producidos a mayores concentraciones Dependencia Psíquica y física
- 23. Alcoholismo Estado dedependencia al alcohol caracterizado por un consumo anormal y compulsivo de éste, el cual frecuentemente persiste a pesar de las adversas consecuencias personales y sociales y sirve al propósito de experimentar ciertos efectos psíquicos o evitar los efectos adversos provocados por su ausencia
- 24. Etanol-Efectos sobre elorganismo • SNC: depresor no selectivo, se pierde el autocontrol y se afecta el comportamiento • Estomago: gastritis, úlceras • Corazón: miocardiopatias • Aparato genito-urinario: infertilidad, impotencia sexual en el hombre
- 25. Etanol-Efectos sobre elorganismo • Hígado: hepatitis toxica - cirrosis • Páncreas: pancreatitis aguda • Efectos teratogénicos: Síndrome alcohólico fetal
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- 27. Síndrome fetal alcohólico • Incidencia 1: 300- 1: 2000 Microcefalia y retardo mental Retraso en el crecimiento Disformismo facial Temblores Succión débil y mal coordinada Déficit de atención-hiperactividad y problemas de aprendizaje Cardiopatía congénita
- 28. Síndrome fetal alcohólico El Bebe lo que tú Bebes
- 29. Etanol-Efectos sobre elorganismo • Altera el metabolismo de Glúcidos: Hipoglucemia Hiperlacticidemia • Altera el metabolismo de los lípidos: Aumenta la síntesis de ácidos grasos y Tg Cetonemia y cetonuria Deposito de grasas en tejidos
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- 31. ETANOL Y COMPORTAMIENTO Concentración de Etanol en sangre (g/l) Efectos 0,22 Cambio de carácter Empeoramiento de la coordinación motora 0,50 Empeoramiento de la atención Aumento del riesgo de accidentes automovilísticos 1,00 Ataxia intoxicación 2,20 Pérdida de la conciencia 5,00 Muerte
- 32. Etanol- Muestras CUANTIFICACIÓNDE ETANOL * Muestra: sangre entera, plasma, suero - Jeringa sin cámara de aire - Tubo sin cámara herméticamente cerrado * Anticoagulante: citrato, fluoruro de sodio, (heparina, EDTA)
- 33. Métodos para análisis 1- Métodos Químicos: Microdifusión 2- Métodos enzimáticos 3- Método Cromatografía gaseosa (CG-FID)
- 34. Método Químico- Microdifución Muestra a investigar Solución Cr2O7K2 0,4N (SO4H2 10N) Sol. Sat. CO3K2 Cr2O7 = reducido (Cr3+) Valoración por retorno Tiempo 2 horas: 50ºC 6 horas: 37ºC 10 horas: 25ºC Procesar un blanco en forma paralela
- 35. Cr2O7 = reducido(Cr3+) Valoración : + IK 3N Titilación: S2O3Na2 0.1N (+Almidón) Método de Winnick: FUNDAMENTO de la TITULACIÓN
- 36. ESPECIFICIDAD de los MÉTODOS QUÍMICOS • NO SON ESPECÍFICOS • INTERFIEREN: otros alcoholes, aldehídos, cetonas y compuestos reductores • NO INTERFIEREN: cloroformo, benceno, Tetracloruro de carbono, tricloroetileno
- 37. Métodos Enzimáticos Kirk Teller Leric
- 38. ESPECIFICIDAD DE MÉTODOS ENZIMÁTICOS • NO SON ESPECÍFICOS • Otros alcoholes son sustrato con menor velocidad de reacción
- 39. Método Cromatografía gaseosa (CG-FID) Método Head-space [EtOH] gas ~ área del pico Muestra Biológica + ClNa Equilibrio a 37ºC durante 30 minutos 1- Metanol 5- t-butanol (St.I.) 2- Etanol 6- Metil etil cetona 3- Acetona 7- 2-butanol 4- Isopropanol Método sensible y especifico
- 40. Para no marearnos Métodos Ventajas Desventajas Microdifusión Bajo costo Limitado Nº de muestras Baja sensibilidad Tiempo Interferentes Métodos Enzimáticos Alta sensibilidad Menos interferentes Alto costo reactivo Vencimiento del Kit AxSym (Inmunológicos) Alto Nº de muestras Menos interferentes Alto costo reactivos Consignación Equipo CG-FID Alta sensibilidad Específico Curva de calibración Analista capacitado Alto Costo Equipo Tiempo
- 41. Toma de muestrapara Cuantificación Legal de Etanol en sangre • Muestra de elección: Sangre • Tubo seco Suero • Nunca usar Alcohol como antiséptico • Sin cámara de aire o cerrado herméticamente
- 42. Hepatitis alcohólica Aparecendespués de una intoxicación aguda importante. Se caracteriza por una lesión inflamatoria con infiltración del hígado por leucocitos, necrosis hepatocelular y balonización de células. La clínica es muy variable, existen formas asintomáticas y formas muy agudas que pueden abocar en una insuficiencia hepática letal. Los signos clínicos simulan a los de las hepatitis virales o tóxicas: anorexia nauseas, malestar general, dolores abdominales, enflaquecimiento. Puede haber fiebre en la mitad de los casos. La hepatoesplenomegalia se puede encontrar en un tercio de los casos. También puede aparecer ictericia. En ocasiones ascitis y síndrome hemorrágico cutaneo mucoso y encefalopatia con una mortalidad del 60-80%. La citolisis se traduce por una elevación de las transaminasas, colostasis ictérica o anictérica manifestada con aumento de la bilirrubina, de las fosfatasas alcalinas, de la gamma-GT, también alargamiento del tiempo de Quick y del factor V, hipoalbuminemia, hiperleucocitosis.
