El documento describe varios métodos de detección de antígeno-anticuerpo, incluyendo aglutinación, inmunofluorescencia, inmunoprecipitación, inmunofluorescencia indirecta y ensayos de ELISA. Los anticuerpos pueden detectar antígenos en muestras clínicas a través de la unión específica y produciendo una señal como cambios de color o fluorescencia. Las pruebas deben ser sensibles, específicas y reproducibles para detectar con precisión la presencia o ausencia de un antígeno

1. Métodos de detección de
Antígeno- Anticuerpo
MsC. Libeth Yajaira Criado G.
Docente Escuela de Medicina
Universidad de Santander

2. El reconocimiento del Antígeno por las
inmunoglobulinas

3. Las inmunoglobulinas se presentan en
forma transmembrana (mIg) o soluble(sIg)

4. Inmunoglobulinas

5. Inmunoglobulinas

6. Dominios básicos de las
inmunoglobulinas

7. Isotipos determinados por las cadenas
pesadas

8. Variabilidad de inmunoglobulinas

9. Tipos de Enlaces entre Antígeno-
Anticuerpo

11. Funciones de las Inmunoglobulinas

13. Pruebas Diagnósticas

14. Validez

15. Sensibilidad

16. Especificidad

17. Reproducibilidad

18. Seguridad

19. La seguridad de una prueba diagnóstica

20. Valor predictivo positivo

21. Valor predictivo negativo

23. Anticuerpos

Pueden aparecer en dos formas:
◦ Unidos a membranas
◦ Secretados (solubles)

Funciones efectoras:
◦ Neutralización de antígenos
◦ Activación del Sist. del complemento
◦ Opsonización de antígenos
◦ Hipersensibilidad inmediata

24. Policlonales:Obtenidosa partir de animales inmunizadoscon el antígeno
Monoclonales: Producidosin vitro.
Los anticuerpos pueden ser:

25. Detección del Antígeno
Detectan el microorganismo utilizando anticuerpos
específicos marcados.
Si en una muestra clínica (LCR, orina, esputo ) está
presente el microorganismo, al agregarle los anticuerpos
marcados específicos contra él, se fijarán al organismo y
se produce la señal correspondiente:
• Aglutinación
• Cambio de color de un sustrato
• Fluorescencia
• Emisión de luz
Por el contrario si el microorganismo buscado no está
presente en la muestra, los anticuerpos no podrán unirse
a él y no se producirá la señal.

28. La muestra

29. Las reacciones inmunológicas
Se pueden realizar en placas de titulación, tubos convencionales,
membranas, portaobjetos.

30. Aglutinación
Se utilizan anticuerpos
adheridos por su región Fc a
partículas grandes de Látex
que facilitan la observación de
la aglutinación al formarse
grumos de gran tamaño.
Permiten la detección de
antígenos solubles
(polisacarido); se pueden
realizar sobre un portaobjetos y
se llevan a cabo en tan sólo
unos minutos.

31. Aglutinación

32. Inmunofluorescencia
Se utilizan anticuerpos marcados
con sustancias fluorescentes que se
fijan a los microorganismos
inmunofluorescencia directa, IFD
La visualización se realiza con
un microscopio de fluorescencia.
Se observa el microorganismo
brillante (fluorescente) sobre un
fondo oscuro.

33. INMUNO PRECIPITACIÓN
Es la precipitación de complejos antígeno-anticuerpo. Las condiciones para que
se lleven a cabo las reacciones de inmunoprecipitacion son:
o Los antígenos deben ser multivalente y solubles
Cada anticuerpo debe tener al menos dos sitios de unión a antígenos disponible.
o El antígeno y el anticuerpo deben estar presentes en las correctas
proporciones lo que permite que todos los antígenos y anticuerpos sean parte
de la malla.
La precipitación es un cambio de fase, en la cual los reactantes solubles forman
un producto insoluble, este fenómeno es llamado reacción de precipitación. La
formación de la malla no puede ocurrir cuando el antígeno tiene un único epitope
que no es repetido. Debido a que un antígeno univalente no puede unirse a dos
diferentes anticuerpos simultáneamente.

34. INMUNO PRECIPITACIÓN

35. Inmunofluorescencia

36. Inmunofluorescencia indirecta
• Detecta los diferentes
antígenos con su
anticuerpo específico no
marcado y a
continuación revelarlo
mediante un anticuerpo
marcado dirigido con el
primer anticuerpo(Anti-
anticuerpo) ( con un solo
anticuerpo marcado se
pueden revelar los
diferentes anticuerpos
específicos no
marcados)

37. Enzimoinmunoensayo -ELISA

38. Test de Outcherlony:
En gel de agarosa, en el cual se colocan, a
una distancia de varios mm una de otra, las
dos sustancias a reaccionar (Ag y Ac).
Tanto las inmunoglobulinas como los antígenos
migran por difusión y en minutos, o pocas
horas, se encuentran. Si hay especificidad
entre ellas y están presentes en las
concentraciones apropiadas se forma en
pocas horas, el complejo Ag-Ig que es visible
como una línea blanca. Esta línea se forma en
el frente del encuentro de los dos reactantes y
es por lo tanto perpendicular a la dirección de
migración entre ellas.

39. Gracias