Este documento describe métodos para determinar las proteínas totales y la albúmina en suero. Para las proteínas totales, se utiliza el método de biuret, donde las proteínas reaccionan con el ion de cobre para formar un complejo púrpura que se mide a 546 nm. Para la albúmina, se usa el método del verde de bromocresol, donde la albúmina forma un complejo a pH ácido que se mide a 600 nm. También se proporciona información sobre la albúmina como la proteína más abund

1. DETERMINACIÓN DE
PROTEÍNAS TOTALES EN
SUERO – DETERMINACIÓN
DE ALBÚMINA EN FLUIDOS
BIOQUIMICA GENERAL

2. Proteínas
 Macromoléculas
 UNIDAD: Aminoácidos
 ENLACE: Enlace peptídico

3. DETERMINACIÓN DE PROTEINAS TOTALES
5 min a 37 °C. Lectura a 546 nm

4.  Se necesita un medio alcalino (HIDROXIDO DE SODIO)
 El enlace peptídico debe reaccionar con el ion cúprico del SULFATO DE
COBRE, formando el complejo violeta-púrpura de biuret
 El TARTRATO DE SODIO Y POTASIO inhiben la formación del hidróxido
de cobre, evitando así su precipitación
 El IODURO DE POTASIO previene la reducción del ion cúprico a óxido
cuproso
PROTEINAS
(enlace
peptídico)
Cu+2
Medio Alcalino
Complejo Cu-
Proteína
+

5. Albúmina
 Proteína sérica NO GLOBULINA
 La más abundante en el plasma
 Sintetizada en el hígado
 Permite el transporte de bilirrubinas, ácidos grasos, ácido
úrico, medicamentos y antibióticos
 Regula la presión osmótica
 Su disminución: Desnutrición, enfermedad peptídica,
trastornos renales

6. DETERMINACION DE ALBUMINA
5 min a 37° C. Lectura a: 600 nm

7.  El VERDE DE BROMOCRESOL es un colorante anionico
 Se necesita que la proteína este a un pH ácido (TAMPÓN
DE SUCCINATO)…pH: 4.3
 Brj 35: Éster polioxietilenlurilico
ALBUMINA VBC
pH: 4.3
Complejo VBC -
ALBUMINA
+

8. RELACION ALBUMINA – GLOBULINA
(RELACION A/G)