El documento describe diferentes métodos de esterilización y desinfección, incluyendo el calor húmedo, calor seco, radiaciones, óxido de etileno y formaldehído. También describe diferentes niveles de desinfección dependiendo del riesgo de infección y contacto con tejidos. La microscopía, incluyendo la tinción de Gram, se utiliza para examinar muestras.

1. ESTERILIZACIÓN y
DESINFECCIÓN.

2. • Esterilización.
Destrucción o eliminación completa de
toda forma de vida microbiana.
Ofrece el máximo nivel de seguridad. Es un estado
“absoluto”.
• Desinfección. Proceso que extermina o destruye la
mayoría de los microorganismos patógenos y no
patógenos. Es selectiva. Se aplica a objetos inanimados o
superficies. Agentes químicos (desinfectantes o
germicidas)
• Antisepsia. Uso de una sustancia química no tóxica
(antiséptico) sobre tejidos vivos, para prevenir o detener el
crecimiento o la acción de los microorganismos.
• Asepsia es el estado libre de microorganismos que
causan enfermedad.

3. ESTERILIZACIÓN
El único procedimiento que garantiza la eliminación de todos
los microorganismos. Máxima seguridad.
Se puede realizar mediante diversas técnicas:
- Métodos físicos: calor húmedo o autoclave, calor seco u
horno Pasteur, flameado, filtrado, irradiación ionizante
gamma.
- Métodos químicos: óxido de etileno, formaldehído,…

4. Calor húmedo o autoclave
Método de elección en todo lo que pueda esterilizarse por ser
termorresistente.
Se consigue mediante el uso de calor en forma de agua,
aprovechando que el punto de ebullición se eleva al
aumentar la presión dentro de una cámara.

5. Ventajas:
a) Rápido
b) seguridad, es el que menos fallos y toxicidad presenta
c) economía (la mejor relación coste/beneficio).
Inconvenientes: degrada
materiales plásticos, provoca la corrosión de los metales, el
deterioro de filos cortantes y
la imposibilidad de esterilizar aceites, grasas y polvos.

6. Calor seco o Poupinel
Requiere de tiempos prolongados de exposición al calor,
causando deterioro del instrumental. Daños por oxidación.
Se necesitan temperaturas mayores para destruir los
gérmenes.
Este método se utiliza para esterilizar jeringas de cristal y
material de vidrio, instrumentos cortantes, polvos y grasas.
140º C x 3 horas
160º C x 2 horas
170º C x 1’5 horas
180º C x 30 minutos

7. c) Radiaciones
Se utilizan con elementos que no soportan el calor y la
humedad (jeringas, catéteres, materiales médicos, de plástico
y de origen biológico: medicamentos, vacunas, antibióticos,
alimentos).
Ionizantes
• Rayos X y Gamma, y los radiosótopos Co60 y Cs137
• Efectos letales y mutagénicos.
• Muy penetrantes
No ionizantes.
• Rayos UV
• Cambios en el ARN o en las proteínas
• Poco penetrantes
Desventaja: medidas de seguridad y costo.

8. d) Óxido de etileno (Gas a temperatura y presión normales)
•Actúa eficazmente frente a todos los microorganismos.
•Capaz de esterilizar a baja temperatura pero con tiempos
prolongados de exposición.
•Esterilización de objetos que pueden ser dañados por el
calor o la humedad.
4 horas a 58º C con 40% de humedad.
Si se utiliza a temperatura ambiente debe actuar 12 hs.

9. e) Formaldehído
Se utiliza al 2%.
Tiene efectos tóxicos e irritantes (en la mucosa respiratoria y
en el medio ambiente).
Requiere aireación pues los materiales absorben
formaldehído, especialmente los polímeros plásticos.
f) Tyndalización (calentamiento intermitente)
Calentar 80º-100º C x 30 min., luego incubar el medio 24 hs a
35º C.
Volver a repetir este proceso durante 3-5 días sucesivos.
Empleado para líquidos que no resisten temperaturas altas .
Reemplazada por la filtración de membrana.

11. DESINFECCIÓN
Procedimiento químico o físico capaz de destruir los
gérmenes, no esporas, productores de enfermedades.
Desinfectantes: sustancias que destruyen las formas
vegetativas o en crecimiento de los microorganismos,
eliminándolos por completo de los objetos inanimados.
Inmersión.
Loción y humedecimiento.
Pulverización.
Fumigación y vaporización.

