El documento describe diferentes métodos para confirmar el diagnóstico bacteriológico de tuberculosis en niños, incluyendo pruebas de microscopía, cultivo y pruebas moleculares. La microscopía tiene baja sensibilidad en niños, pero puede mejorarse con la recolección y procesamiento adecuado de las muestras. Las pruebas moleculares como Xpert MTB/Rif son más sensibles que la microscopía. El cultivo es el estándar de oro pero requiere procedimientos especiales en niños como aspirado gástrico

1. TUBERCULOSIS PEDIATRICA
DIAGNOSTICO LABORATORIAL
Dra. Nair Lovaton G.
Neumopediatra
REPETUP

2. • La confirmación bacteriológica es especialmente importante para los niños que
tienen:
- sospecha de TB resistente a los medicamentos
- la infección por VIH
- complicados o graves casos de enfermedad de la tuberculosis
- un diagnóstico incierto
- sido tratados previamente.
Guidance for national tuberculosis programmes on the management of tuberculosis in children. World Health Organization. 2014

3. “Muchas de las políticas y prácticas
de salud para niños son extrapoladas
de estudios hechos en adultos”
“Niños son raramente incluidos en los
estudios clínicos”

4. El gran problema
es que no
obtenemos
muestras de
esputo de todos
los niños y menos
aún de los más
pequeños
< 5 años 5 - 11 años 12 años -18 años
3 Cruces 0 2 54
2 Cruces 0 3 96
1 Cruz 0 6 104
Negativa 18 65 436
Sin baciloscopia 133 49 101
0%
10%
20%
30%
40%
50%
60%
70%
80%
90%
100%
Tuberculosis Bacteriológicamente Confirmada por Microscopía
IFHAD Team

5. Pero que hay
de las pruebas
disponibles
para confirmar
el diagnóstico
bacteriológico
Microscopia
Pruebas Moleculares
Cultivo

6. Cual es el gran
problema de la
microscopia
• Para que el examen de
microscopia tenga
probabilidad de dar un
resultado positivo
necesitamos al menos
que hayan 10000
bacilos por mililitro de
esputo.
• Hobby GL, Holman AP, Iseman MD, Jones JM.
Enumeration of tubercle bacilli in sputum of
patients with pulmonary tuberculosis.
Antimicrob Agents Chemother 1973; 4: 94–
104.

7. Por ende tener
estrategias
que mejoren la
efectividad de
la microscopía
son
sumamente
importante
Mejorar la colección de la muestra
• Mismo día vs Técnica Estándar
• Pool de esputo vs Técnica Estándar
• Con Instrucción vs Sin Instrucción
Mejorar el procesamiento de la muestra
• Procesamiento de la muestra
• Concentración de los reactivos
• Modificación en la microscopía
Lectura de la lámina
Asegurar la calidad de la técnica

8. Mismo día vs Técnica Estándar
El primer esputo identifica 85.8%, el segundo esputo identifica 11.9% más y el tercero
identifica 3.1% más.
Mase SR, Ramsay A, Ng V, et al. Yield of serial sputum specimen examinations in the diagnosis of pulmonary tuberculosis: a
systematic review. Int J Tuberc Lung Dis 2007; 11: 485–95.

9. Pool de esputo vs
Técnica Estándar
• Recolectar flema por mas tiempo
incrementa 1.8 veces mas la
probabilidad de tener una muestra
de microscopia positiva
• Recolectar flema por mas tiempo
incrementa el porcentaje de
baciloscopias con mayor grado de
positividad
• Datta S, Shah L, Gilman RH, Evans CA.
Comparison of sputum collection methods
for tuberculosis diagnosis: a systematic
review and pairwise and network meta-
analysis. Lancet Glob Heal. 2017;5(8):e760–
71.

10. Con Instrucción vs
Sin Instrucción
• Recolectar flema por mas
tiempo incrementa 1.8 veces
mas la probabilidad de tener
una muestra de microscopia
positiva
• Datta S, Shah L, Gilman RH, Evans CA. Comparison of
sputum collection methods for tuberculosis diagnosis: a
systematic review and pairwise and network meta-
analysis. Lancet Glob Heal. 2017;5(8):e760–71.

