Este documento describe diferentes pruebas rápidas para el diagnóstico de tuberculosis y tuberculosis multidrogorresistente, incluyendo el método Griess o de la nitrato reductasa, el método Genexpert o PCR en tiempo real, y el método ADA o adenosin deaminasa. Cada método tiene diferentes condiciones de muestra, tiempos de respuesta, y usos para el diagnóstico o detección de resistencia a medicamentos.

1. NORMATIVA NACIONAL PARA EL
USO DE PRUEBAS RAPIDAS PARA
EL DX DE TB Y TBMDR

2. TUBERCULOSIS MULTIDROGORESISTENTE
(TB MDR)
lLa OMS define a la TB MDR como la resistencia
simultanea por lo menos a isoniacida y rifampicina
lLa TB MDR es una forma emergente de la
enfermedad que es mas difícil de tratar y curar
lEl tratamiento es mas largo (aproximadamente 18 a
24 meses). El tratamiento es con medicamentos de
segunda línea.

3. METODO GRIESS O DE LA NITRATO
REDUCTASA
Es una prueba rápida de tamisaje
para la detección de Resistencia a la
isoniacida y a la rifampicina en muestras
respiratorias que tienen baciloscopia
positiva igual o mayor a (+), pues la
prueba tiene valor solo en cultivos con
crecimiento activo

4. METODO GRIESS O
DE LA NITRATO REDUCTASA
FUNDAMENTO
El método Griess se basa en la
determinación de la actividad enzimática de la
bacteria M. Tuberculosis, que en cultivos de
crecimiento activo reduce el Nitrato a Nitrito
que es detectado al incorporar el reactivo de
Griess dando como resultado una reacción
colorimétrica.

5. METODO DEL GRIESS O NITRATO
REDUCTASA
Este método se efectúa solo en muestras
pulmonares de pacientes que tienen baciloscopia
positiva = o mayor a (+) y que son:
lPacientes contactos de MDR o de DR
lAntes tratados: abandono recuperado y recaída
lFracasos al esquema 1 y 2 ( además del Griess se harán
pruebas de sensibilidad.
lControles de tratamiento positivos a partir del segundo
mes.

6. METODO DEL GRIESS O NITRATO
REDUCTASA
CONDICIONES DE LA MUESTRA
lTodas las muestras de esputo deberán ser recolectadas en recipientes
plásticos de boca ancha y tapa rosca suministrados por el PCT
lTodas las muestras de esputo que tengan como resultado baciloscopia
positiva con una carga bacteriana igual o mayor a BK (1+ ) pueden ser
analizadas mediante este método.
lLa cantidad mínima de muestra requerida es de 3 ml (3-5 ml de
preferencia).
lLa muestra debe ser procesada por el método Griess inmediatamente.
lNo deberá mantenerse sin refrigerar por más de 4 horas.
lEn caso de lugares geográficamente alejados deberá mantenerse la
muestra en refrigeración y ser enviada al laboratorio dentro de las 72
horas (3 días) de haber sido recolectada

7. METODO DEL GRIESS O NITRATO
REDUCTASA
TIEMPO DE RESPUESTA: 14 a 21 días

8. METODO DEL GENEXPERT
O PCR EN TIEMPO REAL
Es una prueba semicuantitativa, integrada que se utiliza para:
1)La detección de compuestos de ADN de Mycobacterium Tuberculosis
en muestras de esputo.
1)La detección de mutaciones asociadas a la resistencia a la
rifampicina del gen rpoB en muestras de pacientes susceptibles de
presentar resistencia a la rifampicina

9. METODO DEL GENEXPERT
O PCR EN TIEMPO REAL
Se efectúa en:
lEl diagnóstico inicial de pacientes sospechosos de tener TBMDR ó TB
asociada a VIH con baciloscopia (BK) positiva o negativa
lContactos MDR(multidrogoresistente) y DR(Drogoresistente)
lBK (–) con alta sospecha de TB
lAntes tratados: abandonos recuperados, recaídas Esquema 1 y 2 ,
Trabajadores de salud
lDiabéticos
lPersonas privadas de libertad con síntomas compatibles con TB
lDiagnóstico de TB infantil
lInmunodeprimidos
lNota.- En estas categorías se debe solicitar una segunda muestra en
caso de salir negativa la primera
lEn la categoría de Fracasos del Esquema 1 y 2 es recomendable
realizar una prueba de Griess directo y proporciones no se recomienda
el uso de la técnica PCR Tiempo Real GenExpert MTB/RIF.

10. METODO DEL GENEXPERT
O PCR EN TIEMPO REAL
Condiciones de la muestra:
Este método solo se utiliza para el diagnostico en muestras
pulmonares.
lSe requiere de 1 a 3 ml de esputo por cada muestra.
lLas muestras deben mantenerse a 2 – 8 °C hasta que sea posible
procesarlas, incluso durante su transporte hasta el laboratorio
lLas Muestras con resultados positivos se procesaran una sola
muestra
lLas muestras con resultados negativos, invalido o error se solicitaran y
procesaran dos muestras

11. METODO DEL GENEXPERT
O PCR EN TIEMPO REAL
Tiempo de respuesta: 48 horas

12. ADA O ADENOSINDEAMINASA
METODO COLORIMETRICO DE GIUSTI
Es una técnica indirecta que contribuye a confirmar el
Dx clínico presuntivo.
Utilizada, especialmente en Liquido Pleural, su
principal beneficio consiste en separar el Dx de derrame
Pleural tuberculoso del neoplasico.
Se puede también determinar en otros líquidos
biológicos
tiempo de respuesta: una semana

13. ADA O ADENOSINDEAMINASA
Condiciones de la muestra:
lEn la toma de los líquidos biológicos: Pleural, Pericárdico,
Peritoneal y Sinovial, se utiliza como anticoagulante
oxalato de sodio, citrato de sodio a una concentración de
1mg/ml. La heparina como anticoagulante produce
inhibición enzimática.
lEstable 3 días a 4°C pero es preferible el envío inmediato
al laboratorio.
lEmbalaje: doble envase, con frigos, rotulado y con la
solicitud llena aparte