El documento describe diferentes métodos diagnósticos para la tuberculosis latente y activa, tanto convencionales como nuevos. Para el diagnóstico de TB latente discute la prueba cutánea de tuberculina, los ensayos de liberación de interferón gamma y un estudio comparativo entre ambos métodos. Para el diagnóstico de TB activa, cubre técnicas de baciloscopía, cultivo, identificación del bacilo, biología molecular y otras no microbiológicas. Resalta que el cultivo y baciloscopía siguen siendo

1. Métodos Diagnósticos en
Tuberculosis: lo convencional y lo
nuevo

2. Sumario
1.- Diagnóstico de TB latente:
◦ Prueba de Tuberculina (PPD)
◦ Detección de Interferón Gamma (IGRA)
◦ Estudio Comparativo de ambos (2016)
2.-Métodos Diagnóstico de TB activa:
◦ El Diagnóstico Microbiológico:
◦ Nuevos métodos Dx:
◦ Técnicas No convencionales de Baciloscopía: Estudio comparativo de muestra por lavado gástrico Vs Esputo inducido
◦ Nuevos métodos de cultivo de micobacterias.
◦ Nuevas técnicas de Identificación del bacilo.
◦ Técnicas de Biología Molecular
◦ Técnicas de amplificación genética
◦ Nuevos métodos de antibiograma
◦ Diagnostico Serológico de TB
◦ Otras técnicas no microbiológicas

3. “La meta de la OMS es que con un mejor
diagnóstico se pueda mejorar el tratamiento y la
sobrevida de la enfermedad”
Fuente: Guidance for national tuberculosis programmes on the management of tuberculosis in children

4. Fuente: Guidance for national tuberculosis programmes on the management of tuberculosis in children

5. La estrategia de control más importante para la TB, es la detección temprana y el apropiado tratamiento de casos
infecciosos. La tasa de detección de casos (TDC) global es de alrededor el 64%, lo cual implica que alrededor del 36% de
casos de TB incidente no son detectados. Esto deja una brecha de aproximadamente 3.3 millones de personas con TB
alrededor del mundo que se “perdieron”, tanto porque no fueron diagnosticadas o porque fueron diagnosticadas, pero
esto no se reportó. Para las Américas, la TDC es alrededor del 79%, lo cual significa que anualmente 33,000 pacientes
con TB no son detectados o reportados.
Aunque existan técnicas nuevas y útiles para tener un resultado rápido, enfatizamos en que el diagnóstico y seguimiento
basado en el cultivo, es todavía el método de referencia para la tuberculosis y que estas nuevas técnicas moleculares no
pueden reemplazarlo, aunque proveen información preliminar y mejoran el manejo del paciente.
Fuente: Rommy Teran1, Jacobus H. de Waard eJIFCC2015Vol26No4pp310-325
Introducción

6. Métodos
Diagnostico de Tbc
Latente
Prueba Cutánea
de Tuberculina
PPD
Ensayos de
liberación de
IFNy (YGRA)
Ausencia de síntomas
Ausencia de signos radiológicos que impliquen
enfermedad activa
S: 77% E: 88.7-97%
TB7.7
12- 18 hrs
48 – 72 Hrs
+ -
Indeterminada
S: 70%
E: 99%
S: 90%
E: 93-98%

7. Falsos Positivos
PPD YGRA
Poblaciones vacunadas BCG y o expuestas a
micobaterias no tuberculosas
Con micobacterias: Kansasii, M. Marinum y M.
Szulgai
Falsos Negativos
Engermedades con Tbc Grave Inmunocomprometidas
Malnutrición
Inmunocomprometidos
Una limitante de la tuberculina y de los IGRA es que no pueden definir verdaderamente la existencia de tuberculosis
latente, ya que en realidad son un reflejo de la memoria inmunológica de quienes hacen la respuesta y no es posible
establecer con certeza con sus resultados si persisten bacilos vivos o no en el huésped.
La utilidad de cada una de estas dos pruebas depende de la prevalencia y la carga de la tuberculosis, así como el
estado de la vacunación con BCG.

8. Un TST debe ser considerado positivo:
- en niños que están inmunodeprimidos (incluidos los niños y niñas Niños con malnutrición grave, es decir, aquellos con
evidencia clínica de marasmo o Kwashiorkor):> 5 mm de diámetro de induración;
- en todos los demás niños (ya sea que hayan recibido una vacuna BCG o no):> 10 Mm de diámetro de induración.
Puede haber falsos positivos o falsos negativos resultados TST; Posibles causas de estos
OMS

9. Fuente: Hanan H. Balkhy , 1, 2, 3 Kamel El Beltagy Ann Thorac Med . 2016 Jul-Sep

10. Objetivo: Ygra QFT-TB Vs PPD en Arabia Saudita
Método: Estudio Transversal entre 2010 – 2013,
selección al azar atendido en centros de
atención primaria en 3 provincias A. S
Inmunodeprimidos
Antes TB o actual ILT
Tto
Anti
TB
Selección
YGRA
PPD
Primera visita
Excluyeron
<5 a
1369
Participantes
Fuente: Hanan H. Balkhy , 1, 2, 3 Kamel El Beltagy Ann Thorac Med . 2016 Jul-Sep

