El documento describe los principios de diagnóstico inmunológico para enfermedades infecciosas. Explica que las enfermedades pueden diagnosticarse definitivamente mediante la detección de agentes infecciosos, productos del agente o una respuesta inmune específica del paciente. Se enfoca en las técnicas serológicas que miden los niveles de anticuerpos en el suero, principalmente IgM e IgG, usando reacciones de aglutinación directa e indirecta y pruebas de antiglobulina.

1. Diagnóstico por Métodos
Inmunológicos
Técnicas inmunológicas
Técnicas serológicas

2. Principios de Diagnóstico Inmunológico
Las enfermedades infecciosas pueden ser
diagnosticadas definitivamente solo por tres formas:
1) Demostrar la presencia en el paciente de un agente conocido
capaz de provocar la enfermedad, por observación directa en el
material clínico obtenido del paciente o por cultivo de laboratorio (in
vivo o in vitro)
2) Detección de un producto específico del agente infeccioso (que no
pueda formarse sin la presencia del agente) en el material clínico
obtenido del paciente
3) Detección en el suero del paciente de una
respuesta inmunológica específica dirigida contra el
Agente infecciosos

3. Características generales de la
respuesta inmune
• Categorías de la respuesta inmune
– Respuesta inmune mediada por células
o Inmunidad Celular
– Respuesta inmune mediada por anticuerpos o
Inmunidad humoral
• Para determinar si se ha producido un anticuerpo contra un
agente en particular, se investiga en el suero (o plasma) del
paciente la presencia de anticuerpos
• El diagnóstico de las enfermedades por la medición de los
niveles de anticuerpo en suero se
denomina serología

4. Características generales de la
respuesta inmune
• Características de los Anticuerpos
– Mecanismo determinado genéticamente
– Dirigidos contra un antígeno o determinante
antigénico (epítope)
– Los microorganismos pueden contener numerosos
determinantes antigénicos
– Habrá por lo tanto numerosos
anticuerpos para cada antígeno
– Muchos determinante antigénicos
requieren ser expuestos

5. Características generales de la
respuesta inmune
• Características de los Anticuerpos
– Los anticuerpos se unen a la superficie de los
patógenos para:
• Facilitar su ingestión
por las células
fagocíticas
(Anticuerpos
opsonizantes u
opsoninas)

6. Características generales de la
respuesta inmune
• Características de los Anticuerpos
– Aunque el ser humano produce varias
clases de anticuerpos los métodos
serológicos han sido desarrollados
para medir principalmente dos clases:
• Inmunoglobulina M (IgM)
• Inmunoglobulina G (IgG)
– Solo en un caso se han desarrollado métodos para
detectar la Inmunoglobulina A (IgA): Toxoplasmosis

7. Características generales de la
respuesta inmune
• Características de los Anticuerpos
– IgG
• Se producen mas tardíamente pero persisten mas
tiempo.

8. Características generales de la
respuesta inmune
• Características de los
Anticuerpos
– IgM
• Es el primer anticuerpo
producido en respuesta a
un antígeno (infección
reciente)
• Cinco proteínas idénticas
unidas por la cadena J
• Unión al antígeno menos
avida.
• No fija complemento

9. Principios de los Métodos Serológicos
La reacción entre un antígeno y un anticuerpo
dirigido específicamente contra él da lugar a un
complejo antígeno – anticuerpo
Utilizada ampliamente en los laboratorios para la
detección y cuantificación de gran cantidad de
sustancias en diversos medios biológicos.
Reacción Antígeno-Anticuerpo

10. Reacciones de Aglutinación
Cuando el antígeno libre o unido a un soporte se enfrenta al anticuerpo, el
complejo antígeno-anticuerpo resultante se observa como una aglutinación
El proceso tiene dos fases: unión reversible y aglutinación por formación de
puentes entre los anticuerpos IgG divalentes o IgM multivalentes y los antígenos
Los anticuerpos IgM son mas eficaces para aglutinar (Anticuerpos completos).
Los anticuerpos IgG a veces producen entrecruzamientos (Anticuerpos
incompletos)
Se expresan como aumento
de título
Dan fenómeno de prozona (aglutinación aparente por exceso de antígeno o
anticuerpo sin aglutinación

11. Reacciones de Aglutinación
Factores que influyen en las reacciones de aglutinación
Carga de las partículas
Tipo de anticuerpo
Concentración de electrolitos
Viscosidad
Número de determinantes antigénicos
Se emplean tanto para la detección de antígenos como
de anticuerpos.
Se pueden hacer de dos maneras: directas o indirectas

12. Reacciones de Aglutinación Directa
Para detección de anticuerpos
Se pueden hacer en tubo, portaobjetos,
placa o pocillo de microplaca
Se enfrentan las partículas microbianas
(generalmente muertas) en suspensión
con el suero del paciente.
Si el suero del paciente posee anticuerpos frente a la bacteria, se forman
agregados visibles en el fondo del tubo o en el porta o en fondo de la
microplaca
Detección de anticuerpos frente a Brucella (Reacción de Huddleson) o
Salmonella (Reacción de Widal

13. Reacciones de Aglutinación Indirecta
Se adsorben los antígenos en un elemento partículado (partículas de látex,
gelatina o bentonita, o células como hematíes humanos, ovinos o de pavo
Se enfrentan estos elementos (antígeno + elemento particulado) al suero del
paciente.
Se observa la presencia de agregados visibles en el fondo del tubo, porta o
pocillo de microplaca
Detección de Treponema pallidum, Echinococcus granulosus

14. Pruebas de Antiglobulina
Se puede utilizar el microorganismo entero o adsorbido a un soporte particulado.
Se enfrentan estos elementos (antígeno + elemento particulado) al suero del paciente.
Se incuba la muestra con una anticuerpo anti-inmunoglobulina humana (anti-gamma)
Se observa la presencia de agregados visibles en el fondo del tubo, porta o pocillo de
microplaca.
Útil para detectar anticuerpos incompletos, en especial en Brucelosis.