La cromatografía es un método de separación de mezclas complejas que utiliza una fase móvil y una fase estacionaria. Existen varias técnicas cromatográficas como la cromatografía en papel, en capa fina, de gases, líquidos y de fluidos supercríticos. Cada técnica se distingue por la naturaleza de las fases móvil y estacionaria utilizadas.

1. Equipo no. 5
E.T.I.M.B.L.

2. Cromatografía
 Cromatografía es el método físico de
separación para la caracterización de
mezclas complejas.
 Su objetivo es separar los distintos
componentes de una mezcla.
 Dentro de las técnicas cromatográficas
existe una fase móvil y una fase
estacionaria.
 Los componentes de la sustancia
interactúan entre si hasta obtener la
separación de éstos mediante la fase
estacionaria.

3. Clasificación de cromatografía
Papel
Plana
Capa fina
Cromatografía
Gases
Columna Líquidos
Fluidos
supercríticos

4. Características de las técnicas
cromatográficas
Tipos Fase móvil Fase estacionaria
Líquido ( moléculas de agua
Cromatografía en papel Líquido
contenidas en la celulosa del papel )
Cromatografía en capa fina Líquido Sólido
Cromatografía de gases Gas Sólido o líquido
Cromatografía líquida Sólido o líquido
Líquido (polar)
en fase inversa (menos polar)
Cromatografía líquida Líquido Sólido o líquido
en fase normal (menos polar) (polar)
Cromatografía líquida
Líquido (polar) Sólido
de intercambio iónico
Cromatografía líquida
Líquido Sólido
de exclusión
Cromatografía líquida
Líquido Sólido
de absorción
Cromatografía de
Líquido Sólido
fluidos supercríticos

5. Cromatografía en papel
 La cromatografía en papel es una técnica
ampliamente utilizada en el laboratorio
debido a su bajo costo y a la rapidez del
análisis.
 Se realiza colocando el pimento sobre una
hoja de papel filtro y posteriormente éste se
coloca en un disolvente (generalmente un
disolvente fácil de evaporar).
 El resultado del análisis será una separación
de colores donde se puede identificar los
componentes de la sustancia, en caso de que
esto no ocurra deben utilizarse técnicas de
revelado.

6. Cromatografía en capa fina
 La técnica es similar a la
cromatografía en papel, a
excepción que en este caso el
análisis se realizará en una
placa de plástic0, aluminio o
vidrio cubierta de una capa de
sustancia absorbente como
alúmina o gel de sílice.

7. Cromatografía de líquidos
 Permite separar físicamente los componentes de
muestras líquidas mediante el uso de una fase líquida y
una fase estacionaria
 La fase móvil generalmente es un líquido y la fase
estacionaria un sólido como alúmina o gel de sílice.
 Según técnicas clásicas se realiza en una columna.

8. Métodos de cromatografía líquida
Método Abreviatura Mecanismo predominante
Líquido, sólido o Adsorción sobre la
LSC
de adsorción superficie
Reparto entre fases
Líquido LLC líquidas, una móvil y la
otra estacionaria.
Reparto y / o adsorción
Fase enlazada BPC entre las fases móvil y
enlazada.
Uso de la estructura de
ligantes inmovilizados
Afinidad -- para unir
bioselectivamente la
proteína deseada.

9. Cromatografía de gases
 Para esta técnica se
utiliza un cromatógrafo
de gases el cual volatiliza
e inyecta los gases dentro
de una columna.
 La fase móvil esta
formada por gas inerte.
 Existen dos tipos: De gas
sólido y de gas líquido.

10. Cromatografía de fluidos
supercríticos
 Esta técnica presenta los procedimientos de la
cromatografía de gases y de la cromatografía de líquidos.
 Se hace uso de un horno termostático y un restrictor.
 Como fase móvil puede utilizarse el dióxido de
carbono, exano, pentano, etc.
 Generalmente es utilizada para analizar
drogas, alimentos, herbicidas, polímeros, etc.