11. Microscopia: Tinción de
Ziehl-Nielsen
• Simple, de bajo
costo y rápido
• Microscopia de
Luz Convencional
Modificación en
la microscopía

12. Microscopia: Tinción de
Auramina O
• Microscopia de
Fluorescencia
Convencional
• Se necesita un
cuarto oscuro.
• Alto costo de las
fuentes de luz de
vapor de mercurio
• Microscopia de
Fluorescencia (Ligth
emitting diode – LED).
• WHO. Policy Statement.
Fluorescent light-emitting
diode (LED) microscopy for
diagnosis of tuberculosis. 2011
Modificación en
la microscopía

13. Modificación en la
microscopía
• LED tiene 10% mas de
sensibilidad (95% IC: 5% -
15%)
• K.R. Steingart, M. Henry, V. Ng, Fluorescence versus
conventional sputum smear microscopy for
tuberculosis, a systematic review, Lancet Infect. Dis. 6
(9) (2006) 570–581

14. Pruebas moleculares:
NAAT (Tecnica de
amplificacion de acidos
nucleicos)
(Xpert MTB/Rif)

15. Pruebas moleculares:
Xpert MTB/Rif
• Debe ser usado como prueba inicial en
los niños con sospecha de TB MDR o
TB asociado a VIH (Recomendación
fuerte).
• Debe ser usado como prueba inicial en
los niños con sospecha de TB
(Recomendación condicional).

16. Pruebas moleculares:
Xpert MTB/Rif
• Debe ser usado de
preferencia en vez de la
baciloscopia porque es
más sensible Y LOS NIÑOS
HACEN FORMAS MAS
SEVERAS
IFHAD Team

17. Pruebas
moleculares: NAAT
• Pero resultado negativo
no descarta enfermedad
• (sensibilidad aprox 70%
pero especificidad del
98% vs cultivo con baja
calidad de evidencia y alta
incertidumbre)
IFHAD Team

18. Xpert tiene
62% sensibilidad (esputo inducido o expectorado)
66% sensibilidad (lavado gástrico)
98% especificidad
Xpert TB /rif tiene 40%
mas sensibilidad que
sensibilidad por
microscopia

19. Procedimientos
especiales para
niños que no
expectoran:
Menores de 12
años
• Aspirado gástrico
• Si no es procesado dentro
de las 4 horas, se debe
neutralizar la muestra con
carbonato de sodio
• Esputo inducido
• Esputo inducido puede ser
generado en niños tan
pequeños como de un mes
de edad
• Un solo esputo inducido
puede rendir tan bien con 3
muestras de aspirado
gástrico

20. Procedimientos especiales para niños que no expectoran: Menores de 12 años
Dunn JJ, Starke JR, Revell PA. 2016. Laboratory diagnosis of Mycobacterium tuberculosis infection and disease in children. J
Clin Microbiol 54:1434–1441. doi:10.1128/JCM.03043-15.

21. Cultivo
• Es el Gold Estándar para el
diagnóstico de tuberculosis
recomendado por la OMS.
• Importante para confirmar el
diagnóstico.
• Permite tener el resultado de
una prueba de sensibilidad.
• Tenemos dos medios de
aislamiento: Liquido y Sólido.

22. Cultivo: Aspirado Gástrico
Mas de 2
aspirados
gástricos no
aumenta
mucho el
rendimiento
Cruz A, Revell P, Starke J. 2013. Gastric aspirate yield for children with suspected pulmonary tuberculosis. J Ped Infect Dis 2:171–
174. http://dx.doi.org/10.1093/jpids/pis089

23. Cultivo: Aspirado Gástrico vs Esputo Inducido
Hatherill M, Hawkridge T, Zar H, Whitelaw A, Tameris M, Workman L, Geiter L, Hanekom W, Hussey G. 2009.
Induced sputum or gastric lavage for community-based diagnosis of childhood pulmonary tuberculosis? Arch Dis
Child 94:195–201. http://dx.doi.org/10.1136/adc.2007.136929.
El rendimiento de 2
aspirados gástricos
en dos días
consecutivos es
similar a un aspirado
gástrico + un esputo
inducido tomado el
mismo día.

24. Cuándo tomar la muestra de aspirado gástrico,
muestra nebulizada o lavado
bronquioalveolar?
• Estudios comparativos entre esputo inducido (mediante nebulizaciones con salino hipertónico) y
lavado gástrico, indican que:
• Un óptimo rendimiento puede ser obtenido combinando EI y LG tomados en un solo día (1)
• El lavado gástrico no demostró ser mejor que el esputo inducido para la detección de Mtb. Más bien
ambos pueden considerarse complementarias entre sí. (2)
• Estudios comparativos entre lavado gástrico y Lavado bronquioalveolar indican que:
• No hay diferencias entre lavado gástrico y lavado broncoalveolar, sin embargo cuando se
complementan su rendimiento se aumenta. (3)
(1) M Hatherill, T Hawkridge, H J Zar et al. Induced sputum or gastric lavage for community-based diagnosis of childhood pulmonary tuberculosis. Arch Dis Child.2009
(2) DR Sangita; DR Abhay Charan Pal. Role of Gastric Lavage and Induced Sputum in Diagnosis of Chilhood Tuberculosis2016 (15)Ver. VII
(3) Singh M, et al. Role of gastric lavage and broncho-alveolar lavage in the bacteriological diagnosis of childhood pulmonary tuberculosis.Indian Pediatrics.2000
Lo importante es realizar
El método que sea factible hacer
y en la cual se tenga experiencia
a no hacer nada