11. Fuente: Hanan H. Balkhy , 1, 2, 3 Kamel El Beltagy Ann Thorac Med . 2016 Jul-Sep
1. Características sociodemográficas de los participantes del estudio

12. Fig. 1. Los resultados de la prueba de la tuberculina y QuantiFERON-TB Gold en el tubo entre 1369 participantes del estudio
en Arabia Saudí
Fuente: Hanan H. Balkhy , 1, 2, 3 Kamel El Beltagy Ann Thorac Med . 2016 Jul-Sep

13. Fig. 2Acuerdo entre los resultados de la prueba de la tuberculina y QuantiFERON TB Gold en el tubo entre 1369
participantes en el estudio se inscribió en Arabia Saudí
Fuente: Hanan H. Balkhy , 1, 2, 3 Kamel El Beltagy Ann Thorac Med . 2016 Jul-Sep

14. La concordancia entre prueba de la tuberculina y QuantiFERON TB Gold en el tubo por las características sociodemográficas entre los
1369 participantes del estudio en Arabia Saudí
Fuente: Hanan H. Balkhy , 1, 2, 3 Kamel El Beltagy Ann Thorac Med . 2016 Jul-Sep

15. Fuente: Hanan H. Balkhy , 1, 2, 3 Kamel El Beltagy Ann Thorac Med . 2016 Jul-Sep
Discusión:
• En la comparación de QFT-GIT a TST en la detección de la ITL, en una población general en Arabia Saudita, encontramos un acuerdo de
88,8% para ambos concordancia positiva y negativa. Estudios a nivel mundial muestran una feria a la buena concordancia de 65,4% a 92,5%
entre los trabajadores de la salud, mientras que otros reportaron una tasa de concordancia mucho menor entre los trabajadores de la salud
(PS).
• En el estudio actual, sin ajustar kappa probar la concordancia de los resultados de las pruebas de TST QTF-G y (considerando PT positiva en
≥10 ml tamaño de la induración) fue de 0,33, que se considera acuerdo justo. Sin embargo, creemos que el acuerdo en la población
estudiada se reduce considerablemente por la relativamente baja prevalencia de la enfermedad (como se indica por un alto índice de
prevalencia de 0,82).Por lo tanto, al ajustar por la prevalencia, kappa ajustado se convirtió en 0,78, que se considera un acuerdo sustancial.
• A pesar del acuerdo general de 88,8% para ambos concordancia positiva y negativa, es preocupante que ambas pruebas son positivas
estaban en sólo el 3,6% (49/1369) sujetos mientras que ninguna de las pruebas que sean positivas fue del 14,8% (202/1369). El
entendimiento de que ninguna de las pruebas a cabo por sí solo para el cribado de la población para la ITL se perderá el 5,5%, (75/1369) y el
5,7%, (78/1368) de TST y QFT-GIT, respectivamente, es motivo de preocupación.
• En Arabia Saudita, como en muchos países de todo el mundo, la vacuna BCG se administra al nacer. Sin embargo, se encontró que la vacuna
BCG puede producir un resultado positivo TST temporal que disminuye con la edad. [ 28 , 29 , 30 ] La sincronización entre la vacunación y
TST que llevan a esa TST falsos positivos no se ha determinado claramente. Por esa razón, se excluyeron del estudio en nuestros niños
menores de 5 años. En la mano, mientras que la prueba QFT-GIT no se espera que sea afectada por la vacuna BCG, no hay datos claros
sobre la eficacia de las pruebas de GFT-GIT para el diagnóstico de infección latente en los niños.
• Hasta la fecha, el uso de cualquiera de las pruebas para el diagnóstico de infección latente debe ser de acuerdo con las directrices
nacionales, si están disponibles, y la opinión de expertos.
• Ambos test tienen un buen acuerdo, es decir uno no es mejor que el otro.

16. Conclusiones:
El acuerdo general de TST y QFT-GIT para la detección de infección latente entre la población general Arabia era del
88,8%. QFT-GIT es probablemente comparable a la TST para detectar infección latente en un país de la carga de tuberculosis
intermedio con alta cobertura de vacunación en Guerin bacilo de Calmette nacimiento.
Se necesitan más estudios prospectivos para comparar la capacidad de ambas pruebas para predecir la enfermedad de TB.

