El documento describe los diagnósticos serológicos de varios virus incluyendo el virus del herpes, Epstein-Barr, citomegalovirus y varicela. Explica que estas pruebas miden los anticuerpos producidos en respuesta a estos virus y pueden indicar infecciones pasadas o actuales. También detalla los métodos de prueba como ELISA y Western Blot y cómo interpretar los resultados de anticuerpos IgG, IgM e IgA.
2. Diagnóstico Serológico
Es un análisis que mide el número de anticuerpos que
se producen ante la presencia de un virus en la parte
clara de la sangre (sero).
3. Diagnóstico serológico virus del
herpes simple.
El diagnóstico serológico, basado en la
determinación de los anticuerpos específicos
frente a los VHS, no resulta en general de tanta
utilidad como el diagnóstico directo basado en el
aislamiento del virus o en la aplicación de
metodología molecular.
Sin embargo debido al amplio espectro de
infecciones por los VHS, vamos a encontrarnos
ante casos en los que resulte necesario recurrir a
la detección de anticuerpos específicos de cada
tipo de virus, principalmente en el suero o en el
líquido cefalorraquídeo (LCR) del paciente.
Esto ocurre sobre todo cuando el aislamiento del
virus no resulte posible, en situaciones de
negatividad del diagnóstico directo o en aquellos
casos en los que la toma de una muestra
adecuada suponga un riesgo no justificable.
4. Técnicas disponibles en el diagnóstico
serológico de los VHS
Las técnicas de ELISA son las más utilizadas actualmente, al estar
además disponibles comercialmente. Permiten la detección de
anticuerpos IgG o IgM y la diferenciación, no sin problemas, entre
los dos tipos.
La técnica de inmunotransferencia o western-blot (WB), aunque
descrita hace más de diez años, se utiliza en la diferenciación de
los dos tipos de VHS como método de referencia, con los
problemas ya conocidos de coste, tiempo y laboriosidad.
5. Pruebas basadas en antígenos específicos
de VHS-1 y VHS-2.
• Que utilizan como antígeno la glucoproteína gG.
• Se han desarrollado diversos métodos comerciales para la
determinación de anticuerpos específicos de tipo, según
utilicen como antígeno la glucoproteína G del VHS-2 (gG-2)
o del VHS-1 (gG-1).
Pruebas de
EIA(ELISA)
• Incluye bandas tipo común de proteína recombinante D
(gD), un péptido dominante específico del VHS-1 (gB-1 o
gG-1) y un antígeno recombinante (gG-2) específico del
VHS-2.
• Es útil para la detección precoz de la respuesta serológica y
la diferenciación entre infección por VHS-1, VHS-2 o por
ambos.
Técnica de
immnunobloting
en tira o RIBA
6. Indicaciones e interpretación de la
serología de los VHS.
Un resultado serológico (detección de IgG) negativo indicará la ausencia de un contacto
previo con el VHS o la falta de una respuesta inmunitaria debida a alteraciones en su
sistema inmune, o porque la infección está en su fase inicial.
La presencia de anticuerpos totales, por el contrario, será evidencia de una infección
herpética en fecha no precisada.
La presencia de IgM será reflejo de una infección en evolución, aunque no siempre
será sinónimo de infección primaria, ya que es posible detectar este tipo de
anticuerpos en algunas recurrencias.
La ausencia de seroconversión, o una prueba de IgM negativa indicarán una infección
previa no activa en el momento del estudio.
8. ¿Por qué se realiza la prueba?
Se utiliza para evaluar la presencia de la Mononucleosis Infecciosa o
enfermedad producida por el virus de Epstein-Barr como confirmación de la
técnica de Paul-Bunnell, y como evaluación del estadio de la enfermedad.
Si una persona tiene una mononucleosis infecciosa por infección del virus
EB, lo primero que a aparecen son los anticuerpos anti-ACV.
La presencia de anticuerpos anti-ACV y anti-ANEB solo indica que ha existido la
infección pero no que esté en periodo activo de la misma. La infección activa se
confirma por la presencia de títulos altos de anticuerpos anti- ACV IgM.
9. Técnica
Localizar una vena apropiada y en
general se utilizan las venas
situadas en la flexura del codo.
La persona encargada de tomar la
muestra utilizará guantes
sanitarios, una aguja (con una
jeringa o tubo de extracción).
Pondrá un tortor en el brazo para
que las venas retengan más sangre
y aparezcan más visibles y
accesibles.
Limpiará la zona del pinchazo con
un antiséptico y mediante una
palpación localizará la vena
apropiada y accederá a ella con la
aguja. Tomará la muestra y le
soltarán el tortor.
Se extrae la aguja y se presiona la
zona con algodón para favorecer la
coagulación y se le indicará que
flexione el brazo y mantenga la
zona presionada con un
esparadrapo durante unas horas.
La sangre extraída se traslada al
laboratorio de análisis en un tubo
especial para bioquímica, que
contiene un producto
anticoagulante.
13. Pruebas serológicas.
La prueba ELISA es la
prueba serológica más
amplia y comúnmente
empleada para medir los
anticuerpos anti-CMV.
Puede emplearse para
determinar si la infección
es aguda, o los anticuerpos
han sido adquiridos por el
recién nacido a partir de su
madre, de forma pasiva.
Otras pruebas son las de
inmunofluorescencia,la
hemaglutinación indirecta
y la aglutinación en látex.
14.
15. Para diagnosticar la infección primaria por CMVH, tanto en el
paciente normal como en el inmunodeprimido (tabla 2). Los
métodos diagnósticos directos no permiten distinguir la infección
primaria de la reactivación y reinfección. Tan sólo la demostración
de seroconversión, por cualquier método serológico, permite el
diagnóstico cierto de infección primaria.
17. Técnicas más usadas para el diagnóstico.
La fluorescencia indirecta
contra antígeno de
membrana (FAMA)
La aglutinación con látex
Enzimoinimunoanálisis
(ELISA)
A diferencia de otras
enfermedades infecciosas, la
detección de IgM frente al
virus de varicela puede
carecer de sensibilidad y
especificidad.
18. Falsos Negativos.
La aparición de falsos
negativos es relativamente
frecuente en presencia de
títulos altos de IgG (esto
puede ocurrir en sujetos con
infección aguda).
La reactivación del virus
(meses o años tras la
infección aguda) induce en
muchos pacientes la
producción de IgM.
Una elevación significativa de
los títulos de IgG
(seroconversión) puede
resultar útil para el
diagnóstico de herpes zoster
19. Reactivaciones.
Las reactivaciones (herpes
zóster), se acompañan de
un aumento del título de
anticuerpos de la clase IgG
Que se pueden detectar
por técnicas de fijación de
complemento, pero que
no son útiles como
diagnóstico.
Los anticuerpos de la clase
IgG se detectan sobre
para comprobar el estado
inmune de aquellos
pacientes que se someten
a trasplante de órganos.