2. Es un conjunto de Técnicas basadas
en el principio de retención
selectiva, cuyo objetivo es separar
los distintos componentes de una
mezcla, permitiendo identificar y
determinar las cantidades de
dichos componentes

3. Fase
Móvil
Fase
Estacionaria
Consiste en un liquido o gas
que es arrastrado a través de
la fase estacionaria
Consiste en un solido o un liquido
fijado a un solido por donde el
cual pasa la fase móvil

4. Plana En Columna
En papel En capa fina Por Afinidad
Por Exclusión
Molecular
Intercambio
Iónico

5. La fase estacionaria se
representa por un
papel de filtro y la
móvil por un
disolvente.
En Papel
Análisis cualitativos

6. En Capa
Fina
Una fase móvil
(normalmente, un disolvente)
y a una fase estacionaria (la
llamada capa fina, que puede
ser papel o gel de sílice)
Separar Componentes Puros

7. Depósito
Proteína
Simple (Fase
Móvil)
Matriz porosa
sólida (Fase
Estacionaria)
Efluido
Soporte
Poroso

8. Cromatografía
de Exclusión
Molecular
La cromatografía de filtración
molecular es un método de
cromatografía en columna por el
cual las moléculas se separan en
solución según su peso
molecular.
Separa proteínas según su
tamaño.
La fase sólida consiste en
pequeñas perlas que contienen unos
poros o cavidades de tamaño
calibrado.
Las proteínas de mayor tamaño no
pueden entrar en las cavidades.
Las proteínas mas pequeñas
penetran en las cavidades.

9. Representación de un lecho comatográfico formado por micropartículas porosas como las
empleadas en cromatografía de exclusión molecular.
Fibras de la matriz
polimérica
Partículas más pequeñas
Partículas más grandes
Volumen de intersticio
entre partículas
Espacio interno
entre partículas

11. Cromatografía de
Intercambio Iónico
En este tipo de Cromatografía la
F.E tiene grupos cargados que
interaccionan
electroestáticamente con iones
de signo contrario de la fase móvil.

12. Partículas poliméricas con grupos
funcionales cargados negativamente
Se añade la mezcla de proteínas a la columna
que contiene intercambiadores de cationes
Las proteínas se desplazan a través de la columna a velocidades determinadas por su
carga neta al pH que se esta utilizando.
En el caso de los
intercambiadores
catiónicos, las proteínas con
carga neta negativa se
desplazan más rápido y
eluyen antes.

13. Cromatografía
por Afinidad
La cromatografía de
afinidad permite la
separación de mezclas
proteicas por su afinidad o
capacidad de unión a un
determinado ligando
ANTICUERPOS
COFACTORES
INHIBIDORES
ENZIMATICOS
LECTINAS
LIGANDO DE AFINIDAD

14. LIGANDO DE AFINIDAD
MOLÉCULAS BIOQUÍMICAS RESPONSABLES DE LA RETENCION ESPECIFICA
DE LOS SOLUTOS- ANALITICOS ,( PROTEINAS).
NATURALEZA ACCION
acromoléculas biológicas o
moléculas de bajo peso
molecular Biomolèculas pequeñas o
macromoléculas bioquímicas
Ligando específicos Ligando
generales
Anticuerpo
Lectinas y
nucleótidos

17. Características
de la
Cromatografía
de Afinidad
CAMPO DE APLICACIÓN RESTRINGIDO
SEPARACIÓN DE UN SOLUTO ANALÍTICO
( PROTEÍNA)
ALTA SELECTIVIDAD EN EL MECANISMO DE RETENCIÓN