17. Los IGRA miden la respuesta in vitro a antígenos específicos de M. tuberculosis. Mientras que estos los ensayos son más específicos
que el TST (el BCG no causa un resultado falso positivo), no se ha encontrado que tenga un mejor rendimiento que el TST. La
evidencia actual para el uso de IGRA en niños de los entornos endémicos de tuberculosis en el proceso de preparación de esta guía
: es limitada, de baja calidad y conflictiva, y casi no hay evidencia de estudios de lactantes y niños pequeños.
Los IGRA no deben utilizarse para el diagnóstico de la enfermedad de TB. Un IGRA positivo, como un positivo TST, sólo indica
infección y por lo tanto no confirma un diagnóstico de enfermedad de TB. Igualmente, un Negativo IGRA, como un TST negativo, no
descarta un diagnóstico de TB. Por otra parte, IGRAs Son caros y técnicamente difíciles de implementar en entornos de recursos
limitados, y Los resultados indeterminados son comunes, especialmente en niños pequeños.
OMS
Recomendación OMS:
Los ensayos de liberación de interferón-gamma (IGRA) no deben sustituir a la tuberculina (TST) en países de bajos y
medianos ingresos para el diagnóstico de Infección de la tuberculosis en niños o para el diagnóstico de los niños
(independientemente Del estado de VIH) sospechosos de enfermedad de TB en estos entornos

18. Recomendación:
Los serodiagnósticos comerciales no deben utilizarse en niños sospechosos de Pulmonar o extrapulmonar,
independientemente de su estado serológico.
Recomendación 7
Se debe ofrecer una prueba de VIH de rutina a todos los pacientes, incluidos TB presuntiva y diagnosticada

19. Métodos diagnóstico de TB activa
• El Diagnóstico Microbiológico:
• Nuevos métodos Dx:
• Técnicas No convencionales de Baciloscopía.
• Nuevos métodos de cultivo de micobacterias.
• Nuevas técnicas de Identificación del bacilo.
• Técnicas de Biología Molecular
• Técnicas de amplificación genética
• Nuevos métodos de antibiograma
• Diagnostico Serológico de TB
• Otras técnicas no microbiológicas

20. Los laboratorios tienen un rol central en el diagnóstico de TB, es así que reforzar su desempeño y capacidad,
es prioritario para el control de esta enfermedad. Sin embargo, el diagnóstico de TB en la mayoría de
laboratorios se hace por los llamados métodos convencionales y la mayoría de casos de TB son
diagnosticados por baciloscopía.
Estos dos métodos de laboratorio, la baciloscopía y el cultivo, son todavía los “gold standars” para el
diagnóstico de TB, siendo el cultivo el método más sensible.

21. 2.2. -El diagnóstico Microbiológico : El diagnóstico actual se basa en las mismas técnicas bacteriológicas que
descubrió Koch hace más de 100 años
La prueba de ziehl Neelsen o tinción Acido Alcohol Resiste
CARBOLFUCSINA ACIDO ALCOHOL AZUL DE METILENO
Micobacterias
Micobacterias
Micobacterias
Micobacterias
Presunción Diagnóstica
+ +
Ventaja:
Puede ser efectuada en casi
cualquier lugar
Ventaja:
Hallar al bacilo AAR en áreas de alta
endemicidad, es Confirmatorio de la
presencia de TB

22. Los múltiples estudios que se han realizado, han demostrado que la sensibilidad aumenta, manteniendo la
especificidad.
Bacilos de copias seriadas Se concentra o sedimenta la muestra Uso de microscopio fluorescente
Limitaciones de la baciloscopía:
-Se requieren al menos 3 baciloscopías seriadas para mejorar el valor predictivo positivo. La segunda baciloscopía capta
7 – 13 % de los pacientes y la tercera 4% más de los pacientes con TB lográndose en esto 85% de detección del paciente
TB Bacilífero.
- La enfermedad debe haber avanzado sustancialmente para permitir que la persona tenga concentraciones suficientes
para que la tinción sea +
10 Elevado al cubo bacilos x cm 3
Cultivo: es m{as sensible (10-100 bacilos x cm3 de esputo) cuya
limitante es que por medios solidos requiere 6 – 8 semanas

23. Auramina y Rodamina: es una técnica no convencional de baciloscopía, mediante tinción de Fluorocromos, esta mantiene
los principios de AAR. Se aprecia la presencia de Micobacterias más rápida y a < aumento en el microscopio. Equipo es más
costoso y requiere corriente eléctrica permanente.
La Organización Mundial de la Salud (OMS) ha evaluado la eficacia de la microscopía LED, y los resultados mostraron que el diagnóstico con este
microscopio fue más sensible (alrededor del 10%) que con el microscopio óptico. Basándose en estas consideraciones, la OMS recomienda que
la microscopía convencional y la fluorescente sean reemplazadas por la microscopia LED.

24. La confirmación bacteriológica es especialmente importante para los niños que tienen:
- sospecha de tuberculosis resistente a los medicamentos
- Infección por VIH
- casos complicados o graves de enfermedad de TB
- un diagnóstico incierto
- han sido tratadas previamente.
Obsérvese que la TB en niños y adolescentes mayores es a menudo similar a la enfermedad de tipo adulto (y
Por lo que no es paucibacilar). En este grupo de edad, el esputo es a menudo fácilmente disponible y es a
menudo AFB-positivo.
Prueba del VIH
Se debe ofrecer una prueba de VIH de rutina a todos los pacientes, incluidos los Y la TB diagnosticada
En niños que viven con el VIH:
Investigaciones relevantes para la sospecha de TB pulmonar y sospecha de extrapulmonar
tuberculosis
Sospecha de tuberculosis pulmona
OMS
Rara vez se han evaluado o validado sistemas contra un "patrón oro"; Cuando ellos Han sido evaluados, han tenido un desempeño pobre y variable. Realizan
Mal en los niños sospechosos de tuberculosis pulmonar (la forma más común) y en los niños. Que también son VIH-positivos. En este punto, por lo tanto, la OMS
no puede dar una recomendación Con respecto al uso de sistemas de puntuación para diagnosticar la TB