12. Métodos
1. Calor: ebullición (hervir agua u otro medio de cultivo
líquido a 100º C).
Destruye las formas vegetativas de los microorganismos.
Puede aplicarse a alimentos y a instrumentos delicados que
no soportan el calor intenso.
- ebullición: 100ºC x 10/30 min
- pasteurización: para eliminar microorganismos patógenos
baja: 30’ a 63 ºC
alta: 15’ a 72º-75 ºC
2. Radiaciones ultravioleta: lámparas germicidas (acción
bactericida y viricida).

13. 4. Filtración del aire y flujo laminar.
La filtración del aire mediante mascarilla o tapando los tubos
de cultivo con algodón graso o utilizando filtros de HEPA
acoplados al aire acondicionado. El flujo laminar hace pasar el
aire en forma vertical, horizontal u oblicua y se utilizan junto
a los filtros HEPA, en quirófanos y zonas de pacientes con alto
riesgo de infección para mantener una zona libre de
microorganismos.

14. 5. GLUTARALDEHÍDO.
A pesar de su elevada toxicidad, sigue siendo el producto de
referencia en desinfección de alto nivel.
-Se utiliza al 2% en solución acuosa durante + 20’ a una tª >
20ºC.
- Se utiliza para objetos de plástico e instrumentos de cirugía
y tejidos.

15. 6. Desinfección química.
Se denominan germicidas los productos que actúan
tanto in vivo como sobre material inerte y se reserva el
término desinfectante para los productos que sólo actúan
sobre material inerte.
Desinfectante: fungicida, viricida, bactericida.
Se debe que elegir el mejor o mejores según el horizonte de
eficacia, inocuidad y bajo coste.

16. Antiséptico: Agente germicida usado sobre la piel y tejido
vivo para inhibir o eliminar los microorganismos.
1. OXIDANTES:
Derivados clorados. Hipoclorito de sodio, cloraminas y
ácido hipocloroso. Son irritantes de piel y mucosas y existe
una tendencia a sustituirlo por otros productos.
Povidona Yodada: Compuesto de yodo soluble en agua
Ampliamente aceptada para una gran variedad de
aplicaciones preventivas (solución jabonosa para lavado
de manos y baño prequirúrgico) y terapéuticas (curación
de heridas).

17. 2. ALCOHOLES.
• Etílico o isopropílico (70%).
• Desinfección y antisepsia (con 2 minutos de contacto
mueren casi el 90% de los microorganismos cutáneos).
• Efecto rápido y casi sin efectos adversos.

18. 3. CLORHEXIDINA 2-4%
Reduce la flora microbiana a los 15”.
Efecto residual de 6 horas.
No se inactiva en presencia de materia orgánica.
Tóxico para oídos y ojos.
4. PERÓXIDO DE HIDRÓGENO.
Se utiliza al 3-6%. Para antisepsia de heridas y desinfección
(dispositivos médico-quirúrgicos y lentes de contacto
blandos).

19. NIVEL DE DESINFECCIÓN/ESTERILIZACIÓN
Nivel crítico: se emplea para aquellos instrumentos que son
introducidos en el torrente sanguíneo o en zonas estériles del
cuerpo (intervenciones quirúrgicas, cateterismos cardiacos,
implantes, etc.). Esterilización, si es posible con autoclave de
vapor. Si termosensible: formaldehído, glutaraldehído…
Nivel semicrítico: los instrumentos están en contacto con
mucosa intacta: tubo endotraqueal, laringoscopios,... Se debe
realizar una desinfección de alto nivel con Glutaraldehído
alcalino al 2%.
No semicrítico: los instrumentos están en contacto con piel
intacta. Se debe realizar una desinfección de medio o bajo
nivel con Povidona Yodada o Clorhexidina.

20. SANEAMIENTO
El saneamiento es el control y regulación de aquellos
factores ambientales que pueden afectar la salud, evitando
así la enfermedad e incrementando el bienestar.
Medidas eficaces de lucha evitan la propagación de
enfermedades transmisibles por insectos y roedores:
• mosquitos (paludismo, fiebre amarilla...),
• pulgas (peste),
• piojos (tifus),
• garrapatas,
• moscas y
• cucarachas.
• roedores (portadores de enfermedades; sus parásitos).

21. Microscopía

24. Descubierta por
Hans Christian
Gram.
Usada con
frecuencia para
examen
microscópico directo
de muestras y
subcultivos.

25. Gram positiva

26. Gram negativa

27. Acidoresistentes
Las micobacterias están recubiertas por un grueso
material céreo que resiste la tinción, sin embargo una
vez teñidas las células bacterianas resisten la
decoloración con solventes orgánicos fuertes como
alcohol ácido. Por ese motivo, estas bacterias se
conocen como acidorresistentes, fenómeno descubierto
por Ziehl y Neelsen en 1882.