- 43. Factores de lacoagulación Marcadores de daño hepáticos
- 44. Tratamiento • Sintomáticoo de soporte • No hay antídoto • Hemodiálisis en casos muy graves • Dar solución glucosada para la hipoglucemia
- 45. Dos borrachos enun auto, caen de un precipicio y mueren. Camino al otro lado, uno le dice al que manejaba: - ¿no viste el cartel? - Sí, lo ví clarito, decía: FERNET BRANCA...... - Nooooooooooo... tarado!!! Decía: FRENE, BARRANCA !!!!!
- 46. METANOL Sinonimia: alcoholmetilico, alcohol de la madera Características fisicoquímicas * Líquido incoloro * Punto de ebullición: 64,7 ºC * Densidad : 0,791 g/ml (20ºC) * Miscible con agua y algunos solventes orgánicos Usos más comunes * Disolvente Industrial * Solvente para Lacas, Pinturas, Barnices * Componente de Removedores * Limpiadores de vidrio * Adulterante de Bebidas Alcohólicas
- 47. CAMBIO DE ETANOLPOR METANOL Intoxicación masiva por metanol: Argentina (Febrero 1993) vinos Soy Cuyano Adulteración de vinos con metanol 43 muertos, cientos de afectado INTOXICACIÓN POR METANOL * ES GRAVE * RIESGO DE MUERTE * SECUELAS IRREVERSIBLES Dosis tóxica: 10 a 30 ml (0,4 ml /Kg en niños) Dosis letal: > 60 ml (0,8 ml/Kg en niños)
- 48. Absorción-Metabolismo • Absorción: Vía inhalatoria Digestiva: rápida absorción Cutánea
- 49.
- 50. Eliminación • Orina5-10% inalterado • Aire espirado • Metabolitos
- 51. Intoxicación • Periodode latencia: 12-24 hs • Depresor del SNC • Trastornos digestivos: nauseas , vómitos • Dificultad respiratoria • Acidosis metabólica severa (anion gap ) • Alteraciones visuales: daño en la retina y atrofia del nervio óptico • Secuelas permanentes: neuropatías y encefalopatias
- 52. Manifestaciones Clínicas Laintoxicación por metanol se caracteriza por el desarrollo de tres estadios progresivos. El primer estadio se presenta con una mínima disminución de la actividad del sistema nervioso central, debilidad, sensación vertiginosa y náuseas. Tras un periodo de latencia que es asintomático Aparece una segunda fase, que coincide con el desarrollo de una acidosis metabólica que se caracteriza por vómitos, dolor abdominal, desorientación y alteraciones visuales con fotofobia, visión borrosa, midriasis bilateral arreactiva a a la luz y ceguera ocasional. En la tercera fase, en relación directa con el grado de acidosis metabólica alcanzada, se produce lesión neuronal, con necrosis retiniana y de los ganglios basales del encéfalo. En esta fase hay hipotensión, coma profundo y respiración de Kussmaul. El desarrollo de apnea y convulsiones aparece en la etapa final
- 53. Tratamiento • Tratamientode soporte o sintomatico • Antidoto: Etanol oral o endovenoso 4-metil pirazol inhibidor de la ADH • Monitorizar etanolemia ( 1- 1,5 g/l) • Hemodiálisis en casos graves
- 54. Tratamiento intoxicación porMetanol: ETILTERAPIA Etanol Metanol Etilenglicol Glicolaldehído Acetaldehído Ác.Glicólico CO2 + H2O Formaldehído Ác.Fórmico ADH
- 55. Diagnostico de laboratorio • Metanol en sangre • Metanol en orina • Formiato en orina • Estado acido base: pH < 7,20 • Brecha anionica • Anion gap: (Na++K+)-( Cl-+HO3-) • Brecha osmolar Gap osmolar: osmolaridad medida- osmolaridad calculada