25. Fuente: DR Sangita De1 ; DR Abhay Charan Pal Volume 15, Issue 11 Ver. VII (November. 2016)

26. Lavado Gástrico Esputo Inducido
NBZ c/
ClNa 3%
Recolecta secreciones
respiratorias que se
ingiere por las noche
Recolecta la
secreciones que sale
de la via aérea Inferior
Este estudio se realizó con la intención de determinar el papel diagnóstico del lavado gástrico y
El esputo inducido en un ambiente con alta incidencia de tuberculosis
Evaluar el papel
Diagnóstico de……
….Y comparar
Estudio Prospectivo (06/16 – 10/16)
INDIA
Fuente: DR Sangita De1 ; DR Abhay Charan Pal Volume 15, Issue 11 Ver. VII (November. 2016)

27. a. Características radiológicas anormales sugestivas de enfermedad tuberculosa como la
adenopatía intratorácica, Consodilación y / o colapso, moteado miliar, lesiones
cavitarias y / o neumonía sin resolver por más Menos de tres semanas.
b. Prueba de tuberculina positiva (TST) que se toma como> induración de 10 mm a 72
horas después de la UIT de PPD Inyectado intradérmicamente; Y / o
c. Historial positivo de contacto con el paciente tuberculoso.
Criterios de Inclusión
Selección de 50 muestras, concentradas por método petroffs
Método
El lavado gástrico se realizó
temprano en la mañana en
todos los niños después de
un ayuno nocturno.
Veinte (20) ml de la solución
salina normal se introdujo a
través de una SNG, se dejó
durante 3 minutos y después
se aspiró.
Bicarbonato de Sodio
La técnica de Zeihl-Neelson y frotis de tinción de auraminerhodamina
Cinco (5) ml de estéril Salina al 3% se nebulizó durante 15
minutos a una velocidad de flujo de 5 litros / minuto.
Antes de que los niños fueron pre-tratados con salbutamol
nebulizado (0,03 ml / kg), máximo de 1 ml para prevenir el
broncoespasmo inducido por hipertonía salina.
Después de NBZ se hizo percusión en la parte anterior y
posterior de la pared torácica para inducir expectoración.
Si la expectoración espontánea no se logró por esto, el
esputo se obtuvo por aspirado nasofaríngeo utilizando un
extractor de mucosas estéril de tamaño de catéter 6 ó 7
Después y antes del
almuerzo
Fuente: DR Sangita De1 ; DR Abhay Charan Pal Volume 15, Issue 11 Ver. VII (November. 2016)

28. Fuente: DR Sangita De1 ; DR Abhay Charan Pal Volume 15, Issue 11 Ver. VII (November. 2016)

29. La Figura : muestra que en el presente estudio, de 50 niños reclutados, 8 casos (16%) fueron positivos para BFA en
el lavado gástrico (GL) y 6 casos (12%) resultaron positivos en el esputo inducido (IS).
Fuente: DR Sangita De1 ; DR Abhay Charan Pal Volume 15, Issue 11 Ver. VII (November. 2016)

30. • La eficacia del lavado gástrico y el esputo inducido como un método preferido para la recolección de muestras
bacteriológicas Diagnóstico de micobacterias tuberculosas. En Chi-cuadrado (X2 ), El valor salió a 0,39 y se encontró para
ser menor que el valor para la hipótesis nula. Por lo tanto, la hipótesis nula no pudo ser rechazada (p = 0,99).
• Por lo tanto, el lavado gástrico no demostró ser mejor que el esputo inducido para la detección de AFB. Más bien ambos
pueden considerarse complementarias entre sí.
Conclusión:
• A pesar de que la tuberculosis es una de las enfermedades más antiguas de la humanidad, Considerable controversia en
cuanto al diagnóstico y manejo. Hasta la fecha no hay un diagnóstico rápido y fácil

31. Fuente: Rev Med Hondur 2016; 74:93-101
Nuevos métodos Diagnósticos
En los últimos 15 años se han tratado de mejorar:
Sensibilidad
Especificidad Rapidez
Costos
Se ha tomado conciencia que para lograr la
eliminación es importante mejorar los
métodos Dx

32. Cultivos para detectar M. tuberculosis.
• Existen métodos sólidos basados en huevo (Lowenstein-jensen, Ogawa) y medios basados en agar (Middlebrook 7H10).
• Estos medios identifican las especies y se determina la sensibilidad antibiótica.
• Tienen una alta especificidad.
• La sensibilidad depende de la severidad de la enfermedad.
Una desventaja del cultivo en estos medios sólidos es el lento crecimiento de
la bacteria, que puede tomar al menos de 2 a 4 semanas o a veces más, antes de
que el cultivo dé positivo.

33. Son más rápidos y sensibles que el cultivo en medios sólidos
(Lowesten Jensen)
Dificultad para reconocer
Crecimientos mixtos de bacterias,
morfología y conteo de colonia
De utilidad en casos de
Retratamiento y > problema de
contaminación
Es más temprano
1 ss BK + 2 ss BK -
Promedio 4-5 días
Sensible: 60-80% CLJSensible: 70-95% Vs
Desventaja: Método laborioso
Costo alto (equipo, reactivos y
mantenimiento)
Uso de jeringas
Permiso para usar el 14 c
Justificado su uso en laboratorios
Regionales de referencia
El medio líquido consiste en caldo Middlebrook 7H9 suplementado
con 10% de OADC (ácido oleico, albúmina, dextrosa y catalasa) y, para
evitar la contaminación con otros microorganismos, se agrega PANTA
(una mezcla de antibióticos: polimixina, anfotericina B, ácido
nalidíxico, trimetoprim y azlocilina).

34. Falla en la identificación del bacilo
Aprobado como Gold estándar, mayor
sensibilidad, menos tiempo
Alto costo, personal capacitado
No radiomericos: MGITS (Tubo indicador de crecimiento de micobacterias, enriquecimiento OADC, mezcla de antibióticos
PANTA) no emplean radioisótopos. medio líquido Midlebrook 7H9. Desventaja, alto costo
Totalmente automatizado

35. Resultados: La metodología BD MGITTM TBc® realizada a partir de cultivos en medio sólido y líquido, presentó un grado de acuerdo excelente con un coeficiente
kappa de 0,84.
Conclusión: La técnica BD MGITTM TBc® realizada a partir de cultivos en medio sólido, para la identificación del complejo Mycobacterium tuberculosis, presenta
excelente concordancia, comparada con los resultados obtenidos en medio de cultivo líquido. El Laboratorio Nacional de Referencia recomienda el uso de esta
técnica para la identificación de especie en medio de cultivos sólidos.

36. En un estudio multicéntrico latinoamericano se compararon los medio de cultivo de Lowenstein–
Jensen y CD7H11; se encontró que la sensibilidad era más alta para este último (92,6%) que para
el L–J (84,7%), mientras que la tasa de contaminación era mayor para el primero (5,1%) que para
el segundo (3,0%). La mediana del tiempo necesario para detectar un cultivo positivo fue de 11,5
días para el CD7H11 y de 30,5 días para el L–J.
Fuente: Iatreia vol.21 no.3 Medellín July/Sept. 2008
“La OMS recomienda el uso del medio sólido convencional junto con el medio líquido para el aislamiento primario de
micobacterias. “

37. Fuente: Iatreia vol.21 no.3 Medellín July/Sept. 2008

38. HERRAMIENTAS BASADAS EN EL ADN PARA EL DIAGNÓSTICO DE TB :
Tests clásicos para la amplificación de ácidos nucleicos (NAATs, del inglés, Nucleic Acid Amplification Tests)
Arrojan resultados a las 3 – 6 hrs
Cada NAAT usa un método
diferente para amplificar regiones
específicas del ácido nucleico del
complejo Mycobacterium
tuberculosis.
Estos kits incluyen el GenProbe
Amplified M. tuberculosis Direct test
(AMTD), el Roche Amplicor MTB test, el
Cobas Amplicor test, el Abbott LCx test,
y el BD-ProbeTec (SDA) test
Ninguno de estos tests ha sido aprobado para la detección directa de M. tuberculosis de muestras extrapulmonares.
Aunque toda esta tecnología es rápida y ha demostrado excelente especificidad, su desempeño puede variar y todavía
su sensibilidad no iguala a la de los métodos basados en el cultivo, especialmente para muestras con baciloscopía
negativa.
existe la necesidad de mejorar la exactitud de los
NAATs, particularmente la sensibilidad y que
NAATs comerciales no pueden ser recomendados
para reemplazar el cultivo y la microscopía para el
diagnóstico de TB pulmonar

39. La amplificación isotérmica de ácidos nucleicos (LAMP, del inglés, Loop-Mediated Isothermal Amplification)
Esta tecnología amplifica un ADN diana bajo
condiciones isotérmicas (alrededor de 65°C) y está
diseñado para detectar visualmente ADN de
muestras clínicas, en menos de dos horas y con un
mínimo de instrumentación.
Un grupo experto de la OMS concuerda en que la tecnología LAMP tiene potencial para ser una
herramienta diagnóstica rápida de TB, pero que la evidencia disponible de este ensayo es
insuficiente para recomendarlo como prueba que sustituya a la microscopía tradicional.
Actualmente, en 14 sitios, la OMS conduce estudios independientes para probar el ensayo TB
LAMP, evaluando su factibilidad y costo-efectividad.