- 56. Toxicodinamia del Metanol ELIMINACIÓN * Orina: 5-10% inalterado * Aire espirado INTOXICACIÓN AGUDA: * Depresión del SNC: cefalea, vértigo, confusión * Trastornos digestivos: nauseas , vómitos * Acidosis metabólica severa * Dificultad respiratoria: respiración en boca de pescado * Alteraciones visuales, daño en la retina y atrofia del nervio óptico Secuelas permanentes: ceguera, encefalopatía, parkinsonismo, polineuropatía Concentración en sangre 0-0,20 g/l Usualmente 0,20-0,50 g/l Requiere tratamiento > 0,8 g/l Potencialmente fatal Niveles >0,20 g/l son tóxicos requiere tratamiento
- 57. Cuantificación de Metanol Muestra: sangre entera, plasma, suero - Jeringa sin cámara de aire - Tubo sin cámara, herméticamente cerrado * Anticoagulante: Citrato, fluoruro de sodio Metodologías: * 1- Métodos Químicos: Desproteinización y Microdifusión * 2- Método Cromatografía gaseosa (CG-FID)
- 58. 1- METODO QUÍMICO:Oxidación con KMnO4 Aislamiento: Desproteinización MÉTODO DE WILLIAMS Fundamento: El metanol es oxidado por el KMnO4 a formaldehido, el cual forma complejo coloreado con el ácido cromotrópico Interferentes: EDTA, heparina Desproteinización con ácido Tricloroacético en solución sulfúrica al 10% p/v
- 59. Método de Williams 1- Muestra 2- Desproteinizante TCA en H2SO4 10% v/v Transferir a otro tubo sobrenadante 3- KMnO4 5% p/v 4-Eliminar exceso de KMnO4 (Na2SO3) 5-Ácido cromotrópico 0.5% + H2SO4 cc 6-BM hirviente 5 minutos 7-Espectrofotómetro a 570 nm 8-Comparar con curva de calibración Sensibilidad: 0,03 g/l Interferencias: Heparina, EDTA, Formalina
- 60. Reacción de Williams * Blanco de Reactivos * Blanco de Muestra: NO KMnO4 * Muestra Fundamento de la Cuantificación
- 61. COMPLEJO COLOREADO conel ÁCIDO CROMOTRÓPICO
- 62. METODO QUÍMICO: Oxidación con KMnO4 Aislamiento: Microdifusión Método de Feldstein-Klendshoj: + reacción con ácido cromotrópico Rvo Fijador: H2SO4 10% Rvo Liberador: CO3K2 sol sat
- 63. Cuantificación de etanoly metanol cuando están presentes en la misma muestra de sangre Deben realizarse las pericias por los vinos adulterados Soy Cuyano, donde en forma intencional se le adicionó alcohol de quemar, provocando la intoxicación de varias personas con los siguientes síntomas: visión borrosa, confusión mental y debilidad, muchos de ellos presentaron marcada acidosis metabólica y se les efectuó etilterapia * Microdifusión etanol + metanol * Técnica de Williams metanol
- 64. Como se hace? Mediante la técnica de etanol por microdifusión calculamos los Eq. totales (etanol + metanol) Mediante la técnica de Williams para metanol se obtiene la concentración en g/l Una vez obtenidos los equivalentes de metanol, por diferencia se sacan la concentración de Etanol (g/l)
- 65. Mediante la técnicade etanol por microdifusión calculamos los Eq. totales (etanol + metanol) N S2O3 2- = 0,1199 VB = 1,52 ml VM = 0,3 ml Vsangre = 0,5 ml Eq. Totales = 0,29 eq/l Cálculo de los equivalentes
- 66. Mediante la técnicade Williams para metanol se obtiene la concentración en g/l Cc= 0.74 g/l deben ser transformados a eq./l de la siguiente manera
- 67. Una vez obtenidoslos equivalentes de metanol Eq. Totales = Eq. Etanol + Eq. Metanol Eq. Etanol = Eq. Totales Eq. Metanol Eq. Etanol = 0,29 - 0,09 = 0,20 eq/l etanol pasar los eq./l de etanol a g/l de la siguiente manera RESULTADO FINAL: 2,30 g/l de etanol 0,74 g/l de metanol