40. El Xpert MTB/RIF test para el diagnóstico de TB resistente a drogas
El Xpert MTB/RIF integra procesamiento del esputo, extracción de ADN y amplificación en un solo paso de preparación de la muestra. Este método
automatizado basado en cartuchos detecta directamente del esputo y en menos de dos horas, simultáneamente el complejo M. tuberculosis y la resistencia a
la rifampicina.
Una revisión sobre la precisión de este método
y que incluye 27 estudios, concluye que en
comparación con la microscopía, el Xpert®
MTB/RIF incrementa la detección de TB entre
casos confirmados por cultivo en un 23%.
Para la detección de resistencia a la
rifampicina, el Xpert® MTB/RIF
muestra una sensibilidad acumulada
de 95% y una especificidad
acumulada de 98%
La OMS recomendó en diciembre del
2010, el uso del Xpert® MTB/RIF y en
la actualidad, está promoviendo la
introducción global de esta
tecnología.

41. N Recomendación 1
Xpert MTB / RIF debe ser utilizado en lugar de la microscopía convencional y la cultura Como la prueba diagnóstica inicial
en niños sospechosos de tener TBMR o La tuberculosis asociada al VIH (Recomendación fuerte, muy baja calidad de la
evidencia)
Recomendación 2
Xpert MTB / RIF puede ser utilizado en lugar de la microscopía convencional y el cultivo
Como la prueba inicial en todos los niños sospechosos de tener TB
Comentarios para las recomendaciones 1 y 2:
a. Estas recomendaciones se aplican al uso de Xpert MTB / RIF en Especímenes de esputo no procesados.
segundo. Estas recomendaciones también se aplican al lavado gástrico ya los aspirados.
Niños sospechosos de tener TB pulmonar pero con un solo Xpert MTB / RIF negativo Resultado debe someterse a pruebas de
diagnóstico adicionales, y un niño con Se debe tratar la sospecha clínica de la tuberculosis, incluso si un resultado Xpert MTB / RIF
es Negativo o si la prueba no está disponible.

42. Xpert MTB / RIF para el diagnóstico de TB extrapulmonar en niños
N Recomendación 3
Xpert MTB / RIF puede usarse como una prueba de reemplazo para la práctica Microscopía convencional, cultivo y / o histopatología) para
el análisis de Muestras no respiratorias (ganglios linfáticos y otros tejidos) de niños Sospechosos de tener tuberculosis extrapulmonar
Recomendación 4
Xpert MTB / RIF debe usarse de preferencia a la microscopía convencional y Cultivo como la prueba diagnóstica inicial en el ensayo de
muestras de líquido cefalorraquídeo De niños sospechosos de tener meningitis TB
Comentarios para las recomendaciones 3 y 4:
a. Los niños sospechosos de tener TB extrapulmonar pero con un solo Xpert MTB / RIF-negativo debe someterse a nuevas pruebas de diagnóstico, y los que tienen Se debe tratar la alta sospecha
clínica de la tuberculosis, incluso si un resultado Xpert MTB / RIF es Negativo o si la prueba no está disponible.
b. Para los especímenes de LCR, Xpert MTB / RIF se debe utilizar preferentemente sobre cultivo si El volumen de la muestra es bajo o no se pueden obtener muestras adicionales, para Para llegar a
un diagnóstico rápido. Si se dispone de suficiente volumen de material, la Deben utilizarse métodos para aumentar el rendimiento. do. El líquido pleural es una muestra subóptima para la
confirmación bacteriana de la TB pleural, Utilizando cualquier método. La biopsia pleural es la muestra preferida.
c. La sensibilidad de Xpert MTB / RIF en líquido pleural es muy baja. Sin embargo, cualquier Xpert MTB / El resultado del RIF basado en el líquido pleural debe ser tratado para la TB pleural, Con un
resultado Xpert MTB / RIF negativo debe ser seguido por otras pruebas.
d. Estas recomendaciones no se aplican a heces, orina o sangre, dada la falta de Datos sobre la utilidad de Xpert MTB / RIF en estos especímenes.

43. SERODIAGNÓSTICO DE TUBERCULOSIS
La OMS actualmente no aprueba su uso para el diagnóstico de TB pulmonar ni extra-pulmonar (15). Más investigación
es necesaria para desarrollar tests basados en la respuesta inmune o en el serodiagnóstico y que tengan un desempeño
adecuado.
La detección de anticuerpos es relativamente simple y es un método costo -efectivo, pero recientes meta-análisis y
revisiones sistemáticas concluyen que las pruebas serológicas comerciales disponibles, proveen resultados
inconsistentes
Identificación de especies de Mycobacterium
Micobacterium 50
especies y varias MNT
pátogénicas
M. Vobis
M. Caprae
M. avium, M. kansaii y M. abscessus,
asociados con enfermedad pulmonar
Sin embargo, la identificación por estos métodos es laboriosa, consume tiempo e implica riesgo biológico, sumado
a que una incorrecta identificación puede ocurrir, ya que diferentes especies pueden tener perfiles morfológicos y
bioquímicos no distinguibles.

44. Identificación basada en la tecnología ADN
En la última década, métodos moleculares han sido desarrollados para
la rápida y fiable identificación de especies de micobacterias.
Hay varios sistemas comerciales disponibles para la identificación de
micobacterias.
El test es fácil de realizar y hace posible una identificación rápida. Los
resultados son leídos con un luminómetro. Test individuales para la
identificación de varias importantes micobacterias están disponibles,
incluyendo el complejo M. tuberculosis, M. avium, M. intracellulare, el
complejo M. avium, M. kansasii y M. gordonae.
Más reciente es la introducción de otros sistemas moleculares para la
rápida identificación del complejo M. tuberculosis y MNT: el INNO-LiPA
MYCOBACTERIA v2 (Innogenetics NV, Ghent, Belgium), y el GenoType
MTBC and GenoType Mycobacterium CM/AS (Hain Lifesciences,
Nehren, Germany).
Estos tests son también llamados ensayos de sonda de línea reversa
(reverse line blot assay en inglés) y detectan la presencia de ciertos
loci de ADN, representativos de especies, en un ensayo de
hibridización con un producto de PCR del microorganismo aislado.

45. El GenoType MTBC y el GenoType Mycobacterium CM and AS son también ensayos de sonda de línea. El GenoType MTBC pretende la
diferenciación de miembros del complejo M. tuberculosis, incluyendo M. bovis BCG. El GenoType Mycobacterium CM and AS pueden
identificar 40 de las especies más comunes de MNT, incluyendo al complejo de M. tuberculosis. El GenoType Mycobacterium CM permite la
identificación genética molecular simultánea del complejo M. tuberculosis y de 24 de las especies de MNT más comunes, mientras que el
GenoType Mycobacterium
AS identifica 19 especies adicionales de MNT. En general, los métodos moleculares ofrecen varias ventajas sobre las técnicas
convencionales para la rápida detección e identificación de cepas del complejo M. tuberculosis y de otras micobacterias,
como son el corto tiempo para tener resultados (5-48 horas), confianza y reproducibilidad. El uso de estos métodos
moleculares mejora el manejo del paciente y han sido recomendados por la OMS.

46. Identificación basada en inmunocromatografía
Tres ensayos rápidos inmunocromatográficos ha sido desarrollados para diferenciar entre cepas del complejo M.
tuberculosis y MNT; el BD’s MGIT TBc ID, el Tauns’ Capilia TB (Japan) y el SD Bioline TB Ag MPT64 Rapid Test (Korea).
Los tres son ensayos
inmunocromatográficos de flujo lateral . El
BD y el SD Bioline detectan el antígeno
MPT64, mientras que el Capilia detecta el
antígeno MPB64; ambas proteínas
secretoras específicas del complejo M.
tuberculosis. Tanto medios sólidos como
líquidos pueden ser usados como
muestras, aunque el BD ha sido
desarrollado para usarse con cultivos
líquidos (MGIT)
El tiempo de lectura es de
15 minutos y no se
requiere de equipamiento
especial. Este test ha
mostrado ser altamente
sensible (> 95%) y
específico (> 95%) en
varios estudios clínicos
(24).

47. TEST DE SENSIBILIDAD A DROGAS (TSD, DEL INGLÉS, DRUG SENSITIVITY TESTING)
El surgimiento y diseminación de la tuberculosis multirresistente (TB-MR) y de la tuberculosis extensamente resistente (TB-
ER) son un importante problema médico y de salud pública.
TB-
MDR
TB-
XDR
INH
RFP
INH
RFP
Fluoroquinolona
Al menos a una
de 2da Linea: C, K
y A
Los métodos convencionales para establecer la sensibilidad a drogas son lentos. El más usado, el método estándar de
proporciones, en medio Löwenstein-Jensen o en agar Middlebrook, requiere de 4 a 8 semanas para dar resultados.

48. El método estándar de proporciones es también llamado “método indirecto”, ya que requiere un procedimiento secuencial:
aislamiento de micobacterias de las muestras clínicas, identificación del complejo M. tuberculosis, y las pruebas de
susceptibilidad in vitro en presencia de drogas anti-TB.
Métodos no comerciales de DST basados en cultivo
Métodos basados en cultivo han sido propuestos para la detección rápida de la
resistencia a drogas, propuestos para ser usados en lugares de bajo presupuesto.
Entre estos métodos están la observación microscópica de la resistencia a drogas
MODS ( microscopic observation of drug
susceptibility)
En los métodos MODS y TLA, medios libres de drogas y medios que las contienen
(líquidos para MODS y sólidos para TLA), son inoculados directamente con
especímenes de pacientes. De esta manera no hay primero el crecimiento en
cultivos puros. Los cultivos son microscópicamente examinados para el
crecimiento temprano de micro-colonias. Crecimiento en el medio libre de drogas
indica un cultivo positivo, y el crecimiento en ambos medios indica resistencia.
Los métodos MODS, CRI y el NRA, recibieron la aprobación de la OMS, no así el TLA. Estos métodos tienen similar exactitud que los sistemas
comerciales de cultivo líquido y podrían ser implementados a costos mínimos en lugares de bajos ingresos y con alta cantidad de muestras. Sin
embargo, estas pruebas requieren un extenso entrenamiento del operador así como estandarización y aseguramiento de la calidad antes de su
implementación

49. Pruebas comerciales para la susceptibilidad a drogas (DST) en cultivos líquidos
El sistema comercial de DST más comúnmente usado en cultivo líquido es el BACTEC MGIT 960 system con el kit BACTEC
MGIT 960 SIRE, El método ha demostrado ser equivalente al método estándar de proporciones y ha sido aprobado por la
FDA y promovido por la OMS.
Métodos moleculares rápidos para TSD
El desarrollo de ensayos rápidos basados en el ADN también llamados,
“molecular line probe assays”, que permiten la detección simultánea del
complejo M. tuberculosis y de las mutaciones asociadas con la resistencia a
rifampicina (sola o en combinación con isoniacida). Estos ensayos se basan en
el PCR, y pueden ser usados directamente con especímenes clínicos, dando
resultados dentro de 24 a 48 horas; una mejora considerable en comparación
al tiempo que requiere un convencional TSD, que es generalmente de 1 a 2
meses.
El GenoType MTBDRplus® detecta resistencia a rifampicina así como altos y
bajos niveles de resistencia a isoniacida Recientemente, el GenoType
MTBDRsl se ha diseñado para evaluar la resistencia a drogas anti-TB de
segunda línea (fluoroquinolonas, etambutol, aminoglicósidos y péptidos
cíclicos). Este test puede ser usado en combinación con el MTBDRplus para
identificar TB-ER.
La OMS ha recomendado el uso del INNO-LiPA1 Rif.TB y del GenoType
MTBDRplus® LiPA para el diagnóstico rápido de TB-MR en sitios con
niveles altos de TB-MR. Varios estudios evalúan y demuestran que los
“Line Probe Assays”, son altamente exactos en detectar TB-MR en una
variedad de lugares y que son costo-efectivos cuando se comparan con el
cultivo de TB y los métodos convencionales de DST

50. Basada en pruebas genéticas, 3
genes dan expresión de
actividad de la enfermedad
El test es 99% para
detectar que una
persona esta libre
de enfermedad y
86% de pacientes
con infección de TB
Análisis de Sangre fácil obtener la muestra para el
diagnóstico y se pueden tener resultados en tan
solo unas horas.
Maquina
secuenciadora de ADN
Poder realizar un seguimiento de la respuesta del paciente al
tratamiento con antibióticos.
al hacerle continuas pruebas al paciente durante el tratamiento, es posible determinar
si la infección ha sido superada, lo que potencialmente permitiría acortar la terapia.
“Se está intentando reducir la duración del tratamiento, así que si se puede conocer qué
paciente no necesita el tratamiento durante los seis meses, esto reduciría los costos”,

51. Conclusiones
1. Varios métodos moleculares han sido desarrollados para la detección, identificación de especies, y la evaluación rápida de
la susceptibilidad a drogas de las micobacterias.
2. Estos métodos reducen el tiempo de diagnóstico de la TB de semanas a días. Algunas técnicas son simples, pero otras son
demandantes e incrementan el costo del diagnóstico considerablemente. Algunos de estos nuevos métodos, han sido
recomendados por la OMS y han mostrado su potencial para mejorar significativamente la detección de casos y el manejo de
pacientes, inclusive los casos de TB resistente a drogas.
3.- De acuerdo a reportes de la OMS, el ochenta por ciento de todos los casos mundiales ocurren en 22 países altamente
poblados, (países con alta concentración de TBC con tasas de incidencia mayores a 150 casos por cada 100 mil habitantes
Sudáfrica y Swazilandia) la mayoría de ellos, de bajos recursos .
4.- Con la problemática de la marginalización de los laboratorios por los programas de control de TB, sin personal entrenado,
equipo adecuado y sin mantenimiento; es prioridad para estos países el mejoramiento del sistema nacional de laboratorios,
para proveerlos de microscopios de alta calidad y que accedan al cultivo convencional y a los tests de susceptibilidad a
drogas.
5. Es importante puntualizar que la nueva tecnología no puede reemplazar a los métodos estándares de diagnóstico: cultivo
y el tradicional DST.

52. 6.- Para proveer resultados rápidos y confiables para el diagnóstico de TB y cuidado del paciente, se necesita de una
combinación de pruebas que incluyan tinción de frotis usando microscopio de fluorescencia, métodos con medios de
cultivo sólidos y líquidos, y ensayos moleculares para la identificación de TB y la detección de resistencia a drogas.
7.- Existe todavía la necesidad de incrementar la sensibilidad en la detección de TB entre los pacientes con TB extra-
pulmonar o enfermedad paucibacilar, entre pacientes inmunocomprometidos (VIH) y niños.
8.- Para tener un impacto en el problema de la TB en estos sitios de recursos limitados, el diagnóstico ideal sería un test
sensible, específico, económicamente accesible y de realización en el punto de atención a pacientes.
9.- Varias pruebas para TB en el punto de atención, incluyendo ensayos serológicos mejorados, aditamentos moleculares
manuales, ensayos basados en la respiración para la detección de compuestos orgánicos volátiles en el paciente enfermo,
tecnologías con microchips y tests basados en proteomica y metabolómica, están bajo investigación.